Алгоритм определения на спектрофотометре

1. Включите спектрофотометр «Solar» в сеть.

2. Внимательно прочитайте инструкцию.

3. Установите заданную длину волны.

4. Обнулите контрольный раствор.

5. Установите в кюветное отделение кюветы с исследуемым образцом (использовать надосадочные растворы с лабораторной работы № 1). Крышку закрыть. Нажать кнопку «А». Через 1-2 секунды на табло отобразиться измеренная величина оптической плотности.

6. Прибор выключить согласно инструкции.

Оформите результаты. Сделайте вывод.

Техника работы с прибором – спектрофотометр «Solar».

Подготовка прибора к работе.

1. Установить заданную длину волны, для этого последовательно нажать кнопки «F» и «λ». Загорится индикатор режима работы «λ». В левой части цифрового табло отобразится значение длины волны, на которую установлен в данный момент прибор. Например: 325 __________. Прибор прогреть в течение 20-30 минут.

2. Набрать с помощью клавиатуры требуемую длину волны в диапазоне от 325 до 999 нм.

3. Нажать кнопку «ENTER». Табло погаснет, и через 1…6 сек, в левой части табло появится заданная длина волны. Раздастся продолжительный звуковой сигнал. Прибор установлен на заданную длину волны.

Определение оптической плотности исследуемого образца.

1. Поместить в кюветное отделение кювету с холостым раствором и нажимаем кнопку «ZERO». Произойдет измерение сигнала, соответствующего базовой величине оптической плотности равной 0,000 единиц.

2. Кювету с холостым раствором убираем и ставим кювету с опытным раствором, нажимаем кнопку «А», на табло отобразится значение оптической плотности исследуемого раствора.

Выключение прибора осуществляется нажатием кнопок «F» и «λ». Затем выключить прибор из сети.

Построение калибровочного графика.

Одним из наиболее часто встречаемых способов расчета (оценки) результатов исследований является расчет по калибровочному графику. Калибровочный график строится для методик со стабильными условиями работы в лаборатории и хорошим подчинениям результатов измерений основному закону фотометрии (Ламберта-Бера). Для каждого вида исследований строят свой график, при этом недопустим перенос калибровочного графика одного фотометра на другой. Калибровочные графики строятся не реже одного раза в 6-12 месяцев.

Для определения концентрации вещества в растворе или взвеси необходимо построить калибровочную кривую. Для этого на оси абсцисс откладывают различные концентрации растворов исследуемого вещества, а на оси ординат - показания красной шкалы фотометра - экстинкцию. Готовят несколько растворов данного вещества различной концентрации и определяют их экстинкцию. Из точек на горизонтальной оси, соответствующих приготовленным концентрациям, восстанавливают перпендикуляры. Из точек на вертикальной оси, соответствующих полученным показателям экстинкции, проводят горизонтали до пересечения их с перпендикулярами. В местах пересечения этих линий получают ряд точек и соединяют их. Если растворы были подготовлены точно, то построенная линия близка к прямой. В дальнейшем, получая показатель экстинкции, находят соответствующую ему точку на вертикальной оси и проводят горизонталь до пересечения с кривой. Из этой точки опускают перпендикуляр на горизонтальную ось, по которой и определяют концентрацию вещества, соответствующую данной экстинкции.

Для каждого вещества строят свой график. При этом следует пользоваться кюветой одной и той же рабочей длины и определение проводить с одним и тем же светофильтром. Калибровочную кривую нужно периодически проверять, так как чувствительность фотоэлемента со временем несколько снижается. Можно составить таблицу, где указать, какое количество вещества соответствует каждому полученному показателю экстинкции.