VI. Основные способы расправления и наклеивания парафиновых срезов на стёкла, смазанные белком с глицерином.

Существует два основных способы расправления и наклеивание срезов на смазанные белком с глицерином стекла:

1. Наклеивание расправленных свободноплавающих срезов;

2. Наклеивание срезов, перенесенных с ножа непосредственно на предметные стекла, влажным способом.

В первом случае срезы переносят с ножа для расправления в теплую (35 - 40⁰) дистиллированную воду (свободноплавающие срезы). Затем вылавливают из воды на смазанное белком с глицерином предметное стекло, подводя стекло в наклоном положении под плавающие срезы, подхватывая их кисточкой или препаровальной иглой.

Затем удаляют излишнюю воду, наклонив стекло и осторожно придерживая срезы за парафиновую каёмку. Фильтровальной бумагой или тряпочкой удаляют воду вокруг среза (прикладывать бумагу к срезу не рекомендуется во избежание повреждения), но в некоторых случаях срезы проглаживают пальцем через 2-3 слоя сухой гладкой фильтровальной бумаги.

Срезы следует располагать несколько эксцентрично, чтобы один конец предметного стекла был свободен для нанесения обозначений.

При использовании другого способа расправления и наклеивания срезов на смазанное белком с глицерином предметное стекло наносят несколько капель дистиллированной воды, в которую прямо с микротомного ножа переносят срезы. Затем стекло осторожно прогревают над спиртовкой до полного расправления срезов. При этом следует избегать перегревания, так как расплавление парафина приводит к повреждению материала.

При определенном навыке степень нагрева довольно легко определить, прикладываю нижнюю поверхность стекла к тыльной поверхности кисти (температура стекла не должна вызывать ощущения жжения).

Вместо спиртовки для расправления парафиновых срезов можно использовать специальный электрический прибор «Приспособление для сушки и расправления парафиновых срезов», представляющий собой подогреваемый до нужной температуры столик.

На покрытые белком с глицерином стекла наносят несколько капель дистиллированной воды, кладут на столик. Сделанные срезы кисточкой переносят на стекла. После их расправления удаляют излишнюю воду, вновь кладут стекла на столик до высыхания, после чего стекла со срезами перекладывают на стол и защищают от пыли до окраски.

Так как парафиновые срезы при наклейке вбирают воду, то во избежание недоразумений при дальнейшей обработке необходимо их тщательно просушить.

VII. Сушка парафиновых срезов.

Стекла с наклеенными срезами кладут на планшеты и помещают в термостат или сушильный шкаф с температурой 37⁰ на 24 часа, где и происходит окончательное высушивание и приклеивание срезов. Можно высушивать и при комнатной температуре, предохраняя при этом срезы от запыления, но тогда лучше выдерживать их 48 часов.

Не достаточно высушенные срезы легко отклеиваются во время окраски, а главное, плохо освобождаются от парафина при обработке ксилолом. Критерием хорошо высушенных срезов является приобретение ими большей прозрачности по сравнению с беловатыми плохо просушенными срезами.

Если приходится торопиться с окраской, то рекомендуется свежеприклеенные и немного подсохшие (на воздухе или в термостате) срезы слегка подогревать над пламенем спиртовки, осторожно доводя парафин до признаков начального плавления, но не полного расплавления. Такая обработка способствует более прочной фиксации срезов на предметном стекле.