
- •Часть I
- •Содержание
- •Лабораторная работа № 1
- •Аминокислоты
- •Реакции аминокислот, обусловленные одновременным присутствием карбоксильных и аминогрупп:
- •Реакции аминокислот, обусловленные присутствием карбоксильных групп:
- •Реакции аминокислот, связанные с присутствием аминогрупп:
- •Методы разделения и идентификации аминокислот
- •Пептиды
- •Реакция с формальдегидом
- •Реакция Адамкевича
- •Реакция Гопкинса-Коле
- •Лабораторная работа № 2
- •Физико-химические свойства белков
- •Лабораторная работа № 3
- •Сложные белки
- •Выделение казеина
- •Определение фосфорной кислоты в казеине
- •Гемопротеиды
- •Гемоглобин
- •Качественная реакция на гемовую группу. Бензидиновая проба
- •Методы количественного определения белка
- •Биуретовый метод Таблица 1
- •Метод Лоури Таблица 2
- •Метод Брэдфорд Таблица 3
- •Приложение Строение и номенклатура протеиногенных аминокислот
- •Классификация аминокислот по строению радикала.
- •Практикум по общей и экологической биохимии
- •Часть I
- •220009 Минск
Метод Брэдфорд Таблица 3
№ |
Концентрация белка, 100мкг/0,1мл |
Приготовление пробы (объемом 100 мкл) |
Оптическая плотность при =595 нм |
|
Исходный раствор белка №3, мкл |
Вода, мкл |
|||
1. |
0 |
0 |
100 |
|
2. |
10 |
10 |
90 |
|
3. |
20 |
20 |
80 |
|
4. |
40 |
40 |
60 |
|
5. |
80 |
80 |
20 |
|
6. |
100 |
100 |
0 |
|
Оформление работы
К занятию:
Изучить и кратко законспектировать теоретический материал по лабораторной работе.
Во время занятия:
Описать основные этапы работы.
Описать полученные результаты по заданиям I и II и сделать выводы.
Результаты измерений оптической плотности занести в таблицы (см. ниже).
Построить калибровочные графики.
Рассчитать концентрации белка в исследуемых образцах.
Описать полученные результаты и сделать выводы.
Приложение Строение и номенклатура протеиногенных аминокислот
В настоящее время существует множество различных принципов классификации протеиногенных аминокислот. Так, например, структурная классификация разработана на основе химического строения радикала. Различают ароматические и алифатические аминокислоты, а также аминокислоты, содержащие серу или гидроксильные группы. Классификация по кислотно-основным свойствам основана на природе заряда аминокислоты при физиологических значениях рН. Аминокислоты, не содержащие в радикале дополнительных ионизированных групп, относятся к нейтральным (незаряженным). Основные аминокислоты содержат в радикале дополнительную аминогруппу (отрицательно заряжены). В радикале кислых аминокислот находится карбоксильная группа (положительно заряжены).
Физиологическая классификация подразделяет аминокислоты по способности к синтезу в животном организме на: заменимые (синтезируются в организме), незаменимые (не синтезируются в организме) и полузаменимые (синтезируются в недостаточном количестве).
По катаболизму аминокислоты классифицируют на: глюкогенные (превращаются в пируват и промежуточные продукты Цикла трикарбоновых кислот и могут использоваться для синтеза глюкозы), кетогенные (превращаются в ацетоацетат, ацетил-CоА и могут использоваться в синтезе кетоновых тел) и смешанные (используются для синтеза глюкозы и для синтеза кетоновых тел).
Современная рациональная классификация аминокислот основана на полярности радикалов (R-групп), то есть способности их к взаимодействию с водой при физиологических значениях рН. В таблице показаны структуры этих аминокислот, а также их трехбуквенные и однобуквенные обозначения, принятые в отечественной и иностранной литературе. Приведены также значения рК для -карбоксильной группы ( рК1 ) , -аминогруппы (рК2 ) и изоэлектрической точки (рI).