
- •Кафедра биологии
- •Предисловие
- •Правила работы в микробиологической лаборатории.
- •Организация микробиологических лабораторий.
- •Оборудование микробиологических лабораторий.
- •Контрольные вопросы
- •Занятие 2
- •Вопросы для рассмотрения
- •Материалы для исследования и техника взятия культуры для приготовления препарата.
- •Приготовление прижизненных (нативных) препаратов.
- •Приготовление мазков и их фиксация
- •Методы окраски мазков и красители, используемые в микробиологии.
- •Красители основной природы Красные Фиолетовые
- •Синие Коричневые
- •Зеленые Черный
- •Красители кислой природы
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения:
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения
- •Задание для выполнения лабораторной работы
- •Холодная стерилизация:
- •II. Термическая стерилизация:
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения:
- •Приготовление почвенной суспензии для посева и техника посева.
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения:
- •Определение количества клеток микроорганизмов
- •1.Подсчет клеток в счетных камерах
- •2.Подсчет клеток в капиллярах Перфильева
- •Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках (метод Виноградского-Брида)
- •4.Подсчет клеток на мембранных фильтрах
- •5.Определение количества клеток высевом на плотные питательные среды (чашечный метод Коха)
- •Определение количества клеток высевом в жидкие среды (метод предельных разведений)
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения.
- •Контрольные вопросы.
- •Вопросы для рассмотрения.
- •Определение белка по Бредфорду.
- •Определение белка по Лоури.
- •Определение нуклеиновых кислот.
- •Определение поли-β-оксимасляной кислоты (пбомк).
- •Выделение и анализ полисахаридов.
- •Анализ состава клеточных стенок микроорганизмов.
- •Выделение и очистка фракций клеточных стенок.
- •Анализ состава пептидогликана (пг).
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения.
- •Меры предосторожности при работе с мутагенами.
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения:
- •Контрольные вопросы.
- •Вопросы для рассмотрения.
- •1.Исследование молочнокислых бактерий
- •2.Микроскопирование маслянокислых бактерий.
- •3.Микроскопирование микроорганизмов, окисляющих жир.
- •Контрольные вопросы
- •Вопросы для рассмотрения.
- •1.Исследование возбудителей гнилостного распада белковых веществ.
- •2.Микроскопирование азотфиксирующих бактерий свободноживущих в почве.
- •3.Исследование тионовых бактерий.
- •1. Белковых веществ
- •2. Аммонификация мочевины
- •Вопросы для рассмотрения
- •Некоторые таксономические признаки представителей важнейших семейств вирусов человека и животных
- •Контрольные вопросы
- •Рекомендованный материал
- •Тема: Методы культивирования и индикации вирусов Вопросы для рассмотрения
- •Правила работы с вирусным материалом
- •Методы культивирования вирусов
- •0,2 Х разведение
- •Контрольные вопросы
- •Занятие 18
- •Вопросы для рассмотрения.
- •Контрольные вопросы
Вопросы для рассмотрения.
1.Основные типы брожения.
2.Освобождение энергии в аэробных условиях.
Задание для выполнения лабораторной работы
1.Приготовить окрашенный препарат молочнокислых бактерий; микроскопировать его и зарисовать.
2.Приготовить препарат из маслянокислых бактерий, микроскопировать и зарисовать.
Приготовить окрашенный препарат из культуральной жидкости; микроскопировать его, найти и зарисовать микроорганизмы окисляющие жир.
1.Исследование молочнокислых бактерий
Для микроскопических наблюдений молочнокислых бактерий готовят препарат из прокисшего молока, кефира, йогурта, ряженки, ацидофилина, простокваши. Бактериологическую петлю вводят в сгусток и, повернув вокруг оси, извлекают, прикасаясь ею к пленке. Сгусток размазывают на предметном стекле очень тонким слоем без воды. Сушат на воздухе. Фиксируют смесью Никифорова, несколько раз, нанося избыток смеси на мазок и сливая ее. При такой фиксации не только погибают бактерии и прикрепляются к стеклу, но и параллельно эфиром извлекается жир, и удаляется. Фиксированный препарат окрашивают метиленовым синим в течение 2-3 мин, промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсией.
2.Микроскопирование маслянокислых бактерий.
Питательную среду берут из пробирки пипеткой, погружая ее в средний слой сброженной жидкости. Наносят каплю на предметное стекло, добавляют каплю раствора Люголя и покрывают покровным стеклом. Микроскопируют с иммерсией. В клетках можно заметить овальные тельца, сильно преломляющие свет, - это споры. В тех местах клетки, где содержится гранулеза, возникает синее окрашивание. Зарисовать окрашенные клетки, явно относящиеся к группе маслянокислых бактерий.
3.Микроскопирование микроорганизмов, окисляющих жир.
Из колбы берут немного жидкости и готовят мазок. Сушат на воздухе, фиксируют смесью спирта с эфиром и окрашивают фуксином 1-2 мин. При микроскопировании с иммерсионным объективом можно обнаружить неспороносную палочку Pseudomonas fluorescens.
Жир могут окислять также актиномицеты и грибы, особенно рода Oidium lactic.
Контрольные вопросы
Спиртовое брожение.
Молочнокислое брожение.
Маслянокислое брожение.
Брожение пектиновых веществ.
Брожение целлюлозы.
Окисление этилового спирта в уксусную кислоту.
Окисление углеводов плесневыми грибами с образованием лимонной кислоты.
Окисление клетчатки.
Окисление жира.
Рекомендованный материал.
Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии. «Колос», М. 1972. Стр. 104-121.
Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. МГУ, М. 1985. Стр.328-364.
Мишустин Е.Н., Емцев В.Т. Микробиология. «Колос», М. 1978. Стр. 84-125.
Шлегель Г. Общая микробиология.»Мир», М. 1972. Стр. 240-278, 288-300, 347-380.
ЗАНЯТИЕ 15
ТЕМА: Превращение микроорганизмами азотистых
веществ и соединений серы, железа, фосфора.
Вопросы для рассмотрения.
Процессы аммонификации.
Процессы нитрификации и денитрификации.
Биологическая фиксация атмосферного азота.
Превращение микроорганизмами соединений серы, железа, фосфора.
Задание для выполнения лабораторной работы
1.Микроскопировать и зарисовать возбудителей аммонификации белковых веществ.
2.Микроскопировать и зарисовать азотфиксирующих бактерий свободноживущих в почве.
3.Микроскопировать и зарисовать тионовые бактерии.
4. Микроскопировать и зарисовать железобактерии.