Микроорганизмы, с которыми можно работать в лабораториях

I - IV классов защиты

Бактерии	Грибы	Простейшие	Вирусы
Лаборатории I класса защиты
все виды, не принадлежащие другим классам защиты			Нью-кастл, парамиксовирусы
Лаборатории II класса защиты
актинобациллы, бордетеллы, боррелии, кампилобактерии, клостридии, шигеллы, кишечная палочка, клебсиеллы, листерии, вибрионы, микобактерии (не туберкулезные)	кладоспоридии, бластомицеты, пенициллинумы, криптококки,	криптоспоридии, гиардии, юаюезии, лейшмании, плазмодии, шистосомы, трипаносомы	аденовирусы, коронавирусы, Коксаки А и В, ЕСНО, риновирусы, вирусы гепатитов, вирус Эпштейн-Барра, вирусы гриппа, вирус натуральной оспы
Лаборатории III класса защиты
бартонеллы, бруцеллы, микобактерии - возбудители туберкулеза,псевдомонада - возбудитель сапа, риккетсии, хламидии, возбудитель чумы	кокцидии, гистоплазмы		вирус лихорадки денге, вирус хориолимфоцитарного менингита, вирус желтой лихорадки, вирус обезьяньей оспы
Лаборатории IV класса защиты
			вирусы геморрагических лихорадок, вирусы Эбола, Марбург, Ласса, герпес-вирусы

2. Культуральный метод исследования

2.1. Бактериологический (культуральный) метод - совокупность методик искусственного культивирования микроорганизмов на питательных средах в целях их идентификации. Современные методы изучения большинства биологических свойств бактерий возможны только при наличии чистой культуры.

Задачи культурального метода:

1) получение чистой культуры какого-либо вида (вара) из микробной ассоциации;

2) идентификация выделенной чистой культуры,

3) определение дополнительных свойств, например, чувствительности к антибиотикам, вирулентности.

Выполнение бактериологического метода исследования позволяет установить вид микроорганизма, обнаруженного в исследуемом материале, что важно в медицине для установления причина заболевания и назначения правильного лечения, а в других областях для понимания происходящих процессов. Бактериологический метод исследования выполняется в несколько этапов:

1) взятие материала и его доставка в бактериологическую лабораторию;

2) микроскопия исследуемого материала. Этот этап часто не выполняется, хотя предварительная микроскопия в ряде случаев дает ориентировочные сведения о возбудителе и позволяет выбрать необходимые для посева среды;

3) обработка исследуемого материала физическими или химическими факторами в целях удаления или уменьшения посторонней микрофлоры, т.е. обогащение исследуемого материала;

4) посев исследуемого материала на питательные среды с последующей инкубацией (1 - 2 суток) для получения изолированных колоний;

5) исследование колоний. Для изучения выбирают однородные изолированные колонии, располагающиеся далеко от краев чашки и по штриху петли, окружают их чертой, нумеруют. Если исследование ведется не направленно (полиэтиологичный процесс и пр.), то на основании результатов визуального осмотра выбирают по 2-3 колонии всех имеющихся на чашке типов и делают с них мазки. При исследовании колоний, выросших на питательной среде отмечают наиболее важные признаки – цвет колонии, размер, влажность, форму края, форму поверхности и другие признаки, помогающие в дальнейшем идентифицировать выделенные бактерии;

6) пересев выбранных колоний на среды накопления для получения микробной массы, достаточной для идентификационных исследований. Для этого с остатка колоний, в мазке которой выявлены однородные по форме и окраске бактерии, петлей забирают часть культуры и засевают на скошенный в пробирке МПА или специальную среду штрихом; в процессе инкубации необходимо получить сплошной, а не изолированный, рост колоний;

8) определение чистоты выросшей на скошенных средах культуры путем макроскопического осмотра роста и микроскопии мазка из него;

9) идентификация выделенной чистой культуры и в случае необходимости (по требованию клинициста, эпидемиолога) определение различных биологических свойств;

10) заключение о видовой принадлежности выделенной культуры и ее свойствах.

Характеристика бактериологического метода

К положительным чертам бактериологического метода относят:

1) высокую чувствительность, позволяющей выделить из исследуемого материала чистую культу, даже если в посевной дозе материала содержалось несколько десятков особей.

2) высокую специфичность.

3) с его помощью могут быть установлены свойства культуры, необходимые для назначения химио- и серотерапии, выявления источника инфекции и механизмов передачи возбудителя, выбора противоэпидемических мероприятий.

Среди недостатков бактериологического метода - опасность инфицирования работающего персонала и контаминации посевов, предметов окружающей среды, сложность, трудоемкость, длительность исследования.