VIII. Другие способы расправления и наклеивание парафиновых срезов.

Существуют и другие способы расправления и наклеивания срезов.

Методика наклеивания парафиновых срезов сухим способом. Этим методом пользуются обычно в тех случаях, когда необходимо предохранить парафиновые срезы от соприкосновения с водой, как, например, при окраске гликогена по методу Беста.

Парафиновые срезы аккуратно переносят с микротомного ножа на смазанные белком с глицерином предметные стекла, кладут, как обычно, блестящей стороной и осторожно расправляют, пользуясь кисточкой и препаровальной иглой. Расправленный срез тщательно разглаживают мягкой кисточкой, стараясь, по возможности, убрать все складки, а затем сильно прижимают к стеклу в несколько раз сложенной фильтровальной бумагой, которую иногда смачивают 96° спиртом. Обращают внимание на то, чтобы под срезом не было пузырьков воздуха. После этого осторожно подогревают (до 45— 50°) над пламенем спиртовки, не доводя парафин до расплавления. Приклеенные таким образом срезы можно сразу, без специального высушивания, подвергать дальнейшей обработке. Недостатком этого метода является то, что тонкие срезы легко повреждаются и трудно расправляются.

Методика наклеивания парафиновых срезов с подогретым креп­ким спиртом. Учитывая значительные трудности сухого метода наклейки парафиновых срезов, можно предложить более удобный влажный способ, но с заменой теплой воды 60—70—80° спиртом, подогретым до 45—50°. Парафиновые срезы либо сразу собирают в теплый спирт, либо чашку с холодным спиртом и плавающими в ней срезами помещают в термостат (температура 45—50°) и оставля­ют в нем до момента расправления срезов. Чашка со спиртом должна быть прикрыта крышкой. Нельзя пользоваться для собирания парафиновых срезов 90—96° спиртом, ибо в нем они легко тонут. Расправленные срезы вылавливают на предметные стекла, смазан­ные белком с глицерином, дают стечь спирту, отжимают сложенной в 3—4 слоя фильтровальной бумагой и высушивают в термостате при 37—40°.

Методика наклеивания парафиновых срезов без белково – глицеринового слоя.

В таких случаях, когда нежелательно наличие белково – глицеринового слоя, срезы можно наклеивать с помощью дистиллированной воды или 30% спирта. При этом способе предметные стёкла должны быть обезжирены особенно тщательно, так как в противном случае вода неравномерно распределится по стеклу и срез плохо приклеиться. Чтобы вода не растекалась по стеклу можно сделать парафиновую окантовку (очертить на стекле куском парафина место приклеивания срезов).

Способ наклеивания довольно прост: на стекло наносят воду (или 30% спирт) и на неё кладут срезы блестящей стороной книзу; затем нагревают, расправляют, удаляют воду и сушат, как описано выше.

XI. Маркировка предметных стекол.

Маркировка стёкол обычно следует за резанием блоков. Для этого при наклеивании срезов на стекло один конец стекла оставляют свободным. Надпись на стекло можно наносить с помощью алмазного отметчика, или это делается тушью. Так как тушь размывается и стирается, следует её наносить на смазанный белком и высушенный конец стекла. Затем этот конец нагревают над спиртовкой. Надпись при этом фиксируется и в дальнейшем не стирается. Но чаще всего, в последнее время, надписи на предметном стекле делают маркером.