Міністерство освіти і науки України

ОДЕСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ ПОЛІТЕХНІЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

Хіміко-технологічний факультет

Кафедра органічних і фармацевтичних технологій

МЕТОДИЧНІ ВКАЗІВКИ ДО ВИКОНАННЯ

ЛАБОРАТОРНИХ РОБІТ З ДИСЦИПЛІНИ

«МЕДИЧНА БОТАНІКА»

АНАТОМІЯ РОСЛИН

Для студентів спеціальності

6.110204 – Технологія фармацевтичних препаратів

Галузь знань – 1202 «Фармація»

Напрямки підготовки: 6. 120201 – «Фармація»

Рівень підготовки – бакалавр

Одеса-2013

,

Методичні вказівки до виконання лаборатоних робіт з дисципліни „Медична ботаніка” Анатомія рослин для студентів спеціальності 6.110204 – Технологія фармацевтичних препаратів / Укл.: Протункевич О.О., Присяжнюк К.О. Одеса – 201,31, ОНПУ - 18 с.

Укладачі: Протункевич О.О., к. б. н., доц. каф. ОФТ

Присяжнюк К.О., старш. викладач каф. ОФТ

ЗМІСТ

Вступ 3

Тема: Цитологія рослин 6

Лабораторна робота №1 Будова рослинної клітини. Вивчення компонентів клітини, які мають діагностичне значення 6

Лабораторна робота №2 9

Мікрохімічний аналіз метаболітів рослинної клітини. 9

Тема: Гістологія рослин Лабораторна робота №3 Будова покривних та видільних тканин 11

Лабораторна робота №4 Будова основних, провідних та механічних тканин 13

Тема: Анатомічна будова вегетативних органів рослин Лабораторна робота № 5 Анатомічна будова кореня. 14

Лабораторна робота № 6 Внутрішня структура листка 15

Лабораторна робота № 7 Анатомічна будова стебла 17

Лабораторна робота № 8 Анатомічна будова стебла 18

Список літератури 20

Додаток 20

Вступ

Лабораторний практикум з анатомії рослин проходять студенти 1-го курсу (2-й семестр) спеціальності 7.110204 - "Технологія фармацевтичних препаратів".

За навчальним планом лабораторні роботи з анатомії рослин проводяться паралельно з вивченням теоретичного курсу «Медична ботаніка» і використовуються для закріплення і поглиблення теоретичних питань і придбання практичних навичок макро- і мікроскопічного аналізу рослинної сировини.

Медична ботаніка вивчає анатомію, морфологію, систематику лікарських рослин і є базовим курсом для вивчення фармакогнозії. Основна увага в практикумі приділяється основам ботанічного мікроскопічного аналізу; особливостям анатомічної будови вегетативних і генеративних органів рослин, що належать до різних класів; компонентам рослинних клітин, які мають діагностичне значення; якісним мікрохімічним реакціям на продукти метаболізму клітини.

Перед початком лабораторного практикуму студенти проходять інструктаж з техніки безпеки.

Спостереження і результати лабораторної роботи студенти вносять до протоколів, які оформлюються відповідно до установленої форми (див. додаток), і після закінчення роботи подаються викладачу для заліку.

1. Техніка мікроскопічного дослідження анатомічної будови рослин

1. Обладнання, необхідне для практикуму:

• світловий мікроскоп з набором об'єктивів і окулярів;

• предметне скло (формат 76 х 26);

• покривне скло (формат 18 х 18);

• лезо для готування зрізів;

• препарувальна голка;

• скляні палички для нанесення реактивів;

• смужки фільтрувального паперу (50 х 10);

• марлеві серветки;

• пінцети сталеві.

2. Реактиви для мікроскопічного аналізу

• Для готування реактивів і тимчасових мікропрепаратів вживається водопровідна вода.

• Суміш етилового спирту і диетилового ефіру (1:1) для обезжирювання предметного та покривного скла.

• Гліцерин, розведений з водою (1:3), застосовується для готування тимчасових мікропрепаратів і для розм'якшення твердих частин рослин.

• Реактив Люголя: 0,5 г йоду і 1 г йодиду калію розчиняють у 100 мл води. Перед вживанням розчин розбавлюють водою у відношенні 1:4. Вживається для якісної реакції на крохмаль (пофарблюється в синій колір) і білок (пофарблюється в жовтий).

• Флороглюцина розчин з концентрованою соляною кислотою. Готують в окремих склянках. 0,5 % розчин флороглюцину у 50 % етиловому спирту. Використовують для реакції на здерев`яніння і виявлення в клітинних стінках лігніну. На досліджуваний об'єкт наносять краплю флороглюцину, через 1-2 хв добавляют краплю концентрованої соляної кислоти. Лігнін пофарблюється в малиновий колір.

• 5 % розчин лугу (NаОН чи КОН). 5 г лугу розчиняють у 100 мл води. Використовують для знебарвлення зелених частин рослин. Досліджуваний об'єкт кип'ятять у розчині лугу кілька хвилин до знебарвлення, потім промивають водою.

3. Методи анатомічного дослідження різноманітних видів рослинної сировини

1.3.1. Суха рослинна сировина

• Листи, трав'янисті стебла, плоди (цільна і різана сировина). У листів беруть край листа і ділянку з провідною жилкою, у квіток - чашечку і віночок, у стебел - подовжній відрізок, поміщають у пробірку і кип'ятять у лузі. Потім промивають водою і поміщають у краплі гліцерину на предметне скло. При необхідності розплющують.

• Плоди і насіння. При дослідженні їх кип'ятять у розчині лугу, попередньо треба розм'якшити у водяних парах. Для готування поперечних зрізів дрібні насіння поміщають у шматочок парафіну, зріз роблять через об'єкт разом з парафіном.

• При вивченні запасних поживних речовин вологе (при необхідності) насіння роздавлюють скальпелем на предметному склі і проводять необхідні якісні реакції:

  • для виявлення крохмалю об'єкт поміщають у розчин Люголя, від йоду крохмаль синіє;

  • жирна олія пофарблюється розчином судану ІІІ в оранжево-жовтий колір;

  • для виявлення слизу об'єкт поміщають у розчин чорної туші, слизі помітні у вигляді безбарвних мас на чорному тлі;

  • тверді частини рослин: корені, кореневища, стебла, сухі лусочки розмочують протягом декількох днів у розчині гліцерину. При дослідженні проводять реакцію з флороглюцином для виявлення здерев'янілих елементів.

1.3.2. Свіжа рослинна сировина

При вивченні свіжої сировини бритвою роблять зріз досліджуваної ділянки (поперечний чи подовжній) і поміщають на чисте предметне скло. Потім додають краплю води або необхідного для проведення якісної реакції реактиву, закривають покривним склом і поміщають у поле зору мікроскопа.

2. Лабораторний світловий мікроскоп і техніка мікроскопіювання

2.1.Будова світлового мікроскопа

Світловий мікроскоп - оптичний прилад, що дає збільшене зворотне зображення досліджуваного об'єкта. Складається з оптичної, механічної й освітлювальної частин.

Механічна частина: штатив, тубус, що несе окуляр і об'єктив, предметний столик, револьвер, макрометричний і мікрометричний гвинти.

Оптична система: об'єктив і окуляр. Для визначення загального збільшення мікроскопа збільшення об'єктива множать на збільшення окуляра.

Освітлювальна система: дзеркало, конденсор, ірисова діафрагма.

2.2. Правила роботи з мікроскопом:

• установити мікроскоп так, щоб дзеркало знаходилося проти дже­рела світла;

• відкрити цілком діафрагму, підняти конденсор у крайнє верхнє положення;

• поставити в робоче положення об'єктив малого збільшення;

• дивлячись лівим оком в окуляр, обертати дзеркало до повного висвітлення поля зору;

• покласти на предметний столик мікропрепарат, дивлячись збоку, опустити за допомогою макрогвинта об'єктив на відстань 4-5 мм до мікро­препарату;

• дивлячись в окуляр, за допомогою макрогвинта повільно підні­мають тубус до отримання чіткого зображення мікропрепарату;

• для переходу на велике збільшення об'єкт поміщають у центр поля зору;

• поворотом револьвера встановлюють у робоче положення об'єк­тив х 40, мікрогвинтом домагаються чіткої видимості об'єкта;

• по закінченні роботи установити мале збільшення і зняти препа­рат;

• окуляр, об'єктиви і дзеркало протерти сухою м'якою серветкою.

2.3. Методика приготування тимчасового мікропрепарату

Узяти за бічні грані предметне скло з чашки Петрі, покласти на стіл. Помістити в центр скла об'єкт. Очною піпеткою нанести на нього краплю води або необхідного препарату. Покривним склом (тримати за бічні грані) закрити об'єкт. Покласти готовий мікропрепарат на предметний столик та розглянути під мікроскопом.