6. Гуморальные неспецифические факторы.

К гуморальным факторам неспецифической резистентности относятся:

- нормальные антитела

- комплемент

- лизоцим

- пропердин

- В-лизины

- лейкины

- интерферон

- ингибиторы вирусов и другие вещества белковой природы, постоянно присутствующие в сыворотке крови, секретах слизистых оболочек и жидкостях и тканях организма.

Эти субстанции возникли в процессе эволюции после формирования иммунитета (воспаление, фагоцитоз) и являются предшественники антител (специфических факторов иммунитета).

Нормальные (естественные) антитела по отношению ко многим антигенам выявляются в низких титрах в сыворотках крови здоровых людей, которые не подвергались специальной иммунизации определенными антигенами. Природа этих антител еще окончательно не установлена. Допускают, что они могут возникнуть либо спонтанно (в результате наследования информации об их синтезе), либо в результате скрытой иммунизации антигенами, поступающими с пищей, либо вследствие перекрестной (гетерогенной) иммунизации. В крови новорожденных нормальные антитела часто отсутствуют или определяются в очень низких титрах. В связи с этим их обнаружение в демонстративных титрах (1:4-1:32) является показателем степени иммунологической зрелости организма и нормального функционирования иммунной системы. При иммунодефицитных и других патологических состояниях организма титры этих антител резко снижаются или не выявляются.

Комплемент – (от лат. complementum – дополнение) представляет собой комплекс белков сыворотки крови, реагирующих между собой в определенной последовательности и обеспечивающих участие антигенов и антител в клеточных и гуморальных реакциях иммунитета.

Открыт комплемент французским ученым Ж. Борде, назвавшим его «алексином». Современное название комплементу дал П. Эрлих.

Комплемент состоит из 30 различающихся по физико-химическим свойствам белков сыворотки крови, его обозначают символом «С», а девять основных компонентов комплемента – цифрами: С1, С2, С3, С4… С9. Каждый компонент имеет субъединицы, которые образуются при расщеплении; обозначаются они буквами: С1g, С3а, С3b и т.д. белки комплемента являются глобулинами или гликопротеинами с молекулярной массой от 80 (С9) до 900 тыс. (С1). Вырабатываются в печени и секретируются макрофагами, нейтрофилами и составляют 5-10 % всех белков сыворотки крови.

Механизм действия комплемента. В организме комплемент находится в неактивном состоянии и активируется обычно в момент образования комплекса антиген — антитело. После активации его действие носит каскадный характер и представляет серию протеолитических реакций, направленных на усиление иммунных клеточных и активацию действия антител по устранению антигенов. Существует два пути активации комплемента: классический и альтернативный.

При классическом способе активации происходит присоединение к комплексу антиген-антитело (Аг + Ат) в начале комплемента С1 комплемента (его трех субъединиц С1g, С1r, С1s), затем к образовавшемуся комплексу Аг + Ат + С1 присоединяются последовательно «ранние» компоненты комплемента С4, С2, С3. Эти «ранние» компоненты активируют с помощью ферментов компонент С5, причем реакция протекает уже без участия комплекса Аг+ Ат. Компонент С5 прикрепляется к мембране клетки, и на нем образуется литический комплекс из «поздних» компонентов комплемента С5b, С6, С7, С8, С9. Этот литический комплекс называется мембраноатакующим, так как он осуществляет лизис (растворение) клетки.

Альтернативный путь активации комплемента происходит без участия антител в организме. Он также заканчивается активацией комплемента С5 и образованием мембраноатакующего комплекса, но без участия компонентов С1, С2, С4.

Весь процесс начинается с активации компонента С3, которая может происходить непосредственно в результате прямого действия антигена (например, полисахарида микробной клетки). Активированный С3 взаимодействует с факторами В и Д (ферментами) системы комплемента и белком пропердином (Р). Образовавшийся комплекс С3 + В + Р включает компонент С5, на котором и формируется мембраноатакующий комплекс, как и при классическом пути активации комплемента.

Таким образом, классический и альтернативный пути активации комплемента завершаются образованием мембраноатакующего литического комплекса. Механизм действия этого комплекса на клетку до конца не выяснен. Однако известно, что этот комплекс внедряется в мембрану, образует как бы воронку с нарушением целостности мембраны. Это приводит к выходу из клетки низкомолекулярных компонентов цитоплазмы, а также белков, поступлению в клетку воды, что в конечном итоге приводит к гибели клетки. Т. о. комплемент обладает способностью вызывать лизис микробных и других клеток.

Функции комплемента:

Система комплемента обеспечивает:

А) цитолитическое и цитотоксическое действие антител на клетки-мишени благодаря образованию мембраноатакующего комплекса;

Б) активацию фагоцитоза в результате связывания с иммунными комплексами и адсорбции их рецепторами макрофагов;

В) участие в индукции иммунного ответа вследствие обеспечения процесса доставки антигена макрофагами;

Г) участие в реакциях анафилаксии, а также в развитии воспаления вследствие того, что некоторые фрагменты комплемента обладают хемотаксической активностью.

Следовательно, комплемент обладает многосторонней иммунологической активностью, участвует в освобождении организма от микроорганизмов и других антигенов, в уничтожении опухолевых клеток, отторжении трансплантатов, аллергических повреждениях тканей, индукции иммунного ответа.

Лизоцим. Это фермент (ацетилмурамидаза). Он разрушает пептидополисахариды клеточных стенок бактерий, термостабилен (полная инактивация достигается только при кипячении), чувствителен к действию кислот и оснований, УФЛ.

Наибольшее количество лизоцима обнаружено в белке куриного яйца (титр 1:60000000), в слезах (1:40000), носовой слизи и мокроте (1:13500), меньше в слюне (1:300), сыворотке крови (1:270). Имеются сообщения о выделении лизоцима из экстрактов многих органов человека и животных. Наибольшую активность лизоцим проявляет в отношении грам + микробов (стафилококки, стрептококки), меньшую – в отношении грам – бактерий (эшерихии, холерный вибрион, гонококки). При определенных условиях (повышении t⁰, изменении рН, добавлении ферментов и др.) действие лизоцима может усиливаться.

Есть данные о том, что лизоцим действует совместно с антителами и комплементом, влияет на активность комплексов антиген-антитело.

Содержание лизоцима в сыворотке крови человека связано с бактерицидной ее активностью. Неспособность или снижение способности лейкоцитов человека синтезировать лизоцим характеризует угнетение резистентности, наблюдаемое при ряде патологических состояний. Лизоцим в сыворотке крови определяется нефелометрическим способом, а также титрованием с M. lysodeicticus!

Пропердин.

Это высокомолекулярный (молекулярная масса 230000 дальтон) белок, обнаруживаемый в β -, γ-глобулиновой и других фракциях сыворотки крови. Он неоднороден по структуре, рассматривается как нормальное антитело, возникающее в результате естественной скрытой иммунизации субстанциями полисахаридной природы. Обладает способностью соединяться с полисахаридными структурами микробных клеток. В совокупности с другими гуморальными субстанциями и в присутствие ионов магния пропердин обеспечивает бактерицидные, гемолитические, вируснейтрализующие свойства сыворотки крови, является также медиатором иммунных реакций.

По мнению многих специалистов определение пропердина – один из наиболее достоверных тестов, характеризующих неспецифическую резистентность организма.

Содержание пропердина уменьшается при патологических состояниях, сопровождающихся ослаблением резистентности организма (острая кровопотеря, шок, тяжелые ожоги, заболевания крови, хронические инфекции).

Β-лизины – термостабильные (разрушаются при 65-70 ⁰С) бактерицидные факторы, проявляющие наибольшую активность в отношении анаэробов и спорообразующих аэробов. Они обнаруживаются в сыворотке крови после образования сгустка цельной крови. Возможно, что В-лизины выделяются тромбоцитами в процессе свертывания крови. Их можно получить из сывороток крови животных, естественно резистентных к определенному микробу. Их содержание снижается при заболеваниях инфекционных с затяжным течением и заболеваниях, сопровождающихся угнетением иммуноактивности. И содержание определяют нефелометрическим методом.

Лейкины.

Это термостабильные фракции, выделяемые при распаде лейкоцитов (при распаде тромбоцитов образуются аналогичные вещества, называемые плакинами). Они способны инактивировать стафилококки и другие грам + микробы.

Другие гуморальные факторы:

1. Трансферрин – конкурирует с микроорганизмами за необходимые для них метаболиты, без которых возбудители не могут размножаться.

2. Фибронектин – вместе с антителами взаимодействует с поверхностью микроорганизмов, способствуя их фагоцитозу, играя роль опсонинов.

Перечисленные выше антимикробные факторы, присутствующие в сыворотке крови, в совокупности определяют очень важное свойство – бактерицидность в отношении многих микробов.

Наиболее важную роль в этом, вероятно, играет система комплемента, поскольку инактивация его нагреванием сывороток до 56 ⁰С резко снижает их бактерицидность. Бактерицидную активность сывороток крови определяют по количеству колоний тест - культуры, выросших на чашке Петри с агаром при посеве микробной взвеси до и после, ее контакта с испытуемой сывороткой, а также нефелометрическим методом.