2. Материалы и методы
2.1 Социологический опрос учащихся нашей школы.
В опросе участвовало 106 человек из 4-9 и 11 классов. Анкеты распечатывали и предлагали заполнить дома вместе с родителями, т.к. не все школьники помнят какую марку фильтра, к примеру, установили дома.
2.2 Проверка воды на контрафактность.
Проводилась по двум доступным нам простейшим показателям. Мы предположили: если перед нами не артезианская вода, а водопроводная, разлитая недобросовестным производителем из-под крана, то в ней мы можем обнаружить клетки водорослей (они присутствуют в водопроводной воде, согласно нашим исследованиям) или хлор.
Анализ наличия клеток водорослей
Пробы концентрировали фильтрационным методом через мембранный фильтр МФАС-ОС-2 с диаметром пор 0,45 мкм. На рисунке 4 представлена фильтровальная установка.
Рис. 4 Фильтрация проб воды
Она состоит из вакуумного насоса, присоединенного к колбе Бунзена. На пробке колбы Бунзена расположена сеточка, на которую укладывается мембранный фильтр. Сверху устанавливается воронка. Вакуумный насос создает пониженное давление в колбе Бунзена, пробу воды наливаем в воронку, и вода активно фильтруется.
Брали 500 мл бутилированной воды, пропускали через фильтр. После того как вода профильтровалась, все, что было на фильтре смывали с помощью кисточки и 1 мл той же воды (точно отмеряли автоматической пипеткой). Просмотр проб на наличие клеток водорослей производился с помощью микроскопа Альтами 138Т при 400-кратном увеличении
Оценка содержания хлора
Проводилась стандартным йодометрическим методом. Анализ проводили самостоятельно под руководством сотрудника химлаборатории Центра гигиены и эпидемиологии. Для этого навеску в 500 мг калия йодистого растворяли в 1 мл дистиллята, добавляли 5 мл буферного раствора для подкисления среды (уксусная кислота + ацетат натрия). Приливали 100 мл пробы воды. В качестве контроля использовали водопроводную воду, в которой точно есть хлор. Выдерживали 5 минут в темноте. При этом йод в калии йодистом замещается на хлор, если он есть в исследуемой воде. Затем капали несколько капель раствора крахмала. Синяя окраска в контроле служит показателем наличия йода в растворе, а значит хлора в исходной пробе водопроводной воды.
2. 3. Биотестирование на дафниях выполнено в школьной предметной лаборатории биологии по стандартной методике ФР.1.39.207.03222 [5]
Для начала эксперимента нам понадобилось произвести некоторую подготовку. Сначала мы вырастили культуру зеленых водорослей Scenedesmus quadricauda, используемых нами в качестве корма для дафний. Конечно, нам для проведения биотестирования понадобились сами подопытные, т. е. рачки – Daphnia magna. Их мы привезли из г. Челябинска, из аккредитованной лаборатории Уральского научно-практического центра радиационной медицины.
В качестве культивационной воды мы используем бутилированную воду марки «Ниагара». Чтобы начать исследование, из маточной культуры мы создали синхронизированную культуру. Для этого мы взяли одну дафнию и посадили её в отдельный стакан для размножения. Таким образом, мы получили потомство от одной дафнии в третьем поколении, а значит, у всех особей в этой культуре похожий хромосомный набор, а значит, и похожие реакции на незнакомую среду обитания. Получив достаточное количество особей, мы провели ряд опытов, которые происходили следующим образом. Мы тестировали 4 вида бутилированной воды, одну пробу водопроводной воды, одну пробу, очищенную через фильтр Аквафор Трио. Одновременно тестировали 2 вида воды с контролем (культивационная «Ниагара»). Воду предварительно насыщали кислородом в течение суток с помощью аквариумного компрессора. Тестирование проводили в емкостях объемом 150 мл, наливая в каждую по 100 мл исследуемой воды. Каждую пробу тестировали в трех повторностях (три емкости по 100 мл пробы, всего 30 дафний на опытную группу).
Таким образом, за один раз можно протестировать 3 вида воды, но не больше, т. к. молоди дафний может не хватить. Выбираются дафнии желательно только что родившиеся. Сажается по 10 рачков в каждую ёмкость. Две группы являются опытными, а одна - контрольной. Эксперимент длится четверо суток. Каждые сутки необходимо пересчитывать дафний, а впервые сутки - надо пересчитывать рачков каждый час и так 6 часов. Если в контрольном сосуде смертность составляет более 10%, то эксперимент считается недействительным.