6. Серодиагностика сифилиса с использованием рск.

Реакция Вассермана: можно использовать сыворотку крови больного и спинномозговую жидкость (на стадии нейросифилиса). В качестве диагностикума – трепонемный или кардиолипиновый антиген. Компоненты: 1 система – сыворотка больного, диагностикум, комплемент, ИХН; 2 система – гемолитическая сыворотка и взвесь эритроцитов барана. Готовят 1 систему, инкубируют 37С 1 ч. Добавляют вторую, инкубируют 37С 1 ч. Положительный результат – отсутствие гемолиза.

7. Методы микробиологической диагностики лептоспироза.

Бактериоскопический метод: готовят препарат раздавленной капли, изучают его в темнопольном микроскопе: подвижные тонкие нити с изгибами на концах (вторичные завитки) – в виде скобы или буквы S.

Бактериологический метод: материал – кровь, моча, спинномозговая жидкость. Материал засевают (3-5 пробирок) в водно-сывороточную среду, среду Флетчера, Картофа. Инкубируют до 30 суток при 28-30С в атмосфере СО₂. Для выявления роста лептоспир через 10 дней после посева из пробирки берут материал, готовят препарат раздавленной кали и изучают в темнопольном микроскопе. Из пробирки, где обнаружен рост лептоспир, пересевают в 3 пробирки со свежей питательной средой, инкубируют 7-10 дней, температура та же. Для дифференциации проводят бикарбонатный тест, определяют гемолитическую активность, фосфолипазную активность. Идентифицируют по антигенной структуре с помощью агглютинирующих сывороток.

Биологическое исследование: морским свинкам вводят внутрибрюшинно 1 г исследуемого материала и наблюдают в течение месяца, отмечая температуру и вес тела, появление желтухи и кровоизлияний, а также гибель животного.

Серологическое исследование: АТ в сыворотке появляются со 2 недели. Используют реакции микроагглютинации и лизиса лептоспир. Сыворотку больного разводят двукратно от 1:100 до 1:1600. В ряд пробирок вносят 0,2 мл разведенной сыворотки и такое же количество живой культуры штаммов лептоспир. Инкубируют 1 час при 37С. Из содержимого каждой пробирки готовят препарат раздавленной капли и микроскопируют. АТ в сыворотке первых разведений обусловливают лизис – растворение или зернистое набухание лептоспир. В последующих разведениях – агглютинация – агломераты в виде паучков. Диагностическое значение имеет положительная реакция в разведении 1:400 и выше.

8. Методы микробиологической диагностики боррелиозов

Бактериоскопический: берут кровь из пальца и готовят препарат толстой капли и мазок. Препарат толстой капли окрашивают по Романовскому-Гимзе: боррелии имеют вид тонких нитей сине-фиолетового цвета с несколькими большими неравномерными завитками. В мазках длина боррелии превосходит поперечник эритроцита в 2 и более раз. При темнопольной микроскопии боррелии совершают беспорядочные движения.

Биологический: используют для дифференциации возбудителей клещевого и возвратного тифа. Для этого 0,5-1 мл цитратной крови от больного вводят подкожно морским свинкам. В случае клещевого тифа через 5-6 дней в крови животного появляется большое количество боррелий, возбудитель возвратного тифа является непатогенным для морских свинок.

Серологический: реакция нагрузки боррелий тромбоцитами. Сыворотку крови больного смешивают с цитратной плазмой крови гвинейских свинок в одинаковых объемах. К этой смеси добавляют культуру боррелий, тщательно перемешивают, инкубируют 15 мин в термостате, а затем готовят препарат "раздавленной капли" и исследуют в темнопольном микроскопе. В присутствии специфических антител тромбоциты гвинейской свинки облепляют тела боррелий и последние перестают двигаться.

9. Ультрамикроскопическое строение спирохет в виде схемы. Указать название структур этих микроорганизмов. (рисунок увеличьте)

Спирохеты состоят из наружной клеточной стенки, которая окружает цитоплазматический цилиндр. Поверх наружной стенки располагается прозрачный чехол гликозамингликановой природы. Под наружной стенкой располагаются фибриллы, закручивающийся вокруг цитоплазматического цилиндра, придавая бактериям винтообразную форму. Число фибрилл варьирует: у трепонем – 3-4, боррелии – 7-20, лептоспиры – 2.