4. Получение трансгенных растений

_{Указанным выше способом новые гены вводят в растения с помощью агробактерий. Наиболее простой путь введения - заражение пораненных растений с образованием корончатогалловых опухолей. Однако опухолевые клетки не способны к регенерации растений. При заражении растений некоторыми штам­мами агробактерий образуются тератомы - опухоли-уродцы, состоящие из смеси дифференцированных клеток, способных дать начало различным частям расте­ний. Если этих уродцев привить к здоровому корню, то можно получить нор­мальные растения с чужеродными генами, введенными через агробактерию. Од­нако потомство таких растений утрачивало новый признак. Новый ген, введен­ный с онкогенами, не мог пройти через мейоз, что обусловлено защитой против опухолевых генов. Повреждение онкогенов приводило к тому, что вставленные гены наследовались в потомстве клетки с освобожденными от онкогенов, но не­поврежденными участками ДНК. Участки с вставленным геном и генами опинов стали культивировать на среде с добавлением фитогормонов, образованием кал­луса и развитием растения. Лишенная онкогенов т-ДНК не мешает регенерации растительной клетки, способна пройти через мейоз и наследоваться в потомстве. Для переноса генов с агробактериями их выдерживают некоторое время с прото­пластами растительных клеток. Голые протопласты более проницаемы для круп­ных молекул, чем одетые клетки. Кроме протопластов можно использовать мезофильные клетки листьев (злаки трудно поддаются протопластированию и регене­рации протопластов).}

5. Получение трансгенных животных.

_{Успехи, достигнутые в выделении генов высших организмов, их рекомбинирование с бактериальными плазмидами, клонирование в бактериях, выяснение последовательности составляющих их нуклеотидов, интеграция рекомбинантной ДНК в живую клетку и экспрссия (размножение) чужеродных генов позволяют говорить о возможности разработки принципиально новой биотехнологии создания животных с нужным геном. Эксперименты показали, что культивируемые клетки высших животных становятся носителями новых наследственных свойств и продуцируют новые для них вещества. Однако методы генетической инженерии для млекопитающих и особенно сельскохозяйственных животных пока слабо разработаны. Одной из причин этого является то обстоятельство, что до сих пор не найдены эффективные и надежные векторы – плазмиды, которые могли бы вносить нужные гены в клетки животных. Другой и, очевидно, главной причиной является глубокая дифференциация клеток у высших животных. Известно, что из одной растительной культивируемой клетки, в которую удалось внести новый ген, можно получить многоклеточный организм – целое растение, в котором чужеродное ДНК будет присутствовать во всех клетках. Поскольку из соматических клеток высших животных получить целый многоклеточный организм не представляется возможным, этот путь нельзя использовать для переноса генов в многоклеточное животное. Новый подход для направленного изменения генома высших животных основан на введении в зиготу или ранний эмбрион клонированных эукариотических генов в составе бактериальных плазмид. Животных, в геном которых интегрируют чужеродные гены, называют трансгенными.}

_{(Клонирование – это размножение в бактериальной клетке рекомбинантной молекулы ДНК.)}

_{Вопросы для самопроверки}

1. _{Что такое нуклеиновые кислоты, их функция?}

2. _{Что значит рестриктаза, ДНК- лигаза, вектор, реципиент, плазмида?}

3. _{Какова технология получения трансгенных растений и животных?}