Бактериоскопия

1. Окраска по Романовскому-Гимзе

2. Серебрение по Морозову

3. Темнопольная микроскопия (подвижность)

Бактериология

(дополнительный метод, недостаточно чувствителен и специфичен)

Среда Келли

Серодиагностика

(основной метод)

1. нРИФ (раздельное определение IgM (1-3 нед.) и IgG (неск. мес. после инфицирования)

2. Иммуноблоттинг

3. ИФА

ПЦР

Для выявления молекул ДНК м/о на ранней стадии

Схема лабораторной диагностики лептоспироза

1. От больного: кровь, моча, СМЖ

2. Из очага: вода, продукты, домашние животные

3. От трупа: пораженные органы

Серодиагностика

(основной метод)

1. РМА

2. нРИФ

3. нИФА

4. РСК

Бактериоскопия

(экспресс-метод. Кровь – с первых дней, моча – с 6-7 дня)

1. Окраска по Романовскому-

Гимзе

2. Серебрение по Морозову

3. Темнопольная микроскопия (подвижность)

Бактериология

(дополнительный метод)

Среда Уленгута, Ферворта-Вольфа. Растут в течение 30 суток.

Изучаются б/х свойства,

проба на каталазу, липазу, реакция агглютинации-лизиса.

ПЦР

Биопроба

(дополнительный метод). Заражают гвинейских свинок или золотистых хомячков. Симптомы появляются через неделю – желтуха, кровотечение

1. Микроскопия в темном поле

2. Посев на питательные среды

Схема лабораторной диагностики сифилиса

Исследуемый материал: содержимое твердого шанкра, кожных высыпаний во все периоды заболевания, сыворотка крови, секционный материал пораженных органов, СМЖ.

Бактериоскопия

1. Окраска по Романовскому-Гимзе

2. Окраска по Бурри

3. Серебрение по Морозову

4. Темнопольная микроскопия (метод висячей и раздавленной капли)

Биопроба

Заражение кролика материалом от больного, если есть заболевание - картина ранних орхитов

Серодиагностика

1. Экспресс-метод с кровью из пальца для отбора подозрительных лиц

2. Реакция Вассермана (РСК)

3. Осадочные реакции (Реакции Кана и Закса-Витебского)

4. Реакция ИБТ

5. Непрямая РИФ

6. Непрямой ИФА

7. РПГА

8. Иммуноблоттинг для обнаружения Ig M и Ig G

Бактериология

?

ПЦР для выявления ДНК бледных трепонем

Диагностика лептоспироза

Исследование проводят в лаборатории особо опасных инфекционных болезней. Диагноз лептоспироза подтверждают следующими методами:

♦ бактериоскопический (экспресс-метод). В первые дни больным проводят микроскопию крови в темном поле, а с 6-7-го дня и микроскопию мочи.

♦ серологический (основной метод). Очень чувствительная реакция микроагглютинации (РМА) с парными сыворотками крови, взятыми на 1-й неделе болезни и через 7-10 дней.

Диагностическое значение имеет нарастание титра антител к лептоспирам в 4 раза и более. Иногда антитела появляются даже через 1 месяц и позже. Для РМА берут 3-4 мл крови из вены. Весьма перспективны иммуноферментный и радиоиммунный методы;

♦ с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) можно обнаружить лептоспиры с первых дней болезни, даже если их количество ничтожно;

♦ бактериологический (дополнительный метод). Высевают кровь, мочу, спинномозговую жидкость на специальные среды (Уленгута, Терских и другие). Однако лептоспиры растут долго – в течение 30 суток, а частота выделения их невелика;

♦ биологический (дополнительный метод). Гвинейским свинкам или молодым золотистым хомякам вводят внутрибрюшинно или наносят на скарифицированную рану кровь больного, мочу или ликвор, при наличии лептоспир заболевание развивается примерно через неделю (желтуха, кровотечение).

Наиболее распространенный метод исследования – реакция микроагглютинации-лизиса с живыми антигенами. Может быть использована РСК, а также реакция макроагглютинации с убитым антигеном. Агглютинины, лизины и комплементсвязывающие антитела появляются в крови на 3-5-й день болезни и максимально накапливаются на 8-10-й день, титр сыворотки в этих случаях равен1:10000-1:50000.

Положительным диагностическим титром считается реакция в разведении 1:400.

Для получения чистых культур лептоспир рекомендуется использовать питательную среду С.Я. Любашенко или В.И. Тверских. Кровь и ликвор следует брать в ранней стадии болезни, при высокой температуре, мочу - в поздней стадии. Посевы из органов нужно делать не позднее чем через 2-3 ч после гибели собаки. Получить чистую культуру из органов очень трудно, поэтому часто прибегают к биопробе: заражают крольчат массой 350-400 г, золотистых хомяков или морских свинок массой 150-180 г. Микроскопией (в темном поле) мочи в поздней стадии болезни можно также обнаружить лептоспир.