2.2. Материалы для исследования

Материалами для исследования микроорганизмов являются нормальные или патологические субстраты здорового и больного организма (биологические материалы), объекты внешней среды (воды, почва, воздух), продукты питания, лекарственные препараты.

Материал для бактериологического исследования забирают с соблюдением ряда правил:

1) вид материала должен соответствовать локализации предполагаемого возбудителя на данном этапе патогенеза болезни. При отсутствии или неясности локальных очагов исследуется кровь;

2) необходимо достаточное количество материала;

3) материал для исследования берут возможно раньше, до начала антимикробной терапии;

4) необходимо предупредить возможную контаминацию исследуемых материалов собственной нормальной микрофлорой больного и микробами окружающей среды. Для этого взятие материала проводят в асептических условиях в процедурном кабинете стерильными инструментами в стерильную посуду;

5) любой клинический материал расценивается как потенциально опасный для человека, необходимо соблюдать правила техники безопасности;

6) любой привозимый в лабораторию материал сопровождают направлением с указанием в нем названия исследуемого материала, учреждения, направляющего материал для исследования, цели и метода исследования, подписью специалиста, взявшего материал для исследования;

7) после исследования остатки материала для исследования подлежат уничтожению (лучше автоклавированием или сжиганием), а посуда, контейнеры, инструменты, бывшие с материалом в контакте, - обеззараживанию.

2.3. Питательные среды

Дл культивирования бактерий в искусственных условиях используют особый субстрат – питательные среды, представляющие собой жидкие, полужидкие или плотные субстраты, содержащие необходимые для нормального роста микробной культуры вещества.

Требования предъявляемые к питательным средам:

1) оптимальный для конкретных бактерий состав,

2) оптимальная влажность,

3) прозрачность,

4) стерильность, чтобы знать, какому микробу принадлежат те или иные свойства;

5) оптимальные концентрации водородных ионов и окислительно-восстановительный потенциал.

В зависимости от состава различают минеральные и органические среды; природные, представляющие собой природные субстраты (молоко, желчь, кровь, сыворотка крови, картофель); искусственные, содержащие смесь природных органических веществ и продуктов их кислотного или ферментативного распада. Синтетические среды состоят из забуференной солевой основы и растворов аминокислот, углеводов, пуринов, пиримидинов, нуклеотидов, нуклеозидов, жирных кислот, витаминов.

По консистенции различают плотные и полужидкие среды готовят из жидких добавлением уплотнителя, обычно агара (0,5-3 %).

В зависимости от назначения питательные среды делят на

1) простые или общеупотребительные (МПА, МПБ, пептонная вода) – на них растёт большинство видов микроорганизмов, не отличающихся строгим паразитизмом и способным синтезировать для себя нужные вещества из субстрата;

2) дифференциально-диагностические (плотные и жидкие pH-индикаторные, восстановительные, деполимеризующие и др.). Эти среды позволяют зарегистрировать наличие ферментов, характерных для определённых видов микробов. Такие среды готовят путём добавления в среду общего назначения субстрат для проявления действия микробного фермента (например, сахарозу для установления наличия сахаразы, мальтозу – для установления наличия мальтазы и т.д.) и индикатора;

3) специальные селективные или элективные, на которых только или преимущественно растут определенные виды или группы видов. Эти среды готовят путём добавления антибиотиков или других веществ, сдерживающих рост неинтересующих исследователя культур.