Вопрос 6
Окраска спор Вследствие непроницаемости оболочки споры не воспринимают окрашивания. Однако при воздействии соляной кислоты оболочка теряет устойчивость, и поэтому краска проникает в споры. Окраска по способу Ожешко. Приготовленный на краю предметного стекла препарат просушивают и, не фиксируя, погружают для протравы на 2—3 минуты в чашку с 1 % кипящей соляной кислотой. После этого мазок промывают водой, обсушивают, фиксируют на пламени и красят карболовым фуксином через фильтровальную бумажку с подогреванием. Остывший освобожденный от бумажки препарат обесцвечивают 5% серной кислотой, смывают водой и докрашивают дополнительной метиленовой синькой в течение 3—5 минут, затем смывают водой и высушивают. Споры принимают ярко-красный цвет фуксина. Вегетативное тело бактерии, обесцвеченной серной кислотой, окрашивается дополнительной краской в синий цвет. Окраска по способу Пешкова. М. А. Пешков предложил окрашивать споры синькой Леффлера, причем для изменения устойчивости оболочки он применяет кипячение. Окрашивание спор по этому способу производится так: 1. Приготовленный мазок фиксируют на пламени. 2. На фиксированный мазок наливают метиленовую синьку Леффлера и кипятят на пламени спиртовой горелки 15—20 секунд. 3. Остывший препарат смывают водой и докрашивают 0,5% водным раствором нейтралрот в течение 30 секунд. 4. Опять смывают дистиллированной водой и высушивают на воздухе. Споры окрашиваются в голубой либо в синий цвет. Протоплазма вегетативного тела бактерии — розовая. Окраска капсул. Каплю воды, опущенную на предметное стекло, смешивают с каплей черной туши и в полученную жидкость вносят петлей немного агаровой либо бульонной культуры. Ребром шлифованного стекла размазывают жидкость вдоль стекла и фиксируют на пламени или в концентрированном растворе сулемы 1 минуту. Промывают водой, окрашивают карболфуксином или метиленовой синькой 5—10 минут, затем смывают водой, высушивают на воздухе и препарат исследуют в микроскоп. Вокруг окрашенного тела бактерий выделяются резко очерченные тушью капсулы.
Вопрос 7
Приготавливают негативно окрашенный по методу Бурри препарат.
Фиксируют любым химическим способом: метиловым спиртом, смесью Никифорова или другими смесями.
Промывают водой.
Окрашивают карболовым фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3 – 5 мин.
Препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.
При микроскопировании на темном фоне препарата контрастно выделяются неокрашенные капсулы, внутри которых находятся бактерии ярко-малинового цвета.
Вопрос 8
Уничтожение микроорганизмов - один из необходимых элементов микробиологической работы и основа консервирования пищевых продуктов; поэтому стоит остановиться на нем подробнее. Освобождение какого-либо материала от живых микроорганизмов или их покоящихся форм называютобеспложиванием или стерилизацией. От стерилизации следует отличать частичное обеспложивание (пастеризацию), а также консервирование. Если стерильная среда или микробная культура загрязняется случайно попавшими в нее микроорганизмами, то говорят о контаминации, илизагрязнении. Такие понятия, как дезинфекция (уничтожение всех патогенных микроорганизмов),асептика и антисептика, а также инфекция, употребляются главным образом в гигиене, а не в микробиологии.