- •Методические рекомендации для преподавателей
- •Тема занятия. Иммунологические методы диагностики.
- •Цели занятия.
- •Этапы проведения практического занятия.
- •Ориентировочная основа действия (оод) для проведения практического занятия (курация, выполнение лабораторной работы и т.Д.).
- •Задания для контроля уровня сформированности компетенций в учебное время.
- •Методические указания по выполнению практической работы с полным регламентом протокола и его оформлением.
- •9.Учебно-материальное обеспечение:
- •Ориентировочная ра на стекле (серотипирование бактерий)
- •Постановка реакции хеддльсона при бруцеллезе
- •Кровяно-капельная реакция минкевича (ра)
- •Реакции торможения гемагглютинации и гемадсорбции
- •Реакция иммобилизации трепонем (рит)
- •Метод флюоресцирующих антител (риф)
- •Варианты риф
- •Радиоиммунный метод (рим)
- •Приготовление гемолитической системы
- •Реакция торможения связывания комплемента - ртск
- •Реакция нейтрализации бактериальных экзотоксинов
- •1. Определение токсигенности бактерий на питательной среде
- •2. Единицы измерения токсина и антитоксина
- •1. Определение активности анатоксина по известной антитоксической сыворотке (титр 200 ае в 1 мл) в реакции флоккуляции
- •2. Определение титра антитоксической сыворотки по известному анатоксину (титр 5000 ie в мл) в р. Флоккуляции
- •Постановка реакции нейтрализации токсина антитоксином ин виво
- •Радиоиммунный метод (рим)
- •Иммуноферментный метод
- •Метод иммуноблоттинга
Методические указания по выполнению практической работы с полным регламентом протокола и его оформлением.
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ С ПОЛНЫМ РЕГЛАМЕНТОМ ПРОТОКОЛА ЗАНЯТИЯ
№ |
Наименование учебного элемента (задания) |
Методическое решение |
Регламент протокола |
1. |
Классификация иммунологических реакций: а) общая б) адсорбционно- агглютинирующего типа |
Приложение Коротяев А. И., Бабич С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С-Пб, 2008. С. 228-238. Борисова Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., 2008 |
Заполнить таблицу при самоподготовке дома, исходя из вопросов
|
2. |
Освоить технику различных реакций агглютинации (РА) а) РА развёрнутая по Видалю (серодиагностика) б) РА ориентировочная - серотипирование в) РА по Райту г) РА по Ноблю д) РА по Хеддльсону е) РА по Кастеллани ж) кровяно-капельная реакция Минкевича |
Составить схему, определить последовательность постановки. Практическое выполнение. Приложение Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. Биргера М.О. М, 1983. С. 196-197,129-132, 128, 279 |
Записать в протокол при самоподготовке дома с коррекцией на занятии. Составить схему постановки на занятии, практически выполнить, определить титр по демонстрационной реакции, дать заключение
|
3. |
Адсорбционные реакции: а) реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации б) реакция торможения агглютинации в) реакция гемадсорбции (РГАдс) и её торможения (РТГАдс) в культуре ткани г) реакция иммобилизации трепонем (РИТ) д) реакция иммунофлюоресценции прямая (РИФ) и непрямая (РНИФ). |
Приложение Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Под ред. Биргера М.О. М, 1982. С. 136-140, 153-154, 305-307 |
Составить схему постановки при самоподготовке. Определить титр демонстрационной реакции. Описать сущность метода при самоподготовке дома |
4 |
Механизм реакции связывания комплемента - РСК
|
Приложение Учебная литература |
Зарисовать схему в протокол. Прочесть и оценить |
5 |
Подготовительное титрование: а) комплемента б) антигена в) гемолитической сыворотки |
Приложение |
Записать в протокол схемы
|
6 |
Приготовление гемолитической системы (индикаторной системы) |
Приложение |
Записать в протокол схемы |
7 |
Постановка реакции торможения РСК - РТСК
|
Приложение |
Записать в протокол и оценить результат готовой реакции |
8. |
Реакция нейтрализации бактериальных токсинов: а) определение токсигенности б) определение титра анатоксина и антитоксической сыворотки |
Приложение
|
Записать в протокол схемы постановки и оценить готовые результаты |
9 |
Реакция преципитации в жидкой среде и геле |
Приложение |
Записать в протокол, зарисовать |
10 |
Радиоиммунологический метод (РИМ)
|
Приложение
|
Записать в протокол |
11 |
Иммуноферментный метод анализа (ИФА) |
Приложение |
Записать в протокол схему и результат |
12 |
Метод иммуноблоттинга
|
Приложение
|
Заполнить и записать в протокол |
13 |
Итоговый тестовый контроль |
|
|
Подготовить реферативные сообщения и презентации по теме занятия с использованием литературных источников (статьи мед. журналов, интернет-источники):
Составить ситуационные задачи по теме занятия, с приведением эталона ответа. Задачи принимаются в печатной форме и на электронном носителе. Их содержание и оформление осуществляется согласно общим критериям ситуационных задач по предмету микробиология и вирусология.
Задания для самоконтроля подготовки к практическому занятию (тесты) .
1. Выберите правильный ответ:
1 В постановке реакции агглютинации с целью серодиагностики один из компонентов:
а) диагностикум
б) типовые иммунные сыворотки
в) комплемент
г) гемолитическая сыворотка
2. В постановке РНГА с целью серодиагностики один из необходимых компонентов:
а) типовые иммунные сыворотки
б) эритроцитарный диагностикум
в) комплемент
г) гемолитическая сыворотка
3. В постановке реакции агглютинации с целью серотипирования выделенной культуры необходимо:
а) диагностикум
б) эритроциты барана
в) типовые иммунные сыворотки
г) гемолитическая сыворотка
4. Подберите необходимое для развёрнутой РА:
а) физиологический раствор
б) испытуемая сыворотка
в) диагностикум
г) все выше перечисленное
5. Для поиска антител в РНИФ используется все, кроме:
а) антиген
б) испытуемая сыворотка
в) меченая ФИТЦ сыворотка, содержащая антитела к иммуноглобулинам человека
г) иммунная сыворотка
6. Выбрать необходимый компонент для р. Хеддльсона:
а) дистиллированная вода
б) люминесцентный микроскоп
в) цельная кровь из пальца
г) окрашенный метиленовой синью бруцеллезный диагностикум
7. Выбрать необходимый компонент для р. Минкевича:
а) цельная кровь из пальца
б) люминесцентный микроскоп
в) меченые флюорохромом антитела
г) окрашенный метиленовой синью бруцеллезный диагностикум
8. В какой иммунологической реакции наличие антител регистрируют по прекращению подвижности возбудителя болезни?
а) РА
б) РНГА
в) РНИФ
г) РИТ
9. Токсигенность возбудителя дифтерии выявляют с помощью реакции:
а) агглютинации
б) кольцепреципитации
в) преципитации в геле
г) РСК
10. Для постановки р. Вассермана с целью серодиагностики необходимо иметь:
а) диагностикум, комплемент
б) гемолитическую сыворотку, эритроциты барана
в) исследуемую сыворотку физиологический раствор
г) все выше перечисленное
8. Оснащение практического занятия:
8.1. Наглядные пособия:
а) наглядные пособия (таблицы, схемы, слайды, электронный атлас учебных микропрепаратов)
б) микроскоп люминесцентный, лаборатория
в) культура, физ раствор, иммунная сыворотка, люминесцентные сыворотки
8.2. Технические средства обучения: мультимедийный проектор, нетбук, лабораторное оборудование, микроскопы, биологический объект (мыши бел.)
_____________________________________________________________________________