1. Нанести у відповідні гнізда градуйованої тарілки за допомогою піпеток по 1 краплі сироваток двох серій 0 (I), А(II) та В(III) груп .

2. Нанести за допомогою піпетки 1 краплю крові поряд з гніздом АВ(IV) градуйованої тарілки.

3. Внести кров різними кутами предметних скелець до сироватки у співвідношенні 1:10, розмішати. Скельця покласти в дезрозчин.

4. Похитати обережно тарілку протягом 3-4 хвилин.

5. Якщо аглютинація не чітка, додати в гнізда, де вона наступила, по 1 краплі 0,9% р-ну натрію хлориду.

6. Прочитати результат через 1 хвилину:

   • Реакція аглютинації відсутня, отже еритроцити не містять аглютиногенів і кров належить до 0 (I) групи;

   • Реакція відбулася із сироваткою 0 (I) та в(III) груп і не відбулася з сироваткою а(II), отже еритроцити містять аглютиногени а і кров належить до а(II) групи;

   • Реакція аглютинації відбулася із сироваткою 0 (I) та а(II) груп і не відбулася із сироваткою в(III) групи, отже еритроцити містять аглютиногени в і кров належить до в(III) групи;

   • реакція аглютинації відбулася з трьома групами сироваток, отже еритроцити містять аглютиногени А і В і кров належить до АВ(IV) групи. Для контролю необхідно в гніздо АВ(IV) градуйованої тарілки за допомогою піпетки внести 1 краплю сироватки АВ(IV) групи. Внести кров предметним скельцем у співвідношенні 1:10, розмішати та обережно похитати тарілку протягом 3-4 хвилин. Реакції аглютинації не повинно бути.

7. Використане оснащення та гумові рукавички продезінфікувати.

Визначення групи крові за допомогою моноклональних антитіл анти –а та анти-в (цоліклонів)

Оснащення:

1. Цоліклони анти-А та анти-В в пробірках (флаконах) з піпетками.

2. Градуйована фарфорова пластинка або градуйована тарілка для визначення груп крові за допомогою стандартних сироваток.

3. Штатив з пробірками в яких:

   • кров, що досліджується з піпеткою;

   • 0,9 % р-н натрію хлориду з піпеткою.

4. Предметне скло.

5. Ємкість з дезінфектантом.

6. Спеціальний одяг для медсестри.

Попередня підготовка:

1. Підготувати себе до роботи з кров’ю.

2. Виконувати сидячи.

Основні етапи виконання:

1. Нанести за допомогою піпетки по 1 краплі цоліклонів анти-А та анти-В на фарфорову пластинку під відповідні написи або на градуйовану тарілку у гніздо А(II) цоліклон анти-А, а у гніздо В(III) – цоліклон анти-В.

2. Нанести 1 краплю крові, групу якої визначаємо, на градуйовану фарфорову пластинку посередині, між цоліклонами, або у гніздо АВ(IV) градуйованої тарілки.

3. Внести кров різними кутами предметного скла в цоліклони у співвідношенні 1:10, розмішати. Предметне скло покласти у дезрозчин.

4. Легко погойдати пластинку протягом 2-3 хвилин.

5. Прочитати результат:

   • аглютинація відсутня, отже в еритроцитах не має антигенів А і В, кров належить до 0 (I) групи.

   • аглютинація відбулася з цоліклоном анти-А, отже в еритроцитах є антиген А і кров належить до А(II) групи.

   • аглютинація відбулася з цоліклоном анти-В, отже в еритроцитах є антиген В і кров належить до В(III) групи.

   • аглютинація відбулася з цоліклонами анти-А та анти-В, отже в еритроцитах є антигени А і В, кров належить до АВ(IV) групи.

Для виключення аутоаглютинації, яка спостерігається в деяких випадках, необхідно провести контроль з ізотонічним розчином натрію хлориду: до залишків крові на фарфоровій пластинці або градуйованій тарілці додати 1 краплю 0,9 % р-ну натрію хлориду.Реакції аглютинації не повинно бути.