Дифференциально-диагностические признаки
Вид |
Температур- ные условия роста |
Гидро- лиз гип-пурата |
Образо-вание каталазы |
Образо-вание серово-дорода |
Восстанов-ление нитратов |
Чувстви- тельность к |
||
250С |
420С |
цефало-тину |
нали-дик-совой кислоте |
|||||
C. coli
|
-- |
+
|
-- |
+ |
± |
+ |
-- |
+ |
C. fetus
|
+ |
± |
-- |
+
|
-- |
-- |
+ |
-- |
C. jejuni
|
-- |
+ |
+ |
+ |
_ + |
+ |
-- |
+ |
C. lari
|
-- |
+ |
-- |
± |
+ |
+ |
+ |
-- |
Патогенных для человека бактерий рода Campylobacter
«+» - признак положительный; «-» - признак отрицательный; «±» признак может быть положительным, так и отрицательным.
Серодиагностика. Для идентификации Аг бактерий применяют РА с обработанной формалином культурой (через 10 суток после инфицирования титр Ат составляет 1:8 – 1:32) или РСК (видоспецифическая реакция, требующая соответствующего Аг). В России разработаны диагностикумы для выделения Ат в реакции РНГА, применяемые для распознавания кампилобактериозов животных и человека. За рубежом разработаны коммерческие реагенты для выявления Ат в РИФ или реакции иммунной сорбции Ат, меченных ферментами (ИФА), иммунный блотинг, иммуноэлектрофорез. Исследуют парные сыворотки,
взятые с интервалом 10-14 дней (чаще в РСК, РПГА, ИФА).
Все эти методы недостаточно надежны в плане диагностики кампилобактериозов.
Профилактика и лечение.
Вакцинопрофилактика не разработана.
В большинстве случаев заболевание заканчивается спонтанным излечением и необходимость в химиотерапии отсутствует.
К моменту установления диагноза большинство больных находится в стадии выздоровления.
Применять антибиотики (цефалоспорины, макролиды, тетрациклины) следует лишь в тяжелых случаях и при угрозе развития серьезных осложнений.
II Хеликобактеры
Таксономия
Первые штаммы так называемых «желудочных кампилобактеров» были выделены в Австралии (1982). Дальнейшие исследования, проведенные во многих странах, подтвердили роль этих бактерий в патогенезе рецидивирующих поражений желудка и двенадцатиперстной кишки.
Совершенствование методов изучения кампилобактеров показало необоснован-ность систематического положения «желудочных» кампилобактеров, и они были выделены в отдельный род Helicobacter, включающий H.pylori, H. fennelliae, H. сinaedi и H. mustelae. Первые три вида способны вызывать поражение у человека.
Морфология
Хеликобактеры – короткие, S-образную изогнутые грамотрицательные бактерии. Средние размеры – 2,5-4х0,5 мкм. Спор и капсул не образуют. Подвижны – лофотрихи, жгутиков обычно 4-5, они часто покрыты чехликами и имеют колбовидные утолщения на концах.
Культуральные свойства
Хеликобактеры – микроаэрофилы; оптимальная температура 370С.
Наиболее оптимальные среды – КА и ША.
Некоторые штаммы проявляют гемолитическую активность (α-гемолиз).
На плотных средах через 48-72 часа образуют мелкие (до 1 мм) прозрачные, блестящие колонии, содержащие бактерии с характерной морфологией; по мере старения в колониях начинают преобладать кокковидные формы.
В жидких средах образуют поверхностную голубовато-серую пленку и незначительное помутнение среды.
Биохимические свойства.
Хеликобактеры оксидаза- и каталазаположительны; проявляют уреазную, транспептидазную и фосфатазную активности; образуют сероводород; не свертывают молоко; не ферментируют глюкозу.
Антигенная структура
У хеликобактеров выделены О-, Н- и поверхностные белковые Аг, определяющие типоспецифичность возбудителя.
Факторы патогенности
К факторам вирулентности хеликобактеров относят:
их способность к адгезии и движению;
фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды;
цитотоксин, действующий на эпителиальные клетки;
токсин,нарушающий межклеточные контакты;
ЛПС (О-Аг и эндотоксин), который стимулирует выделение ИЛ-8, миграцию нейтрофилов и способствует развитию острого воспаления.
Патогенез
При пероральном попадании возбудителя большое число бактерий скапливается в антральной части желудка, т.к. там мало клеток, секретирующих соляную кислоту, что помогает выживанию бактерий на поверхности эпителия в предрасположенном организме. Благодаря факторам вирулентности - адгезии и движению, хеликобактеры активно проникают в слизистую оболочку. Проникая через слизь, хеликобактеры прикрепляются к эпительным клеткам (чаще в области межклеточных пространств), проникают в железы слизистой оболочки. Хеликобактеры продуцируют фосфолипазы, разрушающие фосфолипиды. Их токсичность связана с цитотоксином, действующим на эпителиальные клетки, токсином, нарушающим межклеточные контакты, и с ЛПС (О-Аг, эндотоксин). ЛПС стимулирует выделение ИЛ-8, миграцию нейтрофилов и способствует развитию острого воспаления. Локализация в области межклеточных ходов обусловлена хемотаксисом к местам выхода мочевины и гемина. Под действием фермента уреазы мочевина превращается в аммиак, который повреждает слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки. Кроме того, аммиак нейтрализует соляную кислоту желудка, способствуя выживанию хеликобактерий. Активность бактерий приводит к разрушению слизи и обусловливает контакт желудочного сока непосредственно с эпителием органа. Кроме того, на поверхности клеток образуются белки теплового шока, которые рассматривают как реакцию на стресс. Это приводит к аутоиммунному воспалению и образованию язв в желудке и двенадцатиперстной кишке. H.pylori выделяются в 80% случаев язвенных гастритов.
Эпидемиология, патогенез, клиника.
Хеликобактеры являются представителями нормальной микрофлоры животных. Пути передачи человеку окончательно не выяснены. По-видимому, люди заражаются алиментарным путем. Клинические проявления не отличаются от обычных симптомов гастродуоденитов; ни один из симптомов не патогномоничен для хеликобактериоза. Обычно пациенты обращаются к врачу по поводу упорных болей в области эпигастрия. Последние купируются антибактериальными препаратами, например метронидазолом и фуразолидоном. Прием традиционных препаратов обычно не оказывает выраженного эффекта, а после их отмены развиваются рецидивы заболевания.
H. fennelliae и H. сinaedi вызывают проктиты, проктоколиты у гомосексуалистов; в редких случаях бактерии выделяют из испражнений при гастроэнтеритах.
Лабораторная диагностика.
Используют методы:
бактериологический – основной;
микроскопический – основной;
серологический.
Материалы для исследования – биоптаты слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки. Бактерии распознают по типичным морфологическим особенностям. Для выявления возбудителя в материале обычно применяют фазово-контрастную микроскопию, определяющую характерную подвижность.
Хеликобактеры хорошо видны в гистологических препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином или импрегнированных серебром по Уортину-Старри.
Хорошие результаты дает люминесцентная микроскопия мазков, окрашенных акридиновым оранжевым.
В последние годы широко распространены методы косвенного обнаружения H.pylori в биоптатах; чаще всего используют определение уреазной активности (кло-тест); используют такой тест, как обнаружение продуктов распада мочевины в выдыхаемом воздухе.
Для получения чистых культур применяют кровяные среды (5-17% эритроцитов), дополненные антибиотиками (цефсулодин). На 5-7 сутки культивирование при 370С наблюдают видимый рост. Принадлежность культур к хеликобактерам определяют по характерной морфологии микроорганизмов и колоний; «винтообразной» подвижности; способности к росту в микроаэрофильных условиях и отсутствию роста в аэробных и анаэробных условиях и при температуре 250С и 420С.
Из биохимических свойств наиболее часто определяют оксидазную, каталазную и уреазную активности.
Для иммунодиагностики хеликобактериозов используют биоптаты слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки для цитологических и бактериологических исследований и кровь.
В настоящее время разработаны тест-системы для определения Аг хеликобактеров в биоптатах с помощью ИФА, а также в сыворотке в РСК. В крови определяют JgM, JgA, JgG – антитела с помощью ИФА, в ПЦР – гены бактерий.
Профилактика и лечение
Для лечения используют полусинтетические пенициллины, аминогликозиды, фторхинолон. Вакцинопрофилактика не разработана.
.