48. Распределительная жидкостная хроматография.

В распределительной или жидкость-жидкостной хроматографии разделение компонентов анализируемой пробы обусловлено различиями в коэффициентах их распределения между двумя не смешивающимися между собой жидкими фазами, одна из которых неподвижная и находится на поверхности или в порах твердого неподвижного носителя, а вторая — подвижная.

По характеру сил взаимодействия обусловливающих различное распределение между двумя фазами веществ, отличающихся своим химическим строением, распределительная хроматография лодобна адсорбционной, т. е. и здесь разделение основано на различии в силах межмолекулярного взаимодействия компонентов анализируемой пробы с неподвижной и подвижной жидкими фазами.

В зависимости от техники выполнения распределительная хроматография, как и адсорбционная, может быть колоночной или плоСКОСТНОЙ (бумажной или тонкослойной)

В качестве тв. носителей используют вещества, индифферентные по отношению к подвижному растворителю и компонентам анализируемой пробы, но способные удерживать на поверхности и в порах Неподвижную фазу. В большинстве случаев в качестве носителей применяют полярные вещества (целлюлозу, силикагель, крахмал). На них наносят неподвижную фазу — полярный растворитель чаще всего воду или спирт. В качестве подвижных фаз в этом случае используют менее полярные или неполярные вещества (спирты, амины, кетоны, углеводороды и др.). Такой вариант распределительной хроматографии называется нормально-фазовым Он применяется для разделения полярных веществ.

Второй вариант распределительной хроматографии отличается тем, что в качестве не подвижной твердой фазы используют неполярные носители (резину, фторопласт, гидрофобизированый силикагель), в качестве неподвижной жидкой фазы — неполярные растворители (углеводородый), а в качестве подвижной жидкой фазы — полярные растворители (спирты, альдегиды, кетоны и др., часто воду). Этот вариант распределительной хроматографии называется обращено-фазовой и используется для разделения неполярных веществ.

Для достижения оптимального разделения компонентов анализируемой пробы очень важное значение имеет подбор подвижной фазы. Растворители (подвижные и неподвижные Жидкие фазы) должны подбираться так, чтобы коэффициенты распределения компонентов смеси различались Достаточно существенно, к жидким фазам предъявляются следующие требования:

1) используемые растворители должны хорошо растворять разделяемые вещества, причем их растворимость в неподвижной фазе должна быть больше, чем в подвижной;

2) растворители, применяемые в качестве ПОДВИЖНОЙ и неподвижной фаз, должны быть взаимонасыщаемы т. е. состав растворителя должен быть постоянным во время прохождения через колонку;

З) взаимодействие растворителей, используемых в качестве подвижной фазы, с неподвижной фазой должно быть минимальным.

Чаще всего в распределительной жидкостной хроматографии в качестве подвижных жидких фаз применяют не индивидуальные вещества, а их смеси в различных соотношениях. Это позволяет регулировать полярность подвижной фазы, изменять соотношение полярностей подвижной и неподвижной фаз и добиваться оптимальных условий разделения компонентов конкретной анализируемой смеси.

Существенным недостатком этого хроматографического метода является достаточно быстрое смывание нанесенной неподвижной жидкой фазы с носителя. для его устранения растворитель, используемый в качестве подвижной фазы, насыщают веществом, применяемым в качестве неподвижной жидкой фазы, или стабилизируют неподвижную жидкую фазу прививкой ее к носителю.