Аппаратура

Хемостатный метод требует довольно сложного оборудования: ферментер емкостью 0,5-2 л или больше с термостатированием, аэрация осуществляется мешалкой с регулируемым числом оборотов и подачей воздуха с регулируемой скоростью; электроды для измерения рН с устройством для автоматического поддерживания заданного уровня; электрод для измерения насыщения среды кислородом, дозирующие насосы для подачи среды. Показания датчиков t, рН и О₂ могут регистрироваться автоматически самописцами.

Методика выполнения работы

Работа состоит из трёх заданий. Исследуется влияние внешних условий на развитие микроорганизмов.

Задание 1. Влияние влажности на развитие микроорганизмов

Материалы и оборудование

Ломтики белого хлеба, чашки Петри, микробиологические петли, чистые культуры плесневых грибов, спиртовки, 0,5 литровые стеклянные банки с крышками, почва, предметы стекла, полоски фильтровальной бумаги.

Ход работы

Берут несколько ломтиков хлеба определенной площади, имеющих разную влажность, кладут в чашки Петри и стерилизуют при давлении 1 атм. в течение 20 минут. На поверхность ломтиков наносят споры плесневелого гриба. Чашки оставляют в термостате при температуре 25⁰С. Ежедневно измеряют поверхность, занимаемую колониями гриба на ломтиках, строят кривые роста и накопления микроорганизмов при разной влажности.

Второй этап работы требует длительного времени. В стеклянные 0,5 литровые банки насыпают воздушно-сухую почву слоем 10см. Почву увлажняют в разной степени вплоть до полного затопления водой, банки закрывают крышками. Предметные стекла обертывают фильтровальной бумагой и помещают в банки, закрывая их слоем почвы в 5-7см. Банки оставляют в теплом месте на месяц и более. В течение этого срока нужно периодически следить за влажностью почвы и поддерживать ее на заданном уровне. Через 1,2,3 месяца просматривают состояние фильтровальной бумаги в каждой банке. Делают вывод о влиянии влажности почвы на развитие бактерий, разлагающих клетчатку.

Разное увлажнение почвы удобнее всего создавать, приливая определенное процентное количество воды по отношению к массе почвы. В дальнейшем постоянную массу банок поддерживают доливанием в них воды.

Задание 2. Влияние света на развитие бактерий

Материалы и оборудование

Чашки Петри с МПА, чистая культура кишечной палочки, микробиологические петли, спиртовки, черная бумага, ножницы, клей, стеклянные шпатели, стерильные пробирки с 1 мл воды, стерильные пипетки.

Ход работы

На поверхность застывшего мясопептонного агара обильно засевают чистую культуру кишечной палочки. Для этого бактерии берут петлей из чистой культуры и разводят их в 1 мл стерильной воды в пробирке. Стерильной пипеткой наносят несколько капель разведенной культуры на поверхность питательной среды и растирают по поверхности стеклянным шпателем. На дно чашки клеем прикрепляют черную бумагу, в которой вырезано «окно». Чашки помещают на несколько часов на прямой солнечный свет таким образом, чтобы освещалась только та часть среды, которая находится под «окном», в черной бумаге. После облучения чашки помещают в термостат с температурой 43 ⁰С. На следующем занятии чашки просматривают и обнаруживают прекращение роста бактерий на тех участках среды, которые подвергались освещению.

Задание 3. Влияние температуры на развитие бактерий

Материалы и оборудование

Чашки Петри с МПА, стерильные пробирки с 1 мл воды, культуры сенной и картофельной палочек, микробиологические петли, спиртовки, стеклянные шпатели, пипетки, термостаты.