Физико-химические свойства

Дубильные вещества представляют собой, как правило, аморф­ные соединения, образующие при растворении в воде коллоидные растворы. Растворимы во многих органических растворителях (аце­тон, этанол, этилацетат, пиридин). Нерастворимы в хлороформе, бен­золе, петролейном эфире. Многие дубильные вещества оптически ак­тивны, обладают вяжущим вкусом. Легко окисляются на воздухе, приобретая красно-бурую окраску.

Как и многие другие фенольные соединения, дубильные вещест­ва образуют окрашенные комплексы с солями тяжелых металлов.

Выделение и идентификация дубильных веществ

Выделение дубильных веществ из растительного сырья проводят фракционно, используя различные органические растворители.

Для удаления основной массы хлорофилла и веществ липофиль-ного характера растительный материал обрабатывают петролейным эфиром, бензолом или другими органическими растворителями, а за­тем дубильные вещества извлекают последовательно этиловым эфи­ром, этилацетатом, этиловым спиртом.

Иногда для получения суммы дубильных веществ растительное сырье вначале экстрагируют горячей водой, а затем водный экстракт обрабатывают последовательно вышеуказанными растворителями.

Также, как и в случае других фенольных соединений дубильные вещества осаждают из экстрактов солями свинца с дальнейшей их очисткой от сопутствующих веществ.

Полученные суммы дубильных веществ с помощью хроматогра-фических методов разделяют на индивидуальные компоненты.

Качественное определение

Качественные реакции, позволяющие обнаружить дубильные ве­щества в растительном сырье (водное извлечение) подразделяют на реакции осаждения и цветные реакции.

1. При добавлении к водному извлечению по каплям 1% раствора желатина появляется помутнение или осадок, исчезающие при добав­лении избытка желатина.

2. При добавлении к водному извлечению 1% раствора гидрохло­рида хинина появляется аморфный осадок.

3. При кипячении водного извлечения с соляной кислотой и фор­мальдегидом выпадение осадка указывает на наличие конденсирован­ных дубильных веществ.

4. Для дубильных веществ характерна реакция с ванилином (в при­сутствии НС1 конц. или 70% H₂S0₄ развивается красное окрашивание).

5. К водному извлечению прибавляют кристаллики NaN0₂ и рас­твор 0,1 н НС1. При наличии гидролизуемых дубильных веществ по­является коричневое окрашивание

6. При добавлении к водному извлечению раствора железоаммо-нийных квасцов появление черно-синего окрашивания (или осадка) указывает на наличие гидролизуемых дубильных веществ, а черно-зеленого окрашивания на наличие конденсированных дубильных ве­ществ.

7. Конденсированные дубильные вещества выпадают в осадок при добавлении к водному извлечению бромной воды.

8. К водному извлечению добавляют уксусную кислоту и раствор средней соли ацетата свинца - гидролизуемые дубильные вещества выпадают в осадок.

Хроматографическое определение

Полученный этанольный экстракт наносят на стартовую линию хроматографической пластинки «Силуфол», помещают в хроматогра-фическую камеру в систему, указанную в нормативной документации. После хроматографирования хроматограмму просматривают в УФ-свете и отмечают характер флюоресценции зон адсорбции. Некоторые производные катехинов имеют слабую голубую флюоресценцию, усиливающуюся после обработки хроматограмм 1% ванилином в концентрированной соляной кислоте. Для отличия лейкоантоциани-динов от катехинов хроматограммы выдерживают в парах соляной кислоты с последующим нагреванием при 105°С в течение 2 минут, при этом леикоантоцианидины переходят в антоцианидины розового

или красно-фиолетового цвета, а катехины остаются бесцветными или желтеют.

Количественное определение

В литературе описано много способов количественного опреде­ления дубильных веществ, которые можно выделить в следующие ос­новные группы;

1. Гравиметрические - основанные на количественном осажде­нии дубильных веществ желатиной, солями тяжелых металлов или ад­сорбцией гольевым порошком.

В СНГ и за рубежом стандартным для технических целей являет­ся гравиметрический метод с применением гольевого порошка. Полу­ченное водное извлечение делят на 2 равные части. Одну часть извле­чения пропускают через колонку или фильтр с гольевым порошком (дубильные вещества адсорбируются гольевым порошком), промыва­ют колонку или фильтр дистиллированной водой. Раствор, прошед­ший через гольев порошок и промывную воду, помещают в выпари­тельную чашку (точно взвешенную) и упаривают. Затем высушивают в сушильном шкафу до постоянной массы. Вторую часть извлечения также упаривают и высушивают до постоянной массы, не пропуская через колонку. Разница в массе двух упаренных и высушенных до по­стоянной массы извлечений укажет на содержание дубильных ве­ществ.

2. Титриметрические - основанные на окислительных реакци­ях, прежде всего с перманганатом калия. В ГФ XI включена перман-ганатометрическая методика Левенталя-Нейбауера (1860 г.) в моди­фикации Курсанова (1941 г.), основанная на окислении фенольных ОН-групп перманганатом калия в присутствии индигосульфокислоты, которая является регулятором и индикатором реакции. После полного окисления дубильных веществ перманганатом калия, начинает окис­ляться индиго до изатина, в результате чего окраска раствора из синей переходит в золотисто-желтую.

ИНДИГОСУЛЬФОКИСЛОТА ИЗАТИН

(синий цвет) (золотисто-желтый цвет)

3. Фотоколориметрические - основанные на образовании окра­шенных растворов с солями окисного железа, фосфорновольфрамовой

кислотой и реактивом Фолина-Дениса (реактив на фенолы фосфорно-молибденовая и фосфорновольфрамовая кислоты — окрашивание).

4. Нефелометрические и хроматоспектрофотометрические

используются в основном в научных исследованиях.

Биологическое действие и применение

Дубильные вещества и содержащие их растения применяют в ос­новном в качестве вяжущих, противовоспалительных и кровоостанав­ливающих средств.

Вяжущее действие таннина и других вяжущих средств связано с их способностью вызывать осаждение белков с образованием плотных альбуминатов. При нанесении на слизистые оболочки или раневую поверхность они вызывают частичное свертывание белков слизи или раневого экссудата и приводят к образованию пленки, защищающей от раздражения чувствительные нервные окончания подлежащих тка­ней. Уменьшение при этом болевых ощущений, местное сужение со­судов, ограничение секреции, а также непосредственное уплотнение клеточных мембран приводит к уменьшению воспалительной реак­ции. На этом основано их медицинское применение в виде вяжущих средств, т.к. образующаяся на слизистых оболочках пленка препятст­вует дальнейшему воспалению. Нанесенные на раны они свертывают кровь и поэтому действуют как местное кровоостанавливающее сред­ство. Свойство образования пленки на языке обуславливает характер­ный вкус дубильных веществ.

Дубильные вещества применяются как вяжущее и бактерицидное средство при воспалениях слизистых оболочек рта и глотки в виде по­лоскания, при ожогах - в виде присыпки, при кровотечениях в виде примочек, а внутрь - при желудочно-кишечных расстройствах (поно­сах) и отравлениях тяжелыми металлами и растительными ядами (ал­калоидами, гликозидами).

Многими исследователями установлено противоопухолевое дей­ствие дубильных веществ. Особенно характерно это свойство для предшественников дубильных веществ — катехинов и лейкоантоциа-нидинов. В больших дозах таннины проявляют противоопухолевое действие, в средних - радиосенсибилизирующее, а в малых - проти­волучевое.

Дубильные вещества можно использовать как противоядие при отравлении гликозидами, алкалоидами и солями тяжелых металлов.