Бактериологическое исследование.

На первом этапе из исследуемого материала готовят мазки, микроскопируют их, затем сеют материал на плотную среду в чашки Петри шпателем или бактериологической петлей. При этом достигается механическое разъединение микроорганизмов на поверхности питательной среду, что позволет получить их рост в виде изолированных колоний. В отдельных случаях исследуемый материал сначала сеют в жидкую среду накопления, а затем пересевают его в чашки Петри с плотной питательной средой. Чашки с посевами обычно помещают в термостат на 18-24 часа при 37 градусах по Цельсию.

На втором этапе изучают культуральные свойства бакте­рий (характер их роста на питательных средах).

Макроскопическое изучение колоний в проходящем и отраженном свете Чашку поворачивают дном к себе и рассматривают колонии в проходящем свете. При наличии различных видов колоний их нумеруют и описывают каждую в отдельности.

Обращают внима­ние на следующие свойства:

а) величину колоний (крупные — более 4 мм в диаметре, средние — 2 — 4 мм, мелкие — 1 — 2 мм, карликовые — менее 1 мм);

б) форму очертаний колоний (пра­вильно и неправильно округлая, розеткообразная, ризоидная и др.);

в) степень прозрачности (непрозрачная, полупрозрачная, прозрачная).

.В отраженном свете рассматривают колонии со стороны крыш­ки, не открывая ее, и фиксируют в протоколе следующие данные:

а) цвет колоний (бесцветные, пигментированные, цвет пигмен­та);

б) поверхность (гладкая, блестящая, влажная, морщинистая, матовая, сухая и др.);

в) рельеф (выпуклые, погруженные в среду, плоские, с куполообразным центром, с валиком по краю и др.).

Микроскопическое изучение колоний. Чашку устанавливают вверх дном на предметном столике микроскопа, опускают конденсор и с помощью объектива 8х изучают колонии, фиксируя в протоко­ле их структуру (гомогенная или аморфная, зернистая, волокни­стая и др.) и характер краев (ровные, волнистые, зазубренные, бахромчатые и др.).

Из части колоний готовят мазки (при взятии материала из ко­лонии отмечают ее консистенцию — сухая, слизистая, пастообраз­ная), окрашивают по Граму и микроскопируют, выясняя тинкториальные свойства микроорганизмов. При наличии однородных бактерий остаток колоний пересевают на скошенный агар для по­лучения чистой культуры в достаточном количестве. Пробирки с посевами помещают в термостат на 18 — 24 ч при температуре 37 °С.

На третьем этапе из выросшей на скошенном агаре куль­туры делают мазки, окрашивают их по Граму. О чистоте культуры судят по однородности роста, формы, размера и окраски микро­организмов. Для идентификации выделенной чистой культуры, кроме изучения морфологических, тинкториальных и культуральных особенностей микроорганизмов, необходимо определить их ферментативные и антигенные свойства, фаго- и бактериоцино-чувствительность, токсигенность и другие признаки, характери­зующие их видовую специфичность.

На четвертом этапе проводят учет результатов иследований, анализируют их и выписывают ответо по результатам посевов.