Обладнання, прилади, матеріали

Стерильний лабораторний посуд: флакони з ватяно–марлевими пробками, піпетки; пробірки з культурою Aspergillus niger; реактиви для приготування середовища Чапека: NaNO₃, KH₂PO₄, KCl, MgSO₄, FeSO₄, сахароза, дистильована вода; рН–метр; електрична плитка; автоклав |корками|; термостат.

Порядок і рекомендації щодо виконання роботи

1. Приготувати середовище Чапека наступного складу: NaNO₃ – 2 грама; KH₂PO₄ – 1 грам; KCl – 500 міліграм; MgSO₄ – 500 міліграм; FeSO₄ – сліди; сахароза – 30 грам; дистильована вода – 1000 ml. Встановити рН 4.5–5.0

2. Визначити кислотність поживного|живлячого| середовища|середи| рН–метром|.

3. Приготовлене середовище| Чапека розлити| по 50 мл| у|біля| флакони| об’ємом| 200 мл. Простерилізувати в автоклаві| при температурі| 121 °C протягом| 15 хв |.

4. Засіяти середовище культурою Aspergillus niger . Для цього в пробірку з культурою Asp. niger на середовищі Сабуро залити стерильну воду до верхнього краю зкошеного середовища. Проводячи бактеріологічною петлею по поверхні зкошеного середовища, перенести у воду частину темного конідіального шару. Отриману водну суспензію конідій перемішати, відібрати стерильною піпеткою 0,5 мл і вилити у флакон із стерильним середовищем.

5. Витримати флакони при температурі 25–28 °C протягом 7–14 днів.

Аналіз одержаних результатів

1. Вивчити біохімічну активність культури. Для цього відокремити|відділити| міцелій від культуральної рідини фільтруванням і визначити масу міцеліальної| плівки зважуванням на технічних вагах. Визначити об’єм|обсяг| культуральної рідини мірним циліндром, визначити рН| культуральної рідини рН–метром|. Визначити вміст лимонної кислоти в культуральній рідині шляхом титрування лугом: помістити піпеткою 2 мл| фільтрату в конічну колбу; додати|добавляти| мірним циліндром 200 мл дистильованої| води, 3–4 краплі|краплини| фенолфталеїну і титрувати з|із| бюретки 0,1 н NaОН| до слабкорожевого| забарвлення|фарбування|.

2. Розрахувати вміст лимонної кислоти в 1 мл| культуральної рідини по формулі (1), вихід лимонної кислоти у відсотках|процентах| від початкового|вихідного| цукру по формулі (2) і продукуючу здатність|здібність| культури по формулі (3).

3. Результати вимірювань|вимірів| і розрахунків звести в таблицю 14.

Таблиця 14

Експериментальні і розрахункові показники

Біохімічні показники	Значення
Кількість цукру в поживному середовищі, г/л
рН поживного середовища
рН культуральної рідини
Об’єм культуральної рідини, мл
Об’єм 0,1 н NaОН на титрування, мл
Маса міцеліальної плівки, г
Вміст лимонної кислоти в 1 мл культуральної рідини, г/мл
Вихід лимонної кислоти від початкового цукру %
Продукуюча здатність, г/г

Відповідно до завданя повинні зробіть висновки та оформіть протокол лабораторної роботи.