Методы выделения

Для выделения кумаринов из растительного сырья используют преимущественно органические растворители: этиловый спирт, хло­роформ, диэтиловый эфир и др.

Наиболее исчерпывающая экстракция кумаринов, как свободных так и гликозидов, достигается этиловым спиртом. Экстракция этиловым спиртом проводится как на холоду так и при нагревании. Получаемый при отгоне спирта густой экстракт чаще всего последовательно обраба­тывается хлороформом, диэтиловым эфиром, петролейным эфиром.

В дальнейшем, исходя из растительного материала, характера со­путствующих веществ, структуры самих кумаринов применяются раз­личные частные методы очистки и выделения индивидуальных ве­ществ. На них мы не будем останавливаться, а необходимо знать, что как для очистки кумаринов от сопутствующих веществ, так и для вы­деления индивидуальных соединений широко применяются хромато- графические методы, позволяющие легко и надежно достигнуть раз­деления кумаринов на индивидуальные вещества.

В качестве сорбента при хроматографировании кумаринов чаще всего используются окись алюминия и силикагель. Кумарины хорошо элюируются из колонки бензолом или смесью бензола с этилацетатом, а также другими растворителями в различных соотношениях.

Кумарины, содержащие фенольные или спиртовые гидроксиль-ные группы, сильнее адсорбируются на окиси алюминия. Адсорбци­онное сродство кумаринов по отношению к окиси алюминия усилива­ется с увеличением числа гидроксильных групп. Эти соединения элюируются большим объемом полярных растворителей, подобных спирту.

В тех случаях, когда в смеси находятся кумарины, обладающие одинаковым адсорбционным сродством по отношению к окиси алю­миния, приходится проводить многократное хроматографирование для их разделения.

С целью подбора наилучших условий разделения, неизвестной смеси кумаринов следует проводить предварительное хроматографи­рование небольшого количества экстракта с предварительным его изучением методом бумажной или тонкослойной хроматографии, по­зволяющих быстро установить однородность иследуемых веществ и обнаружить даже незначительные их количества.

Хроматографическое определение

Для обнаружения кумаринов в растениях и сырье используются лактоновые свойства кумаринов, их способность флуоресцировать при ультрафиолетовом освещении и давать окрашенные растворысо специальными реактивами, микросублимацию и хроматографический анализ экстрактов сырья.

На пластинку "Силуфол" или хроматографическую бумагу на­ носят исследуемые экстракты и помещаюают в хроматографическую камеру с системой, указанной в НД на исследуемое сырье. Хрома- тограммы после высушивания просматривают в УФ-свете. Флуо­ ресцирующие пятна кумаринов отмечают простым карандашом и хроматограммы обрабатывают щелочью; После этого их высуши­ вают в сушильном шкафу при t=120°C и вновь просматривают в УФ-свете. Затем хроматограмму обрабатывают диазотированным сульфаниламидом, от действия которого кумарины в зависимости от структуры окрашиваются в оранжевый, красно-оранжевый, фио­ летовый цвета.

В некоторых случаях после просматривания хроматограммы в УФ-свете ее обрабатывают реактивом Драгендорфа (ВiI₃ в KI) или па-

рами иода. Кумарины проявляются в виде пятен, окрашенных в ко­ричневый цвет.