1.2. Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам

Чувствительность микроорганизмов к химиопрепаратам - свойство микроорганизмов реагировать на действие химиопрепаратов (антибиотиков, антисептиков) приостановкой размножения или гибелью. Каждый вид или близкая группа видов имеют характерный спектр и уровень естественной (природной) чувствительности по отношению к определенному препарату или группе препаратов.

Метод качественного определения чувствительности микробов к антибиотикам (метод бумажных дисков)

Исследуемые чистые культуры, взятые из 5-10 колоний, выращивают 18-20 ч на МПА, готовят смесь плотностью в 10 ЕД оптического стандарта на физрастворе и разводят в 10 раз. На поверхность плотной среды наливают 2 мл исследуемой культуры и покачиванием чашки равномерно распределяют ее по всей поверхности среды, остаток отсасывают пипеткой. Среду подсушивают 20-30 мин при комнатной температуре, после чего на поверхность газона стерильным пинцетом накладывают диски (не более 6 на чашку) на расстоянии 2 см друг от друга и от краев чашки. Инкубируют в термостате 24-48 ч при 37 С.

В падающем свете, на фоне темной матовой поверхности измеряют диаметр (с учетом диаметра диска) задержки роста. Оценку результатов проводят по таблице. Диаметры зон задержки роста испытанных штаммов сравнивают с пограничными значениями в таблице и относят их к одной из 3 категорий чувствительности-устойчивости (табл.6).

Для получения количественных результатов о чувствительности микробов к антибиотикам используют методы серийных разведений. Метод серийного разведения препарата в бульоне основан на определении способности растворенного в питательном бульоне препарата вызывать гибель или ингибировать рост находящихся в нем микробов.

Метод серийных разведений в плотной питательной среде базируется на способности растворенного в плотной питательной среде препарата ингибировать рост нанесенных на него микробов. По сравнению с методом серийных разведений в жидкой среде более производителен, чувствителен и точен.

Таблица 6.

Пограничные данные диаметра зон задержки роста и значений для интерпретации результатов испытания

чувствительности микроорганизмов

Антибиотики	Диаметры зон (мм) для			МИК, мкг/мл
	устойчивые	умеренно устойчи-вые	Чувствии-тельные	устойчивые	чувствительные
Бензилпенициллин	20	21—28	29	25	12
Карбенициллин	14	15--18	19	64	16
Стрептомицин	16	17--19	20	16	 8
Гентамицин	15	-	 16	16	 4
Тетрациклин	16	17--21	22	 8	 2
Эритромицин	17	18--21	22	 8	 0,5
Линкомицин	19	20--23	24	 8	 2
Левомицетин	15	16--18	19	32	 8
Ристомицин	 9	10--11	12	32	 4