2.2. Паразитология и инвазионные болезни животных

Задание 1. Исследовать фекалии методом нативного мазка

Цель: Показать навыки исследования фекалий методом нативного мазка.

Материал и оборудование: фекалии (жвачных или свиней)10г, предметные стекла, стеклянная палочка, микроскоп, флакон с раствором глицерин+вода 1:1.

Методика выполнения: небольшой кусочек фекалий взятый палочкой помещаем на предметное стекло, добавляем 2-3 капли раствора глицерин с водой в соотношении 1:1, перемешиваем и следуем под микроскопом. При высокой интенсивности инвазии можно обнаружить яйца гельминтов. От одного животного необходимо исследовать 2-3 мазка. Этим методом можно исследовать фекалии на фасциолез, аскаридоз, трихоцефалез, стронгилидозы и другие гельминтозы.

Задание 2. Исследовать фекалии методом Фюллеборна

Цель: Показать навыки проведения гельминтокопрологических исследований методом Фюллеборна.

Материал и оборудование: фекалии (жвачных или свиней)10г, предметные стекла, 2-а стаканчика, микроскоп, сито, ложечка, гельминтологическая петля, насыщенный раствор поваренной соли 100 мл.

Методика выполнения: 5 г фекалий помещаем в стаканчик и заливаем небольшим количеством раствора поваренной соли. После тщательного растирания фекалий, доливаем раствор до 100 мл и процеживаем через сито в чистый стакан. Взвесь отстаивают 20 минут, затем с поверхности отстоявшейся жидкости с помощью металлической петли, согнутой под углом 90º и диаметром 0,8 см, снимаем пленку. Переносим ее на предметное стекло и микроскопируем. Лучше исследовать 3 капли. Этим методом можно обнаружить яйца нематод и цестод.

Тяжелые яйца трематод, некоторых цестод и неоплодотворенные яйца аскарид всплывают плохо, поэтому нужно исследовать препараты, приготовленные из осадка. Для этого жидкость сливают и со дна берут проволочной петлей или пипеткой несколько капель на предметное стекло и исследуют под микроскопом. Этим методом можно обнаружить яйца нематод и цестод.

Яйца цестод построены различно. У представителей отряда лентецов они по форме сходны с яйцами трематод (овальной формы, желтого цвета из-за наличия желтовато-коричневой протеиновой оболочки. У большинства видов яйца имеют крышечку). Яйца цепней довольно однообразны по своей морфологии, так что по их строению определить видовую принадлежность не представляет возможным. Зрелые яйца овальной формы, покрыты чрезвычайно нежной, прозрачной скорлупой, сквозь которую хорошо просвечивает находящаяся внутри онкосфера. Последняя, состоит из толстой радиально исчерченной оболочки (эмбриофор), внутри которой располагается зародыш, имеющий шесть эмбриональных крючочков, окруженный собственной, плотно его облегающей оболочкой. Онкосферы чаще бесцветные, реже окрашены в желтый и желто-коричневый цвет. Оболочка яйца быстро разрушается, и при исследовании фекалий обнаруживаются онкосферы.

Яйца нематод весьма разнообразны по своей форме, величине, строению и окраске. Размеры яиц колеблются в пределах сотых и десятых долей миллиметра. Оболочка яйца снаружи может быть окрашена в коричневый, желтый или иной цвет. У некоторых видов нематод на одном из полюсов имеется подобие крышечки (оксиуриды) или пробочки на обоих полюсах (у трихоцефалят), у некоторых видов аскаридат скорлупа ячеистого строения.

Задание 3. Исследовать фекалии методом А.Г. Котельникова и В.М. Хренова

Цель: Показать навыки владения техникой исследования фекалий по методу Котельникова и Хренова.

Материал и оборудование: фекалии (жвачных или плотоядных)10г, предметные стекла, 2-а стаканчика, микроскоп, сито, ложечка, гельминтологическая петля, раствор азотнокислого свинца 50 мл.

Методика выполнения: пробу фекалий помещают в стаканчик, заливают небольшим количеством раствора и при тщательном размешивании добавляют порциями раствор до 50 мл. Затем взвесь фильтруют через сито в другой стаканчик и оставляют отстаиваться на 10 минут. После этого гельминтологической петлей снимают поверхностную пленку, переносят на предметное стекло и микроскопируют при малом увеличении микроскопа.

Задание 4. Исследовать фекалии методом Дарлинга

Цель: Показать навыки владения методом Дарлинга.

Материал и оборудование: фекалии (жвачных или свиней)10г, предметные стекла, 2-а стаканчика, микроскоп, сито, ложечка, гельминтологическая петля, центрифуга, жидкость Дарлинга 50 мл.

Методика выполнения: фекалии смешивают с водой до полужидкой консистенции, процеживают через сито в пробирку, а затем центрифугируют 3-5 минут. Жидкость из пробирки сливают, а к осадку добавляют жидкость Дарлинга. Осадок размешивают и снова центрифугируют 3-5 минут, после чего яйца гельминтов всплывают в поверхностный слой. Гельминтологической петлей снимают поверхностную пленку, переносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом.

Задание 5. Исследовать фекалии методом Щербовича

Цель: Показать навыки владения техникой исследования фекалий по методу Щербовича.

Материал и оборудование: фекалии (жвачных или свиней)10г, предметные стекла, 2-а стаканчика, микроскоп, сито, ложечка, гельминтологическая петля, центрифуга, раствор сернокислого магния 50 мл.

Методика выполнения: фекалии смешивают с водой до получения равномерной взвеси. Затем эту взвесь процеживают через сито в пробирку и центрифугируют 1-2 минуты после этого верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют раствор сернокислого магния. Взвесь снова центрифугируют 1-2 минуты, после гельминтологической петлей снимают поверхностную пленку и исследуют под микроскопом на предметном стекле.

Задание 6. Исследовать фекалии методом последовательных сливов по Н.В. Демидову

Цель: Показать навыки владения техникой исследования фекалий по методу Н.В. Демидова.

Материал и оборудование: фекалии (жвачных) 10г, 2-а стакана, сито, ложечка, стеклянная палочка, чашка Петри, микроскоп, водопроводная вода, предметные стекла.

Методика выполнения: фекалии размешивают в стакане с водой, взвесь фильтруют через сито в чисты стакан и отстаивают 5 минут. Затем верхний слой сливают, а к осадку вновь добавляют воды, размешивают, отстаивают до 5 минут сливают верхний слой воды. Процедуру последовательных промываний повторяют 4-5 раз до полного просветления жидкости над осадком. Затем надосадочный слой жидкости сливают, а осадок посматривают на предметных стеклах или в чашке Петри под микроскопом при малом увеличении. Метод применяют при исследовании фекалий на фасциолез и дикроцелиоз.

Яйца фасциолы овальной формы, светло желтого или желто-коричневого цвета. Оболочка гладкая. На одном полюсе яйца плоская крышечка, на противоположном небольшой слабо заметный бугорок. Содержимое яйца состоит из яйцевой клетки, окруженной массой желточных клеток. Яйца дикроцелий мелкие, темно-бурого цвета, с толстой оболочкой. Они ассиметричны, содержат мирацидий, на одном из полюсов располагается крышечка.

Задание 7. Провести гельминтологическое вскрытие печени жвачных на наличие трематод.

Цель: Показать навыки владения техникой вскрытия печени животных для обнаружения трематод.

Материал и оборудование: печень от крупного рогатого скота, кювета, нож, ножницы, скальпель, пинцет хирургический, белая кювета, вода водопроводная, лупа.

Методика выполнения: печень помещаем в кювету, осматриваем обращая внимание на желчные ходы и пузырь. Делаем разрезы по ходу желчных протоков, отмечаем их содержимое и состояние стенок. Кусочки пораженной печени раздавливаем пальцами и промываем в белой кювете водой. Осадок просматриваем невооруженным глазом или под лупой. Половозрелых фасциол можно обнаружить в желчных ходах не прибегая к промыванию, а дикроцелий увидим в мазках с желчных ходов или после промывания в кювете. При фасциолезе желчные протоки расширены, заполнены желчью густой консистенции, грязно-коричневого цвета. В них легко увидеть большое количество фасциол. Инвазия дикроцелиями - также отмечают расширение желчных протоков. Они плотные имеют вид белых тяжей, заполненных полужидкой коричневато-зеленоватой массой, содержащей множество паразитов. На капсуле и под капсулой виден неправильный сетчатый рисунок, складывающийся из множества тонких синевато-серых тяжиков. В желчном пузыре густая желчь и большое количество паразитов. При интенсивной инвазии число трематод, локализующихся в печени, достигает нескольких тысяч.

Задание 8. Исследование рыбы на наличие личинок (плероцеркоидов) дифиллоботриоза

Цель: Показать навыки владения техникой исследования рыбы на наличие личинок лентеца широкого.

Материал и оборудование: рыба (окунь, налим), кювета, нож, скальпель, ножницы, пинцет хирургический, препаровальная игла, чашка Петри, лупа, вода 100мл, предметное стекло, микроскоп.

Методика выполнения: Сначала осматривают рыбу, лежащие под кожей паразиты просвечивают в виде белых узелков размером с конопляное зерно или продолговатых образований белого цвета. Кожу подрезают в стороне от узелка острием скальпеля; извлеченных плероцеркоидов помещают в чашку Петри с водой. После наружного осмотра рыбу вскрывают, делая надрезы вдоль спины и осматривают серозную оболочку в полости тела, через которую также бывают, заметны поверхностно лежащие плероцеркоиды. Они встречаются и во внутренних органах (печени, яичнике). Однако большая часть их находится в мышцах. Плероцеркоиды белого цвета, слегка морщинистые; при легком подогревании морщинистость сглаживается. На переднем конце тела имеются ботрии, видимые при малом увеличении микроскопа.