Методы микробиологической диагностики

Метод

Что позволяет определить?

Заболевания, которые могут быть диагностированы с помощью метода

1. Микроскопический

только морфологию возбудителя, в случае его высокой концентрации в исследуемом материале (более 10⁵ микробов/мл) и размеров не менее 200 нм

острая гонорея, большинство протозойных инвазий и микрозов

2. Культуральный (бактериологический)

культуральные, биохимические и биологические свойства микроорганизмов, проблема низкой концентрации решается с помощью использования селективных сред и сред обогащения

практически все протозойные инвазии и бактериальные инфекции, вызванные агентами, способными расти на искусственных питательных средах

3. Культуральный (биологический)

позволяет накопить культуру возбудителя в чистом виде, воспроизвести картину инфекционного процесса, но есть антропонозы, к возбудителям которых животные резистентны

многие бактериальные, грибковые, вирусные, протозойные инфекции - зоонозы или зооантропонозы

4. Культуральный (вирусологический)

выделение в чистой культуре возбудителей - строгих внутриклеточных паразитов, при использовании культур клеток, куриных эмбрионов

в настоящее время - практически все вирусные, хламидийные, спирохетозные инфекции. за исключением вирусного гепатита В

5. Серологический

позволяет обнаружить и идентифицировать антигены микроорганизмов и антитела к ним, появляющиеся в процессе инфекционного заболевания. Эффективность метода зависит не столько от свойств возбудителя, сколько от иммунологической реактивности пациента (есть серонегативные случаи). Часто отличается ретроспективностью

Практически все

6.Молекулярно-биологический (ПЦР, ДНК-, РНК-зонды)

позволяет провести идентификацию генома возбудителя после репликация его в искусственных условиях.

практически все

Методы

время исследования

проблемы, ограничения использования

пути решения проблем

Микроскопический

10 мин - 2 ч

Разрешающая способность и морфологическое единообразие в мире микробов, способствующая низкой специфичности

повышения специфичности удалось добиться, соединив микроскопический метод с серологическим в реакции иммунофлуоресценции, которая используется сейчас для идентификации микроорганизмов

Культуральный

1- 7 сут

Не все микробы культивируются в искусственных условиях. Проблемы адаптации питательных сред. Это несамостоятельный метод, идентификация выделенной культуры связана с использованием иных методов

создание новых селективных питательных сред, приборов для поддержания оптимальной газовой среды, введение идентификационных тестов на ранних этапах исследования

Серологический

0,5 - 48 ч

Наличие перекрестно-реагирующих антигенов у разных видов микробов. Проблемы разрешающей способности.

Проблема ретроспективности диагноза

Разработка комбинированных методов - иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный анализ, иммуноблоттинг, иммуноэлектрофорез и др.

Молекулярно-биологический

2 - 6 ч

Результаты зависят от дополнительных условий: уровня нуклеаз, разрушающих геном возбудителя; присутствия дополнительных видов микробов (нормальная микрофлора)

разработка специфических методов предварительной подготовки материала для исследования - инактивации представителей нормальной микрофлоры