Вопрос 9
Сосуд для хранения и транспортировки питательных сред МЛ-100.
Система терморегуляции обеспечивает плавное регулирование и поддержание температуры в диапазоне от 20 до 60° С, с точностью ±5° С. Число оборотов мешалки — от 50 до 1500± ±10% об/мин. Масса прибора — 65 кг. Шведской фирмой «Biotec» выпускаются сосуды для хранения и транспортировки питательных сред. Серия аппаратов МЛ (MJI-075, общий объем— 90 л, МЛ-100, объем — 160 л, МЛ-150, Ряд зарубежных фирм выпускает комплекты ферментационного оборудования, которые оснащены устройствами и приборами, обеспечивающими автоматическое регулирование основных параметров процесса культивирования микроорганизмов. В качестве примера такого устройства может быть приведена контрольная панель ЛП-300 с ферментером (рис. 48) шведской фирмы
Контрольная панель ЛП-300 с ферментером.
Панель обеспечивает контроль и поддержание в заданных пределах скорости перемешивания питательной среды, температуры и подачи газа, дозирования компонентов питательной среды. Противопенные препараты вводятся с помощью перистальтического насоса, который автоматически включается, если пенный пробоотборник определяет наличие пены. Наибольшее распространение получили на международном рынке установки «Biotec», которые выпускаются в нескольких модификациях с ферментерами емкостью 1,3, 10 и 15 л [26]. Набор из отдельных функциональных блоков обеспечивает термостатирование, рН-статирование, химическое пеногашение, аэрацию и возможность ведения непрерывных процессов.
Ферментер ФЛ-110.
Ферментеры изготовлены из пирексового стекла. Дно и крышка ферментера выполнены из нержавеющей стали. Лабораторные ферментеры установлены на металлических ножках, что облегчает снятие дна и крышки ферментера и дает возможность присоединять к штуцерам, вмонтированным в дно прибора, датчиков различных приборов (рН-метра, измерителя оптической плотности, газоанализатора и др.), а также для введения добавок, титрующих агентов, пеногасителей. Ферментер типа ФМ-100, выпускаемый фирмой «Biotec», является передвижной моделью и предназначается для ферментирования непатогенных бактерий. Ферментер состоит из собственно ферментера ФМ-100 с общим объемом около 150 л, с встроенным в дно устройством для перемешивания, и систем контроля температуры, подачи воздуха и стерилизации. Система подачи воздуха оборудована измерителем скорости подачи воздуха и фильтром для его очистки.
Многодисковое устройство для получения тканевых культур.
Роллерные установки предназначены для культивирования тканевых культур при вирусологических исследованиях на внутренних стенках цилиндрических сосудов при вращении их на подвижных валиках (роликах) с различными скоростями. В этих условиях происходит орошение культуры, прикрепленной на внутренней стенке сосуда, а вместе с тем и более оптимальная аэрация, что способствует более эффективному размножению вируса.
Вопрос 10
ПОСЕВ МИКРООРГАНИЗМОВ, один из основных приемов микробиологически техники, с помощью которого осуществляется выделение микроорганизмов из их естественной среды обитания, получение чистых культур, поддержание культур в активном состоянии, изучение их физиолого-биохимических свойств.
Материалом для посева могут служить культуры микроорганизмов, пересеваемые из жидких и плотных сред, различные природные субстраты. Жидкий материал для посева берут петлей или пипеткой. При взятии петлей жидкость должна образовать в кольце петли тонкую прозрачную пленку — "зеркало". Пипетками пользуются в случае, когда материал засевают в большом или точно отмеряемом объеме. Способ взятия плотного материала определяется его консистенцией. Для проведения посевов необходимы: подлежащий исследованию материал, питательные среды, стеклянный или металлич. шпатель, бактериологич. петли, иглы разного диаметра, пипетки, газовая или спиртовая горелка. Техника посева аэробов и анаэробов одинакова; различия заключаются в условиях содержания посевов, составе питательных сред и аппаратуре для инкубирования. Все манипуляции, связанные с взятием и посевом материала, производят над пламенем горелки. Края пробирки или флакона при вынимании пробки прожигают. Бактериальную петлю прокаливают на огне непосредственно перед взятием материала. Пробирки закрывают, предварительно профламбировав их края и ту часть пробки, которая входит в горлышко пробирки. На чашках Петри со стороны дна, на пробирках в верхней трети указывают номер анализа и дату. При посеве в жидкую питательную среду петлю с находящимся на ней материалом погружают в эту среду. Если материал вязкий и с петли не снимается, его растирают на стенке сосуда, а затем смывают жидкой средой. Жидкий материал, набираемый в пипетку, вливают в питательную среду. Посев на плотную питательную среду осуществляют петлей и шпателем. Посев петлей на среду в чашки Петри. Небольшое количество исследуемого материала вносят бактериальной петлей на поверхность питательной среды у края чашки и штрихом растирают внесенный материал. При необходимости штрихи проводят по секторам, предварительно разделив дно чашки на 4,8 или 16 равных частей. Чтобы удлинить общую линию посева, штрихи располагают как можно ближе друг к другу. При посеве на скошенный суслоагар петлю с находящимся на ней материалом вводят в пробирку до дна и скользящим движением делают штрихи на поверхности от стенки к стенке снизу вверх. Посев на плотную среду шпателем. Исследуемый материал наносят петлей или пипеткой и растирают по поверхности агаровой пластины. В зависимости от количества нанесенного материала и его инфицированности получают сплошной рост микроорганизмов, газонный или в виде отдельных колоний.
Питательные среды — субстраты, используемые в лабораторной практике для выращивания микроорганизмов и других биологических объектов. Рост микроорганизмов зависит от наличия в питательной среде достаточного количества органических и неорганических веществ в виде различных солей, витаминов и др. Питательные среды должны обладать также оптимальными физико-химическими свойствами: рН, вязкостью, влажностью, осмотическими свойствами.