- •Белорусский государственный университет
- •История развития геномных исследований. Геномная революция конца хх века
- •2. Геномные проекты. Иерархический и шот-ган подходы. Фазы геномного проекта.
- •3. Современные методы картирования геномов
- •Библиотеки днк используемые при секвенировании геномов: их разновидности и способы создания.
- •5.Сложности расшифровки генома эукариот и пути их преодоления
- •6. Синтез днк in vitro: компонетны и продукты реакции, свойства днк-полимераз. Способы использования реакции полимеризации днк для определения нуклеотидных последовательностей.
- •7. Секвенирование днк по методу Сэнгера: возможности и ограничения
- •8. Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 2 поколения использующих реакцию пиросеквенирования
- •9.Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 2 поколения использующих днк полимеразную реакцию (секвенирование путём синтеза illumina)
- •10. Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 2 поколения использующих детекцию протонов (ion torrent)
- •11. Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 3 поколения
- •12. Аннотация геномных последовательностей: основные задачи и подходы к их решению.
- •13. Молекулярные базы данных. Специализация, структура и методы поиска информации
- •14. Функциональная геномика. Подходы к идентификации генов в геномных последовательностях и определение их функций
- •15. Возможности и ограничения компьютерного анализа при идентификации кодирующих и регуляторных последовательностей, а также для предсказания их возможных функций.
- •16. Транскриптомные и протеомные подходы к идентификации генов в геномных последовательностях и генома.
- •17. Эволюция геномов. Механизмы геномных перестроек, уменьшение и увеличение размеров геномов. Семейства гомологичных генов. Ортологи и паралоги. Псевдогены.
- •18 . Повторяющиеся последовательности в геномах про- и эукариот. Их роль в эволюции генома.
- •19. Классификация, строение, основные свойства и распространение мобильных генетических элементов эукариот.
- •20. Классификация, строение, основные свойства и распространение мобильных генетических элементов прокариот.
- •21. Вклад горизонтального переноса генов в эволюцию геномов про- и эукариот. Острова патогенности. Концепция пангенома.
- •22. Хромосомы про- и эукариот: форма, количество, структурные элементы, обеспечивающие стабильность и репликацию.
- •23. Структура генов у различных организмов: прерывистые и не прерывистые кодирующие последовательности, размеры и расположение регуляторных элементов.
- •24. Организация оперонов у про- и эукариот. Проблема экспрессии внутренних генов оперонов эукариот и молекулярный механизм её решения.
- •25. Концепция минимального генома. Природные минимальные геномы бактерий, архей, эукариот – их размер, число генов и особенности организации.
- •26. Характерные черты геномов прокариот.
- •27. Характерные черты геномов факультативных и облигатных патогенов. Взаимная адаптация геномов патогенна и его хозяина.
- •28. Разнообразие и характерные особенности геномов одноклеточных эукариот
- •29. Основные характеристики геномов грибов
- •30. Организация геномов нематод
- •31. Организация генома Drosophila melanogaster
- •32. Особенности организации геномов позвоночных животных
- •33. Сравнительная характеристика геномов Ноmо sарiепs и Рап troglodytes.
- •34. Отличительные черты геномов растений.
25. Концепция минимального генома. Природные минимальные геномы бактерий, архей, эукариот – их размер, число генов и особенности организации.
Определение минимального размера генома, обеспечивающего все необходимые функции, которые позволяют одноклеточному организму существовать в определенных экологических условиях, не является праздным вопросом. Решение этой проблемы необходимо для понимания происхождения жизни на Земле, а также путей и механизмов совместного эволюционирования генов, объединенных в конкретные геномы, а следовательно, и механизмов возникновения геномов как таковых
Геном кишечной палочки
Размер 4.6 млн н.п
Число генов, кодирующих белок 4300
Число генов, кодирующих РНК 116
deinococcus radiodurans
3 284 156 н.п в 4 репликонах
67 % ГЦ
91% кодирующей белок ДНК
Устойчивость к повреждению ДНК определяется : высоким содержанием ГЦ пар, присутствие генов для всех систем репарации ДНК,полиплоидностью ( 4-10 копий генома в клетке)
Самый маленький бактериальный геном у патогенна человека Mycoplasma genitalium
Размер 580 т.н.п
Число генов, кодирующих белки -470
Число генов, кодирующих РНК 43
Самый маленький геном архей –у патогенна другой археи Nanoarchaeum equitans
Размер 490 т.н.п
Число генов, кодирующих белки -552
Cредний размер гена 827 н.п
5% -некодирующей ДНК
Самый маленький бактериальный геном у Carsonella rudii, облигатного эндосимбионта листоблошки
Размер 159.662
213 генов ( 182 кодируют белки)
26. Характерные черты геномов прокариот.
Прокариоты – микроскопические одноклеточные организмы, с min морфологическим разнообразием
Основные свойства прокариот :
Компактность ( min некодирующей ДНК 5-10% ; в основном без интронов)
Высокая мобильность за сет горизонтального переноса
Геном представлен однокольцевой или линейной хромосомой размером 0.5 – 10 м н.п, могут иметь несколько кольцевых или линейных плазмид ( плазмиды отличаются от хромосомы тем, что она может быть утрачена без потери клеткой жизнеспособности)
Плазмиды имеют размер от нескольких тысяч до десятков тысяч нуклеотидных пар
Средний размер гена -1т.н.п
Обычное кол-во генов 3-5 тыс
Размер генома 2-5 млн н.п
Традиционно бактериальные геномы представляются в виде колец
Первые 2 кольца – ГЦ –перенос – показывает в какую сторону транскрибируется большинство генов и позволяет определить точку начала инициации и репликации , а так же точку терминации репликации
Формула для ГЦ переноса : (% Г пар -% Ц пар) / сумма % ГЦ пар показывает насколько богата ГЦ парами часть генома
Третье кольцо –ГЦ состав ( суть –показать фрагменты ДНК, которые имеют чужеродные происхождения)
САМЫЙ БОЛЬШОЙ ПРОКАРИОТИЧЕСКИЙ ГЕНОМ У SORANGIUM CELLULOSUM
Размер 13,033 779 н.п ( одна кольцевая хромосома )
Содержание ГЦ пар -71.38 %
Max размер гена 25.254 н.п
Средний размер гена 1206.05 н.п
Число генов , кодирующих белки -9.367
27. Характерные черты геномов факультативных и облигатных патогенов. Взаимная адаптация геномов патогенна и его хозяина.
Структура геномов факультативных и облигатных патогенов принципиально отличается
Характеристики |
Геном факультативного патогенна |
Облигатного патогенна |
Размер |
Большой ( более 5 млн н.п) |
Небольшой ( 0.5 -2 млн н.п) |
Метаболические возможности |
Разнообразные |
Ограниченные |
Число регуляторных генов |
Большое ( сотни) |
Маленькое ( единицы, десятки) |
Содержание ГЦ пар |
Высокое |
низкое |
Кол-во транспозонов |
Десятки , сотни |
Единицы |
