4. Определение жизнеспособности личинок.
Жизнеспособность плероцеркоидов определяют по внешним признакам и путем окрашивания. Плероцеркоиды помещают в теплый ИХН и осторожно раздражают препоровальной иглой. Наличие слабых движений характеризуют живую личинку. Изменение цвета указывает на их гибель.
Можно окрасить живых плероцеркоидов водным р-ром нейтральрота в разведении 1:20 000-1:50 000 в течение 30-40 мин.
Задание № 4. Изучите серологический метод для выделения возбудителей эхинококкоза, альвеококкоза.
Для выделения возбудителей эхинококкоза, альвеококкоза используют ИФА; РИФ; РПГА; РЛА.
Результат реакции:
при положительном результате образуется комплекс Аг + Ат, который связывается с коньюгатом и окрашивается в присутствии ОФД.
При отрицательном результате комплекс не образуется, коньюгат не связывается и после промывки «выходит» из реакции, офд его не выявляет, лунка не окрашивается.
Этап взаимодействия ОФД с комплексом требует особого внимания и своевременной остановки реакции, что достигается внесением стоп-реагента (H2SO4).
С помощью спектрофотометра с вертикально направленными пучками света замеряют показатели экстинции (оптической плотности).
Домашнее задание:
Учебник «Медицинская паразитология» Д.Е.Генис стр. _____________
Замечания преподавателя_____________________
Подпись преподавателя ______________________
Практическое занятие №18 «Лабораторная диагностика возбудителей аскаридоза, трихоцефалеза».
I. План.
1. Закрепить знания жизненного цикла и строения яиц аскариды и власоглава.
2. Лабораторная диагностика. Овладеть методикой и техникой:
а) приготовления нативного мазка из фекалий;
б) приготовления большого мазка;
в) приготовления толстого мазка по Като;
г) проведения методов обогащения по Калантарян, Фюллеборну;
3. Освоить технику микроскопирования приготовленных препаратов. Освоить технику микроскопирования яиц гельминтов в микропрепаратах.
II. Самостоятельная работа
Задание 1. Заполните схему жизненных циклов аскариды и власоглава и укажите инвазионную стадию для человека
Аскарида
t
ºC=
дней
Яйца
Яйца
Власоглав
t
ºC=
дней
Яйца
Задание 2. Изучите строение яиц аскариды, власоглава по компьютерному атласу, слайдам, микропрепаратам, таблицам. Зарисуйте в дневник и подпишите.
Яйца аскариды Яйца аскариды Яйца
оплодотворенные оплодотворенные власоглава
с белковой оболочкой без белковой оболочки
мкм мкм мкм
Подготовьте рабочее место, микроскопы и экипируйтесь согласно инструкции по тб в паразитологической лаборатории.
Задание 3. Проведите метод обогащения по Фюллеборну ( 45 мин).
Алгоритм работы к заданиям №3-7 в Приложении к методическим рекомендациям
Задание 4. Проведите метод обогащения по Калантарян (25 мин).
Задание 5. Приготовьте нативные мазки из фекалий с 50%-ным водным р-ром глицерина. Оставьте приготовленный препарат для микроскопического исследования на рабочем столе.
Задание 6. Приготовьте большой мазок из фекалий. Оставьте препарат для микроскопического исследования на рабочем столе.
Задание 7.Приготовьте толстый мазок по Като. Оставьте приготовленный препарат для микроскопического исследования на рабочем столе.
Задание 8. Исследуйте приготовленные препараты под микроскопом согласно алгоритму исследования.
Поместите отработанные стекла в дез. раствор для обеззараживания. Обработайте микроскопы 70% спиртом. Уберите рабочее место. Обработайте руки согласно инструкции.
Задание № 9. Оформите заключение лабораторной диагностики приготовленных препаратов.
Задание 10. Исследуйте готовые (заводские) микропрепараты смеси яиц гельминтов под микроскопом.
Результат зарисуйте:
Задание № 11. Оформите заключение лабораторной диагностики приготовленных препаратов.
Объекты исследования |
Нативный мазок |
Большой мазок |
Толстый мазок по Като |
Препарат по Фюллеборну |
Препарат по Калантарян |
Толстый мазок по Като |
Жир |
|
|
|
|
|
|
Крахмал |
|
|
|
|
|
|
Волокна |
|
|
|
|
|
|
Бактерии |
|
|
|
|
|
|
Грибы |
|
|
|
|
|
|
Эпителий |
|
|
|
|
|
|
Клетчатка |
|
|
|
|
|
|
Мышечные волокна |
|
|
|
|
|
|
Цисты |
|
|
|
|
|
|
Вегетативные формы |
|
|
|
|
|
|
Яйца гельминтов |
|
|
|
|
|
|
Домашнее задание:
Учебник «Медицинская паразитология» Д.Е.Генис стр. _____________
Замечания преподавателя_____________________
Подпись преподавателя ______________________