
- •Часть II
- •Глава 4 общие сведения о ферментных препаратах
- •4.1. Источники получения ферментов
- •4.2. Классификация и номенклатура ферментов и ферментных препаратов
- •4.2.1. Оксидоредуктазы
- •4.2.2. Трансферазы
- •4.2.3. Гидролазы
- •4.2.4. Лиазы
- •4.2.5. Изомеразы
- •4.2.6. Лигазы
- •4.3. Характеристика активности ферментных препаратов
- •4.4. Свойства ферментов
- •4.5. Стабилизация ферментов путем иммобилизации
- •4.6. Принцип действия ферментов и кинетика ферментативных реакций
- •Глава 5
- •5.1. Основы технологии хлеба
- •5.2. Пшеничные закваски на основе микроорганизмов для хлебобулочных изделий
- •5.3. Биохимические превращения под действием
- •5.4. Цели применения ферментных препаратов и их характеристика
- •5.5. Ферментативное получение добавок пищевых
- •Глава 6
- •6.1. Основы производства мучных кондитерских изделий
- •6.2. Цели использования ферментных препаратов в кондитерской отрасли и их характеристика
- •Глава 7
- •7.1. Основы технологии плодово-ягодных соков, соков-напитков и вин
- •7.2. Цели применения ферментных препаратов
- •7.3. Влияние ферментативной обработки на сокоотдачу плодов и ягод
- •7.4.. Осветление плодово-ягодных соков и виноматериалов с применением ферментных препаратов
- •7.5. Предотвращение нежелательных побочных
- •7.6. Применение глюкозооксидазы, каталазы
- •7.7. Влияние ферментных препаратов на качество виноградного вина
- •Глава 8
- •8.1. Основы технологии производства пива
- •8.2. Цели применения ферментных препаратов и требования к ним
- •8.3. Биохимические превращения под действием
- •8.4. Применение ферментных препаратов для повышения стойкости пива
- •8.5. Использование ферментных препаратов при производстве кваса
- •Глава 9
- •9.1. Основы технологии спирта
- •9.2. Цели применения ферментных препаратов
- •9.3. Биохимические превращения под действием ферментов на различных стадиях производства
- •9.4. Требования, предъявляемые к ферментным препаратам, и их характеристика
- •9.5. Интенсификация процессов получения спирта с использованием ферментных препаратов
- •9.6. Использование ферментных препаратов в технологии алкогольных напитков
- •Глава 10
- •10.1. Технология глюкозы, получаемой ферментативным способом
- •10.2. Применение ферментных препаратов
- •10.3. Получение глюкозно-фруктозных и других сиропов, заменителей сахарозы
- •Глава 11
- •11.1. Ферментные системы
- •11.2. Методологические основы ферментативного
- •11.3. Применение методов ферментативного анализа
7.7. Влияние ферментных препаратов на качество виноградного вина
Препараты, используемые при выработке виноградных соков и столовых вин, при внесении их в минимальных дозах (0,0005 — 0,001 %) должны быстро осветлять и повышать скорость фильтрации в 3—4 раза.
В процессе обработки мезги ферментными препаратами происходят значительные изменения в химическом составе виноградного сусла. Прежде всего происходит существенное изменение в содержании фенольных веществ в винах, даже при кратковременном контакте сусла с мезгой. Поэтому в технологической схеме приготовления белых столовых вин использование ферментных препаратов должно быть предусмотрено на стадии осветления сусла, в этом случае заметного обогащения фенольными веществами не происходит.
При приготовлении вин, требующих длительного контакта с мезгой, использование ферментных препаратов особенно эффективно, так как оно способствует процессу мацерации, что дает возможность сократить время настаивания на мезге и отделить этот процесс от спиртового брожения. Комбинированная обработка ферментными препаратами в сочетании с нагревом эффективна не только для красных, но и для белых сортов винограда. Рекомендуется нагревать мезгу при 35...45 ºС в течение 2—З ч, при этом оказывается возможным в дальнейшем вести брожение по белому способу.
Вкус вин, полученных из отпрессовых фракций сусла, при обработке ферментным препаратом смягчается, устраняются излишняя горчинка и грубость.
Приготовление красных вин, технология которых предусматривает контакт сусла с мезгой, нагрев мезги или брожение на мезге, сопровождается значительным обогащением сусла и соответственно виноматериалов фенольными веществами. Увеличение суммы фенольных веществ при этом может достигать 60 %, а красящих — 70 %.
Обработка мезги ферментными препаратами способствует увеличению содержания лейкоантоцианов и катехинов в сусле, повышению биологической ценности соков и вин. Существенное влияние на сохранение биофлавоноидов в виноградном соке оказывает способ осветления полуфабриката. В период брожения происходит значительное уменьшение общего количества фенольных веществ и антоцианов.
Вина, приготовленные из сусла и мезги, обработанных ферментами, быстрее созревают и требуют более раннего розлива.
При хранении вин, обработанных ферментными препаратами, уменьшаются сумма фенольных веществ и интенсивность окраски. Аналогичные изменения происходят в контрольных образцах (без добавления ферментных препаратов), особенно сильно они проявляются в первый год. В течение последующих двух-трех лет указанные процессы идут значительно медленнее. В первые 6 мес теряется около 50 % красящих веществ вина. Второй год выдержки характеризуется более медленным снижением содержания фенольных веществ в образцах вин, обработанных ферментами.
Таков же характер изменения красящих веществ. Первоначальная пурпурная окраска постепенно приобретает оттенки рубиново-красный, красно-коричневый, коричнево-красный с луковичными тонами. Обработка мезги ферментными препаратами ускоряет этот процесс, однако одновременно в молодых винах происходит некоторое увеличение содержания красящих веществ вследствие превращения лейкоантоцианов в антоцианы, причем установлено, что чем дольше сусло соприкасалось с мезгой в процессе переработки винограда, тем интенсивнее становится окраска при хранении. Действие пектолитических ферментные препаратов усугубляет этот процесс в связи с более энергичной экстракцией фенольных веществ. Особенно этому способствует аэрация вин при повышенной температуре. Использование одних ферментных препаратов способствует превращению фенольных веществ, другие не обладают таким действием, т. е. возможен выбор препарата, действие которого было бы оптимальным для данного типа вина.
Для гидролиза пектиновых веществ могут быть рекомендованы такие препараты, как Пектаваморин, Пектофоетидин, Полигалактуроназа, Ультразим, Винфлоу, Винозим, Пектинекс.
Для интенсификации сокоотделения применяют также препараты, в которых наряду с пектолитическими присутствуют ферменты, гидролизующие нейтральные полисахариды — целлюлозу и гемицеллюлозу. Это препараты Вильзим АК, Ксилонигрин, Поликанесцин, Целловиридин, Целлофоетидин. Гидролиз нейтральных полисахаридов сопровождается высвобождением связанных с ними лигниноподобных и других фенольных веществ. При доступе кислорода фермент 0-дифенолоксидаза, присутствующий в сырье, катализирует окисление фенольных веществ. Образующиеся хиноны полимеризуются, что является причиной побурения окраски сусла. Хиноны комплексуются с белками, вызывая коллоидное помутнение. Дополнительный вклад в этот процесс вносит мацерация тканей под действием комплекса цитолитических ферментов. Для удаления темноокрашенных продуктов и коллоидных частиц применяют сорбенты — бентонит, полиоксиэтилен, поливинилпирролидон.
Ферментативную обработку применяют при получении различных видов виноматериалов. Разработана схема производства красных столовых виноматериалов, которая включает сульфитацию мезги, внесение 0,01 % Пектофоетидина П10Х, брожение мезги до остаточной сахаристости 1—3%, отделение, дображивание и купажирование виноматериалов. Ферментативная обработка мезги увеличивает выход красящих веществ на 10—30 %, повышает коллоидную стабильность виноматериалов.
При получении белых десертных полусладких вин сульфитированную мезгу подогревают до 50 °С, вносят Ксилонигрин П10Х (0,01 %) или Полигалактуроназу Г10Х (0,00005 %), настаивают мезгу при произвольном остывании в течение 12—48 ч, после чего отделяют сусло, производят дображивание, спиртование, сульфитацию, обработку бентонитом и холодом.
При получении сусла из мезги смеси белых сортов винограда возможна ее обработка 0,02 % Поликанесцина Г20Х или 0,02 % Вильзима АК Г20Х. При этом общий выход сусла повышается на 4 %. Для обработки мезги сорта Алиготе рекомендован Целловиридин Г20Х (0,02 %), позволяющий увеличить выход сусла на 3,5 %.
Обработка мезги Поликанесцином Г20Х положительно влияет на аромат виноматериалов, что связано с увеличением концентрации терпеновых спиртов и β-фенилэтанола за счет действия гликозидаз препарата на предшественников терпеновых спиртов.
В настоящее время большинство пектолитических ферментных препаратов, выпускаемых как в России, так и за рубежом, имеют грибное и реже бактериальное происхождение. При необходимости целенаправленного использования полигалактуроназы эти препараты вызывают ряд трудностей из-за того, что они содержат помимо полигалактуроназы пектинэстеразу, протеиназы, целлюлазы, гемицеллюлазы и ряд других сопутствующих ферментов. Все отрасли, применяющие пектолитические ферментные препараты, особенно при производстве соков и вин, постоянно предъявляют повышенные требования к чистоте и составу используемых ферментных препаратов.
Дрожжевые культуры синтезируют значительно меньше гидролитических ферментов. Дрожжевая полигалактуроназа ГХ (продуцент Zygofabospora marxiana BKM Y-848), применяется для осветления виноградного сусла. При этом скорость фильтрации в 3,5—6 раз выше, чем в контроле, и не возрастает содержание метанола. В одинаковых условиях обработки сусла Пектофоетидин П10Х несколько превосходит по эффективности дрожжевую полигалактуроназу, но уступает мультиэнзимной композиции дрожжевой полигалактуроназы и Поликанесцина Г20Х (табл. 7.3).
В технологии белых столовых вин и шампанских виноматериалов могут быть использованы лишь те препараты, которые не будут способствовать интенсификации в них окислительных процессов и потемнению окраски. Установлено, что ферментативное обесцвечивание вина происходит вследствие восстановления хинонов в семихиноны с последующим получением стабильных бесцветных димеров или в связи с полным восстановлением хинонов в фенолы в результате действия системы NAD + H2 ↔ NADH2. Таким образом, в виноделии должны использоваться ферментные препараты с определенным набором гидролаз и оксидоредуктаз.
В технологии столовых белых вин ферментные препараты вносят не в мезгу, а в сусло, поступающее на отстаивание. Сусло при этом должно быть засульфитировано из расчета введения 100 мг SO2 дм3. Опыт использования ферментных препаратов в производственных условиях свидетельствует о том, что полезно проводить обработку вина бентонитом и затем ферментным препаратом. Введение флокулянтов будет способствовать более быстрому осаждению взвесей и уплотнению осадков. Если технология переработки винограда предусматривает процесс отстаивания сусла в течение 18 —20 ч, то дозы препарата могут быть минимальными — 0,001—0,005 % в пересчете на стандартную активность 3000 ед/г.
Ферментные препараты гидролитического действия используют для стабилизации вин от коллоидных помутнений.
Виноградный сок содержит коллоидные компоненты клеточного сока, твердых частей ягоды и грозди. Основным источником биополимеров сусла и вина являются структурные элементы ягоды (кожица, клеточные стенки мякоти), о чем свидетельствует сходство фракционного состава биополимеров кожицы и виноматериалов. В составе биополимеров преобладают полисахариды (разновидности гемицеллюлоз) и фенольные вещества.
Комплексы биополимеров виноградного сока имеют различную растворимость. В свежеотделенном соке зрелого винограда основную часть коллоидной фракции составляют углеводы (пектиновые вещества, нейтральные полисахариды), в нее входят также фенольные соединения, белки и зольные элементы, среди которых преобладают железо, кальций и кремний.
В процессе брожения коллоидная система вина обогащается биополимерами автолизирующихся дрожжей: глюканом и маннопротеином клеточных стенок, продуктами неполного расщепления белков. Эти компоненты наряду с биополимерами винограда участвуют в формировании коллоидных помутнений.
На основании исследований химической природы частиц коллоидных помутнений вин разработана мультиэнзимная композиция МЭК-1 для виноделия, которая используется для стабилизации вин различных типов. В состав композиции входят ферменты β-глюканаза, β-маннаназа, полигалактуроназа и кислая протеаза. Содержание углеводного компонента биополимеров вина снижается при действии β-глюканазы на 19—27 %, β-маннаназы — на 42—44, полигалактуроназы — на 17—28 %. Кислая протеаза гидролизует 27—49 % белкового компонента. Снижается до минимума концентрация крупных коллоидных частиц. Оптимальная доза МЭК-1 составляет 0,005—0,02 %. Продолжительность обработки: для белых столовых виноматериалов — 8 ч, красных столовых — 16, крепких виноматериалов — 24 ч. Схема стабилизации виноматериалов против коллоидных помутнений включает: купаж виноматериалов, введение ЖКС, МЭК-1, экспозицию в течение 8—24 ч, введение оклеивающих веществ, осветление и снятие с осадка, обработку холодом или пастеризацию, фильтрацию и розлив продукта. При обработке МЭК-1 экстрактивность повышается на 0,3—0,6 г/дм3, сохраняется окраска красных вин. Вина, обработанные МЭК-1, сохраняют стабильность в течение одного года.
Проводились комплексные исследования эффективности различных ферментных препаратов в сочетании с оклеивающими веществами при осветлении и стабилизации труднообрабатываемого виноматериала типа портвейн белый Таврида. Использование препаратов Поликанесцин Г20Х, Целловиридин Г20Х и Вильзим АК Г20Х в дозах 0,005—0,02 % позволяет снизить содержание белков в 2,1—4,4 раза, полисахаридов — в 1,4—2 раза; прозрачность вин сохраняется свыше 8 мес.
Хорошие результаты при стабилизации соков и вин дают иммобилизованные препараты кислых протеаз — пепсина, кислой грибной протеазы. При этом достигается расщепление белка на 80—95 %. Основными продуктами гидролиза являются пептиды, что положительно влияет на полноту вкуса соков и вин.
Применение гидролаз весьма эффективно при переработке винограда, пораженного серой гнилью. Для осветления сусла из винограда со степенью поражения 20—30 % используют композицию Пектофоетидина П10Х и Амилоризина П20Х в дозах соответственно 0,025 и 0,005 % или 0,01 и 0,0025 %. Осветление сусла увеличивается в 2—3 раза, скорость фильтрации — в 2,25—3 раза. Снижается содержание токсинов: пестицидов — на 62—71 %, патулина — на 78, гистамина — на 36—47 %. При гидролизе биополимеров, с которыми ассоциированы токсины, последние переходят в свободное состояние, но, имея низкую растворимость в воде, ресорбируются на взвешенной фракции. Удаление этой фракции в процессе фильтрации приводит к снижению содержания токсинов в сусле.
Большинство ферментативных способов стабилизации вин и соков от коллоидных помутнений основано на расщеплении полисахаридных и белковых, но не фенольных компонентов коллоидных частиц. Для гидролиза фенольной составляющей может быть использован фермент танназа, катализирующий расщепление сложноэфирной связи фенолкислот с фенолами или углеводами. Препараты танназы производят за рубежом, где и используют в виноделии и консервной промышленности.
Для удаления фенолов из виноматериалов используют флокулянты, сорбенты, фильтрующие материалы. При этом связываются полимерные формы фенольных соединений и их комплексы с белками и полисахаридами. Мономерные формы фенолов сохраняются в растворе и с течением времени подвергаются окислению и конденсации, что служит источником помутнений. Для удаления мономерных фенолов предложена обработка сусла ферментом монофенолмонооксигеназой, выделенной из культуры гриба вешенки. Окисление монофенолов происходит за счет растворенного кислорода, поэтому при обработке сусло постоянно перемешивают. Продолжительность обработки 0,5—1 ч, доза фермента — 50—150ед/дм3. При обработке прессового сусла окисляется 60% монофенолов. Окисление монофенолоз приводит к их конденсации и образованию комплексов с другими коллоидами сусла. Эти комплексы удаляются после обработки сорбентами и сепарации. Осветленное сусло пригодно для получения качественных соко- и виноматериалов. Ферментативная обработка прессовых фракций сусла не только повышает коллоидную стабильность, но и облагораживает вкус напитков.
Контрольные вопросы
1. Каковы цели применения ферментных препаратов в производстве плодово-ягодных соков, вин и безалкогольных напитков? 2. Какова особенность производства пастеризованных соков из плодов и ягод? 3. Каковы основные стадии технологического процесса получения виноградных и плодово-ягодных вин? 4. Какие требования предъявляют к ферментным препаратам при производстве соков? 5. Какие биохимические превращения субстрата происходят под действием ферментов? 6. Какие факторы обусловливают сокоотдачу плодов и ягод под действием ферментов? 7. По каким признакам разделяют плодово-ягодное сырье? 8. Как предотвратить нежелательные побочные процессы при обработке плодово-ягодной мезги и соков ферментами? 9. Какие ферментные препараты используют для осветления и стабилизации соков и вин? 10. Какие окислительно-восстановительные ферменты применяют в производстве соков и напитков? 11. Как изменяется химический состав виноградного сусла и вина под влиянием ферментов? 12. Какое влияние оказывают ферментные препараты на созревание и качество вин?