Альбом за весенний семестр / Страница 11-13

Выделение и идентификация чистых культур бактерий.

I этап

Посев исследуемого материала на чашки Петри с плотной питательной средой (МПА) «штриховым» методом для выделения чистой культуры.

• Инкубация при 37˚С в течение 24 часов

Примечание: в том случае, если в исследуемом материале содержится незначительное количество возбудителя, то его предварительно накаливают путём посева материала в жидкую питательную среду, а затем после инкубации при 37˚С производят пересев на плотную среду.

II этап

Идентификация выделенной чистой культуры по культуральным, морфологическим и тинкториальным свойствам:

а) макро- и микроскопическое исследование колоний, выросших на МПА.

б) пересев оставшейся части колонии на скошенный агар (для накопления чистой культуры)

• Инкубация при 37˚С в течение 24 часов

Схема описания колоний

Колония	Размер	Форма	Цвет	Поверхность	Края	Консистенция	Структура	Окраска по Граму	Предполагаемый возбудитель
1.

Примечание: микроскопия материала из колоний производится также с целью проверки чистоты культуры.

III этап

1. Идентификация выделенной чистой культуры:

а) по культурологическим свойствам (характеристика однородности роста)

б) приготовление мазка, окраска, микроскопия (для проверки чистоты выделенной культуры)

в) по биохимической активности – посев выделенной чистой культуры на среды Гиса и МБП (для выявления H₂S и индола)

• Инкубация при 37˚С в течение 24 часов

Примечание: помимо перечисленных свойств, для определения вида возбудителя исследуют:

г) антигенные свойства

д) токсические свойства

2. При необходимости проводится внутривидовая идентификация (эпидемиологическое маркирование) – определение фаговаров, сероваров и т.д.

Предполагаемый возбудитель	Сахаролитические					Протеолитические
	Лактоза	Глюкоза	Мальтоза	Манноза	Сахароза	H2S	Индол
Заключение

Диск	Антибиотик	Диаметр зоны задержки роста (мм)	Чувствительность/Устойчивость

IV этап: Учёт результатов.

Заключение:

Зависимость величины зон от степени чувствительности микроорганизмов

Степень чувствительности	Диаметр зоны задержки роста в мм
Высокочувствительный	Более 25
Чувствительный	15 – 25
Малочувствительный	11- 15
Устойчивый	Менее 10 или полное отсутствие зоны