3. Реакция гемагглютинации (прямая, непрямая), реакция торможения гемагглютинации, их диагностическое значение при инфекциях.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использова¬нии эритроцитов (или латекса) с адсорбиро¬ванными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот¬ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива¬ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

Компоненты. Для постанов¬ки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавли¬вают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Ад¬сорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома.

Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микро¬организмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обла-дающие высокой адсорбирующей активностью.

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор¬мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительнос¬ти к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфич¬ностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для иденти-фикации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токси¬нов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные анти¬тельные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфи¬ческих антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии на¬груженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности.

Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отри¬цательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — харак¬терный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неров¬ными краями.

4. В детскую инфекционную больницу поступил ребенок с диагнозом “дифтерия”, “скарлатина”. Как уточнить этиологию заболевания? Возможно ли сочетание этих болезней? экзаменационный билет № 47

1. Герпесвирусы. Вирусы простого герпеса.

Вирус Эпстайна-Барр выделен английским вирусологом М. Эпстайном и канадским вирусологом И.Барр из биоптатов пациентов с лимфомами Бёркитта (1964). Инфицирование регистрируют повсеместно; специфические AT выявляют у 90% лиц старше 40 лет.

Резервуар инфекции вируса Эпстайн-Барра — человек. Основной путь передачи вируса Эпстайн-Барра — воздушно-капельный, реже трансмиссивный или половой. В раннем возрасте инфекцию сопровождают стёртые проявления, либо она бывает вообще бессимптомной.

Первичное инфицирование вирусом Эпстайна-Барра в подростковом или более старшем возрасте может вызвать заболевание, известное как инфекционный мононуклеоз. Реже наблюдают реактивированную инфекцию, обусловленную хронической персистенцией вируса Эпстайна-Барр.

Клинические проявления вируса Эпстайн-Барра вариабельные, чаще наблюдают синдром хронического мононуклеоза. Хроническая активная инфекция вирусом Эпстайна-Барр, проявляющаяся прогрессирующими лимфопролиферативными заболеваниями или лимфомами ЦНС, обычна для пациентов с иммунодефицитными состояниями.

Развитие злокачественных превращений инфицированных клеток даёт основание предполагать участие вируса Эпстайна-Барр (как коканцерогена) в развитии болезней злокачественного роста, таких как африканские формы лимфомы Бёркитта, карцинома носоглотки у мужчин некоторых этнических групп Южного Китая, а также саркома Капоши у пациентов со СПИДом.

Патогенез поражений вирусом Эпстайна-Барра

При инфекционном мононуклеозе вирус Эпстайн-Барра размножается в верхних отделах дыхательных путей и ассоциированной лимфоидной ткани с развитием местных воспалительных реакций. Возбудитель может гематогенно диссеминировать в периферические лимфатические узлы, селезёнку, печень и другие органы, формируя лимфоидные инфильтраты. Заражение макрофагов и лимфо-идных клеток приводит к появлению крупных мононуклеарных клеток. Латентная инфекция В-лимфоцитов вызывает их поликлональную активацию с образованием низкоспецифичных гетерофильных AT, агглютинирующих эритроциты различных животных. Подобные поражения типичны для большинства лиц. Реже наблюдают развитие злокачественных трансформаций, связанных с нарушениями дифференцирования В-клеток.

Лимфомы Бёркитта характеризуются экспрессией 1-го ядерного Аг (1-ЯАг) вируса Эпстайна-Барр в заражённых клетках, обусловливающего латентное течение процесса посредством длительного персистирования вируса в виде эписом. Хромосомные аномалии обусловлены нарушениями в хромосоме 8 с формированием точечных с-тус мутаций.

Небёркиттовские лимфомы вируса Эпстайн-Барра. При подобных трансформациях в В-лимфоцитах преимущественно экспрессируются 2- и 5-Аг, а также 1 и 2 латентные белки оболочки. 2- и 5-ЯАг активируют G1 циклин, делая клетки практически бессмертными. Трансформацию клеток обусловливают латентные белки оболочки, вызывающие избыточную рецепцию ростовых факторов.

Продолжительность инкубационного периода инфекционного мононуклеоза составляет 30-50 сут у взрослых и 10-40 сут у детей. Заболевание проявляется лихорадкой, общей разбитостью, ангинозными поражениями и лимфангиитами с гепато- и спленомегалией. Очень редко наблюдают поражения в форме гепатита или менингита.

Диагностика вируса Эпстайн-Барра

До настоящего времени методы выделения вируса Эпстайн-Барра не разработаны, и основу диагностики составляет выявление специфических AT. Наиболее адекватна РНИФ (реакция Хёнле), выявляющая AT (IgM, IgG и IgA) к капсидным, некапсидным «ранним» и ядерным Аг. Некоторую информацию можно получить, определяя наличие гетерофильных AT (капельный тест на инфекционный мононуклеоз); недостаток этого метода — невозможность отличить имеющуюся инфекцию от предшествующего заражения. Характерный признак — наличие крупных атипичных мононукле-аров в периферической крови, содержание которых может достигать 10-15% и более. Для выявления вирусной ДНК в трансформированных клетках применяют метод ДНК-гибридизации.

Лечение инфекций вируса Эпстайн-Барра

Специфические средства терапии отсутствуют; лечение симптоматическое.4