Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Конспект Біоенергетика.doc
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
4.15 Mб
Скачать

Очистка і характеристика ендоглюканаз із мікробних джерел 11

Мікроорганізм - продуцент

Методи виділення і очистки

Характеристика

Sporotrichum

рulverulentum

Осадження сульфатом амонію, іонообмінна хроматографія на ДЕАЕ-сефадаксі і SP-сефадаксі, афінна хроматографія на конканавалін-А-сефарозі

П’ять ендоглюконаз, що відрізняються Mr, pl, складом вуглеводів, кінетичними параметрами.

Irpex lacteus

Гель-фільтрація через Біогель Р-100, хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі

Ендоглюконаза з Mr 15500, низьким вмістом вуглеводів

Humicola insolens

Осадження сульфатом амонію, адсорбція на авіцелі, гель-фільтрація на Сефадексах G-50, G-100, хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі

Ендоглюконаза з високою термостабільністю і високим вмістом вуглеводів (39%)

Termoascus aurantiacus

Осадження сульфатом амонію, гель-хроматографія на Сефадексі G-100, препаративний електрофорез

Три термостабільні ендоглюконази, що відрізняються Mr, pl, вмістом вуглеводів

Trichoderma viride

Фракційне осадження сульфатом амонію, афінна хроматографія на порошковій целюлозі, хроматографія на ДЕАЕ-сфероні, хроматофокусування

Шість ендоглюконаз, що відрізняються вмістом вуглеводів, адсорбційною здатністю на целюлозі та лігніні

Clostridium thermocellum

Осадження сульфатом амонію, хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі і SP-сефадексі

Ендоглюконаза з Mr 80 кДа

Talaromyces emersoni

Осадження сульфатом амонію, гель-фільтрація через Сефадекс G-150, хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі, препаративний електрофорез

Чотири ендоглюконази з однаковою специфічністю, активністю, що відрізняються pl, Mr, вмістом вуглеводів

Trichoderma reesei L27

Іонообмінна хроматографія на ДЕАЕ-сефарозі CL-6В рехроматографія в різноманітних умовах елюіювання

Ендоглюконази І-ІІІ, що відрізняються pl і вмістом вуглеводів

Scierolium rolfsii

Адсорбція на Авіцелі, гель-фільтрація на Біогелі Р-150, препаративне ізоелектрофокусування

Три ферменти з однаковою Mr і різними pl

Schisophillum

commune

Осадження сульфатом амонію, гель-фільтрація через Біогель Р-150

Ендоглюконази з pl, що знаходиться в лужному середовищі

Таблиця 9.2

Очистка і характеристика целобіогідролаз із мікробних джерел 11

Мікроорганізм - продуцент

Методи виділення і очистки

Характеристика

Humicola insolens

Адсорбція на МКЦ, десорбція при рН 9,0, хроматографія на Сефадексах G-50 і G-100, хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі

Містить 26% вуглеводів, підвищена адсорбційна здатність, термостабільність

Trichoderma reesei

Іонообмінна хроматографія на ДЕАЕ-сефарозі, препаративне ізоелектрофокусування

Виділено дві целобіогідролази, що відрізняються рІ, складом вуглеводів

Penicillium funiculosum

Іонообмінна хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі, препаративне ізоелектрофокусування

Містить 9% нейтральних вуглеводів

Termoascus aurantiacus

Фракційне осадження сульфатом амонію, гель-хроматографія на Сефаадексі G-100, препаративний дискелектрофорез

Низький вміст вуглеводів, висока термостабільність

Geotrichum candidum

Іонообмінна хроматографія на ДЕАЕ-сефадексі, ізоелектричне фокусування на колонці

Фермент з рІ 5,9 і Mr 63 кДа

Trichoderma viride

Фракційне осадження сульфатом амонію, афінна хроматографія на порошковій целюлозі, хроматографія на ДЕАЕ-сфероні, преперативне ізоелектрофокусування в гелі

Різноманітні форми целобіогідролаз з рІ 3,8; 4,0; 4,2; подібна субстратна специфічність

Acetivibris celluloyticus

Препаративний гель-електрофорез

Фермент з Mr38 кДа

Tricoderma viridereesei

Іонообмінна хроматографія на Сфероні-P і ДЕАЕ-сефадексі, гель-електрофорез

Визначений амінокислотний склад фермента,N-кінцеві амінокислоти

Sclerotium rolfsii

Хроматографія на Сефадексі G-75 і ДЕАЕ-сефадексі, гель-електрофорез

Висока термостабільність, висока активність за целюлозою

Trichoderma reesei

Афінна хроматографія, хроматографія на ДЕАЕ-сефарозі і SP-сефадексі

Целобіогідролаза ІІ, вивчена субстратна специфічність

Fusarium lini

Фракційне осадження сульфатом амонію, ізоелектрофокусування

Ферменти, що відрізняються біохімічно і за субстратною специфічністю

Таблиця 9.3