Продукування антибіотиків (пеніциліну) мікроорганізмами

Мета роботи – вивчити технологію отримання антибіотиків мікробіологічним методом.

Основні завдання роботи

Лабораторна робота виконується на двох заняттях: на першому необхідно підготувати|приготування| лабораторний посуд;|середовища| поживне середовище, засіяти флакони з стерильним поживним середовищем Чапека культурами мікроорганізмів, що продукують пеніцилін: P. chrysogenum/P. notatum. На наступному занятті – проаналізувати ріст мікроорганізмів у флаконах. . |

Основні теоретичні відомості

Антибіотики – найбільший клас фармацевтичних сполук, синтез яких здійснюється мікробними клітинами. Антибіотики (aнти–проти, bios–життя) – специфічні продукти життєдіяльності мікроорганізмів, що мають протимікробну дію. Деякі антибіотики згубно діють на гельмінтів та найпростіших. 

Синтез мікроорганізмами антибіотиків – одна з форм прояву мікробного антагонізму, який пов’язаний з певним характером обміну речовин мікроорганізму, що виникли і закріплені в ході його еволюції, тобто це спадкова особливість, що виражається в утворенні однієї, специфічної для кожного виду антибіотичної речовини. 

Діючи на сторонню мікробну клітину, антибіотик викликає значні порушення в її розвитку. Деякі з антибіотиків здатні пригнічувати синтез оболонки бактеріальної клітини в період розмноження, інші впливають на її цитоплазматичну мембрану, змінюючи проникність, частина з них є інгібітором обміну речовин.

Продуцентами антибіотиків є міцеліальні гриби, актиноміцети та ін. мікроорганізмами. 

Антибіотики використовують і як засіб боротьби з різними фітопатогенами. Зараження рослин фітопатогенними мікроорганізмами відбувається різними шдяхами. Вплив антибіотичної речовини призводить до затримання росту або загибелі фітопатогенних мікроорганізмів, що знаходяться в насінні і вегетативних органах рослини. Препарати антибіотиків, що використовуються, повинні бути високоактивними проти збудника захворювання, нешкідливими для рослини, легко проникати у відповідні тканини рослини і зберігати тривалий час антибіотичну активність. 

Обладнання, прилади, матеріали

1. Культури мікроорганізмів, що продукують пеніцилін: P. chrysogenum/P. notatum.

2. 50 ml| середовища Чапека| у флаконах об’ємом 200 |ml|.

3. Мікробіологічні петлі.

4. Спиртівки|топка|.

5. Автоклав.

Порядок і рекомендації щодо виконання роботи

1. Приготувати середовище Чапека за наступним прописом: NaNO₃ – 2 г; KH₂PO₄ – 1 г; KCl – 500 мг; MgSO₄ – 500 мг; FeSO₄ – сліди; сахароза – 30 г; дистильована вода – 1000 ml.

2. Розлити середовище по 50 мл у флакони об’ємом 200 мл.

3. Простерилізувати в автоклаві при температурі 121 °C протягом 15 хв.

4. Засіяти середовище культурою P. chrysogenum або P. notatum.

5. Витримати флакони при температурі 25–28 °C протягом 7 – 14 днів.

Аналіз одержаних результатів

На наступному занятті проаналізуйте ріст мікроорганізмів у флаконах. Зміна кольору культуральної рідини на золотисто–жовтий або крапельки|капельках| на міцелію буде вказувати на продукування мікроорганізмом активного пеніциліну|грунтом|. Зробіть висновки та оформіть протокол лабораторної роботи.