8.1.3 Качественное определение

Тонкослойная хроматография

Испытуемый раствор. К 0,3 г свежеизмельченного сырья (1400) прибавляют 5,0 мл метиленхлорида Р и встряхивают в течение 15 мин. Фильтруют и осторожно выпаривают фильтрат досуха на водяной бане при температуре 60°С. Остаток после выпаривания растворяют в 0,5 мл толуола Р. Раствор сравнения. 50 мкл анетола Р и 10 мкл фенхона Р растворяют в 5,0 мл гексана Р.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254 Р.

Подвижная фаза: гексан Р — толуол Р (20:80, об/об).

Наносимый объем пробы: по 10 мкл в виде полос длиной 20 мм и шириной 3 мм.

Фронт подвижной фазы: не менее 10 см от линии старта.

Высушивание: на воздухе.

Проявление А: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.

Результаты А: на хроматограммах в центральной части обнаруживается зона поглощения, соответствующая анетолу.

Проявление В: пластинку опрыскивают кислотой серной Р и нагревают при температуре 140°С в течение 5-10 мин. Просматривают при дневном свете.

Результаты В: на хроматограмме раствора сравнения в нижней трети обнаруживается зона желтого цвета (фенхон) и в центральной части - зона фиолетового цвета (анетол). На хроматограмме испытуемого раствора обнаруживаются зоны, соответствующие по расположению и цвету зонам фенхона и анетола на хроматограмме раствора сравнения; в верхней трети - зона красновато-коричневого цвета (терпены).

Определение эфирного масла (метод А).

5,0 г свежеизмельченного сырья (1400) помещают в круглодонную колбу вместимостью 500 мл, прибавляют 200 мл воды Р в качестве жидкости для перегонки. В градуированную трубку помещают 0,50 мл ксилола Р и перегоняют со скоростью 2—3 мл/мин в течение 2 ч.

Определение содержания анетола и фенхона. Газовая хроматография.

Испытуемый раствор. Смесь эфирного масла и ксилола Р, полученную при определении эфирного масла, разводят ксилолом Р до объема 5,0 мл, ополаскивая прибор для определения эфирного масла этим же растворителем. Раствор сравнения (а). 5 мг фенхона Р и 5 мг анетола Р растворяют в 0,5 мл ксилола Р.

Раствор сравнения (b). 5 мг эстрагола Р растворяют в 0,5 мл ксилола Р.

Условия хроматографирования:

колонка капиллярной длиной от 30 м до 60 м и внутренним диаметром 0,3 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 Р;

детектор: пламенно-ионизационный;

газ-носитель: азот для хроматографии Р;

скорость газа-носителя: 0,40 мл/мин;

деление потока: 1:200;

объем вводимой пробы: 1 мкл;

Таблица 2 - Условия хроматографии (температура)

	Время (мин)	Температура ( С ̊ )
Колонка	0 – 4 4 – 26 26 - 41	60 60→ 170 170
Блок ввода проб		220
Детектор		270

Порядок выхода пиков: фенхон, анетол.

Содержание анетола и фенхона рассчитывают методом нормализации. [10]

8.2Доброкачественность сырья

Доброкачественность ЛРС – соответствие лекарственного растительного сырья требованиям нормативной документации. Доброкачественность ЛРС определяется количеством действующих веществ, чистотой сырья, естественной степенью измельчения (для цельного сырья), влажность, содержание золы.

FoenicuIi amari fructus

Допустимые примеси. Не сырьевые части растения: плодоножки — не более 1,5 %.

Сумма других допустимых примесей: не более 1,5 %.

Вода. Не более 80 мл/кг. Определение проводят из 20,0 г измельченного сырья.

Общая зола. Не более 10,0 %.

FoenicuIi dulcis fructus

Допустимые примеси. Несырьевые части растения: плодоножки — не более 1,5 %.

Сумма других допустимых примесей: не более 1,5 %.

Вода. Не более 80 мл/кг. Определение проводят из 20,0 г измельченного сырья.

Общая зола. Не более 10,0 %.[10]