- •Белорусский государственный университет
- •История развития геномных исследований. Геномная революция конца хх века
- •2. Геномные проекты. Иерархический и шот-ган подходы. Фазы геномного проекта.
- •3. Современные методы картирования геномов
- •Библиотеки днк используемые при секвенировании геномов: их разновидности и способы создания.
- •5.Сложности расшифровки генома эукариот и пути их преодоления
- •6. Синтез днк in vitro: компонетны и продукты реакции, свойства днк-полимераз. Способы использования реакции полимеризации днк для определения нуклеотидных последовательностей.
- •7. Секвенирование днк по методу Сэнгера: возможности и ограничения
- •8. Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 2 поколения использующих реакцию пиросеквенирования
- •9.Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 2 поколения использующих днк полимеразную реакцию (секвенирование путём синтеза illumina)
- •10. Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 2 поколения использующих детекцию протонов (ion torrent)
- •11. Принцип действия, достоинства и недостатки геномных секвенаторов 3 поколения
- •12. Аннотация геномных последовательностей: основные задачи и подходы к их решению.
- •13. Молекулярные базы данных. Специализация, структура и методы поиска информации
- •14. Функциональная геномика. Подходы к идентификации генов в геномных последовательностях и определение их функций
- •15. Возможности и ограничения компьютерного анализа при идентификации кодирующих и регуляторных последовательностей, а также для предсказания их возможных функций.
- •16. Транскриптомные и протеомные подходы к идентификации генов в геномных последовательностях и генома.
- •17. Эволюция геномов. Механизмы геномных перестроек, уменьшение и увеличение размеров геномов. Семейства гомологичных генов. Ортологи и паралоги. Псевдогены.
- •18 . Повторяющиеся последовательности в геномах про- и эукариот. Их роль в эволюции генома.
- •19. Классификация, строение, основные свойства и распространение мобильных генетических элементов эукариот.
- •20. Классификация, строение, основные свойства и распространение мобильных генетических элементов прокариот.
- •21. Вклад горизонтального переноса генов в эволюцию геномов про- и эукариот. Острова патогенности. Концепция пангенома.
- •22. Хромосомы про- и эукариот: форма, количество, структурные элементы, обеспечивающие стабильность и репликацию.
- •23. Структура генов у различных организмов: прерывистые и не прерывистые кодирующие последовательности, размеры и расположение регуляторных элементов.
- •24. Организация оперонов у про- и эукариот. Проблема экспрессии внутренних генов оперонов эукариот и молекулярный механизм её решения.
- •25. Концепция минимального генома. Природные минимальные геномы бактерий, архей, эукариот – их размер, число генов и особенности организации.
- •26. Характерные черты геномов прокариот.
- •27. Характерные черты геномов факультативных и облигатных патогенов. Взаимная адаптация геномов патогенна и его хозяина.
- •28. Разнообразие и характерные особенности геномов одноклеточных эукариот
- •29. Основные характеристики геномов грибов
- •30. Организация геномов нематод
- •31. Организация генома Drosophila melanogaster
- •32. Особенности организации геномов позвоночных животных
- •33. Сравнительная характеристика геномов Ноmо sарiепs и Рап troglodytes.
- •34. Отличительные черты геномов растений.
19. Классификация, строение, основные свойства и распространение мобильных генетических элементов эукариот.
Стандартно, есть средняя часть, которая кодирует ген, содержащий необходимый для перемещения фермент - транспозазу. Центральная часть обычно ограничена набором повторов , чаще всего относительно длинные инвертированные повторы с прямыми поворотами по концам
Любой домен, который обеспечивает перемещение мгэ, разрезает ДНК в точке инсерции транспозона –ступенчато, размер ступеньки –разнообразный. У нас получаются липкие концы, затем к ним присоединяется транспозон , а бреши застраиваются стандартной системой репарации. Мы получаем дуплицированные последовательности липких концов.
Транспозон –молекула ДНК, которая стремится максимально размножиться, но есть ограничения со стороны бактериальной клетки на увеличение генома ( не хватает Э)
Бактериальные транспозоноы можно классифицировать по нескольким критериям :
собственно транспозоны ( в состав входят дополнительные гены)
IS –элементы ( в состав не входит ничего, кроме min набора генов, необходимого для транспозиции)
2 способ классификации :
Простые транспозоны
Составные ( составлены из простых мгэ , как правило это IS –элементы) –это искусственное образование может формироваться в любой момент
Транспозиция бывает
А) прямая ( перемещается сам транспозон)
Б) инвертированная ( перемещается часть плизмиды, которая ограничена IS –элементом)
в геном каждой бактерии входит около десятка IS –элементов. Они различаются по своему размеру, размеру инвертированных поворотов, размеру дупликации в точке инсерции ( обычно 9 пар)
Мобильные генетические элементы (МГЭ, подвижные элементы, транспозируемые элементы, транспозоны и т.д.)
20. Классификация, строение, основные свойства и распространение мобильных генетических элементов прокариот.
Интересно, что для ДНК эукариот характерно присутствие нескольких версий ДНК –транспозонов. В состав кажого транспозона входит несколько семейств:
Автономный -полноразменрый транспозон, который может перемещаться самостоятельно
Неавтономный – не может перемещаться самостоятельно, но т. к это делеционный вариант того же самого транспозона , то транспозаза распознает их концы –инвертированные повороты, и обеспечивает их перемещение
Ретротранспозоны – важнейший класс МГЭ , размножаются в такой степени, что занимают значительную часть генома. Механизм перемещения ретротранспозонов
Классический ретровирус ,при заражении кл-ки его ДНК , попадает в клетку, далее идет синтез кДНК копии, она становится 2цепочечной, и такая ДНК ретровируса встраивается в геномную ДНК клетки, затем идет транскрипция этой ДНК, синтез белков, упаковка вирусных частиц и цикл инфекции повторяется
Ретротранспозоны представлены РЕТРОВИРУСОМ и НЕРЕТРОВИРУСОМ
РЕТРОВИРУСЫ – имеют длинные концевые повторы, фермент , который участвует в перемещении – интеграза.НЕРЕТРОВИРУСЫ –нет повторов , фермент –нуклеаза
21. Вклад горизонтального переноса генов в эволюцию геномов про- и эукариот. Острова патогенности. Концепция пангенома.
Геномы прокариот подвержены быстрым изменениям в результате горизонтального переноса ДНК
Размер и структура генома близкородственных видов и даже штаммов одного вида бактверий могут существенно различаться в результате чрезвычайно активных процессов горизонтального переноса
Механизмы горизонтального переноса
Трансдукуия вирусами бактерий ( бактериофагами)
Коньюгация – перенос плазмид из одной клетки в другую
Трансформация – поглощение бактериальными клетками « свободной» ДНК
Динамичность генома энтеробактерий обусловлена большим набором « необязательных» компонентов, способных свободно перемещаться между геномами, занимающих одну нишу видов.Представители семейст Entereobacteriaceae имеют геномы размером около 5 млн. н.п , содержащие около 5 тыс генов.
Значительная часть генома входит в состав хромосомных островов патогенности или расположена в ДНК фагов или плазмид, набор которых сильно отличается даже у разных штаммов одного вида
Острова патогенности -интегрированная бактериофагом плазмида или фрагмент ДНК , ограниченный с 2 сторон транспозонами из встроенных геномов
Легкость горизонтального переноса и сильное эволюционное давление на минимализацию генома приводят к тому, что геном отдельной бактерии может не модержать весь набор генов , необходимый для нормального существования вида бактерий
Пангеном – совокупность всех генов одного вида бактерий, которые могут быть скомбинированы в геном одной клетки за счет механизмов горизонтального переноса.
