Практическое занятие № 20 «Лабораторная диагностика возбудителей стронгилоидоза».
I. План.
1. Закрепить знания строения яиц и жизненного цикла стронгилоида.
2. Изучить сбор и доставку материла для выделения возбудителей стронгилоидоза.
3. Лабораторная диагностика. Овладеть методикой и техникой:
а) приготовления нативного мазка из фекалий методом закручивания по Шульману;
б) приготовления нативного мазка из фекалий по методу Бермана;
в) изучить серологический метод ИФА.
4. Закрепить практические навыки по технике паразитологических исследований.
II. Самостоятельная работа
Задание № 1.Изучите строение яиц стронгилоида по компьютерному атласу, слайдам, микропрепаратам, таблицам. Зарисуйте в дневник и подпишите.
Яйца
стронгилоида
Задание № 2.Изучите жизненный цикл развития стронгилоида по компьютерному атласу, слайдам, таблицам. Запишите в дневник.
Фекалии яйца
Задание № 3.Изучите сбор и доставку материала в паразитологическую лабораторию для выделения возбудителей стронгилоидоза. Запишите в дневник.
Материал – фекалии, дуоденальное содержимое (желчь), мокрота.
Доставка материала осуществляется в металлических пеналах, биксах.
Пробы испражнений сопровождаются направлением. Исследование материала проводится не позже, чем через 20-30′ после его выделения. При невозможности немедленного исследования испражнения помещают в консервант.
Фекалии максимально быстро после дефекации с помощью деревянной палочки переносят в стерильный флакон с консервантом Турдыева, если фекалии оформленные, то количество должно быть в объеме с лесной орех, если жидкие – объемом с чайную (столовую) ложку. Соблюдая соотношение: 3 части консерванта и 1 часть фекалий. Флакон закрывают крышкой, предварительно тщательно размешав фекалии деревянной палочкой до гомогенной суспензии.
Отбор дуоденального содержимого (желчь) осуществляется в 3 пробирки (порции «А», «В», «С») путем зондирования пациентов натощак. Все 3 пробы исследуются сразу после поступления в лабораторию.
Отбор проб мокроты осуществляется при откашлевании в стерильную посуду с крышкой (можно в чашку Петри) и исследуется сразу после поступления в лабораторию.
Подготовьте рабочее место, микроскопы и экипируйтесь согласно инструкции по ТБ в паразитологической лаборатории.
Задание № 4.Приготовьте нативный мазок из фекалий методом закручивания по Шульману для обнаружения личинок стронгилоида.
Алгоритм работы:
Берут 2-3г свежевыделенных фекалий, переносят их палочкой в стеклянную банку. Сюда же добавляют пятикратное количество воды и быстро размешивают палочкой, не касаясь стенок банки. Через 20-30 сек. после начала размешивания палочку быстро вынимают, образовавшуюся на ее конце каплю жидкости переносят на предметное стекло и микроскопируют при сухом объективе 8, 40, окуляр 10.
Задание № 5.Приготовьте нативный мазок из фекалий для обнаружения личинок стронгилоида по методу Бермана.
Алгоритм работы:
На узкий конец стеклянной воронки надеть резиновую трубку с зажимом. Воронку укрепить в штативе.
В воронку поместить металлическую сетку и заполнить воронку подогретой до 40-45 оС водой так, чтобы нижняя часть сетки была погружена в воду.
На сетку положить 2 слоя марли и на нее 5-10 г кала. Личинки из фекалий активно мигрируют в теплую воду и скапливаются в нижней части резиновой трубки надетой на воронку.
Через 4 ч. зажим на трубке открыть и опустить жидкость в 2 центрифужные пробирки.
После центрифугирования в течение 2-3 мин. надосадочную жидкость быстро слить, а осадок перенести на предметное стекло и микроскопировать при сухом объективе 8, 40, окуляр 10.
Марлю с фекалиями поместить в бак с дез. р-ром, воронки и сетки обезвредить кипячением.
Задание № 6. Микроскопируйте приготовленные препараты
Поместите отработанные стекла в дез. раствор для обеззараживания. Обработайте микроскопы 70% спиртом. Уберите рабочее место. Обработайте руки согласно инструкции.
Задание № 7 .Изучите серологический метод для выделения возбудителей стронгилоидоза.
Методы:
Домашнее задание:
Учебник «Медицинская паразитология» Д.Е.Генис стр. _____________
Замечания преподавателя_____________________
Подпись преподавателя _______________________