1.4. Структура, активация и функции тромбоцитов в первичном гемостазе.

1.4.1. Морфология тромбоцитов

Тромбоциты, син.кровяные пластинки, – форменные элементы крови, небольшие (0,5-3,0мкм), дисковидные, безъядерные клетки (РИС 7), образуются из цитоплазмы крупных (2—50мкм) костномозговых клеток– мегакариоцитов.

Время жизни тромбоцитов 7-10 дней.

Тромбоциты содержат множество гранул: α- гранулы, плотные гранулы, лизосомы, а так же органеллы: митохондрии, аппарат Гольджи. Цитоскелет тромбоцита отвечает за изменение формы клетки, секрецию и ретракцию сгустка. Он формируется субмембранными филаментами актина, пучками микротрубочек, а также плотной тубулярной системой, которая образуется из эндоплазматического ретикулума мегакариоцита, и системой открытых каналов, так называемой открытой канальцевой или каналикулярной системой. Клетки секретируют содержимое гранул через систему открытых каналов, которые сообщаются друг с другом и внешней средой и создают широкую поверхность для экзоцитоза и для взаимодействия мембранных рецепторов с агонистами. При связывании агониста, называемого индуктором, с рецептором на мембране клетки происходит активация тромбоцитов.

1.4.2. Индукторы агрегации тромбоцитов

Индукторы делят на два типа:

слабые: АДФ (в низких концентрациях), адреналин, серотонин, которые вызывают обратимую агрегацию, и

сильные: тромбин, коллаген, АДФ (в высоких концентрациях), тромбоксан А₂, фактор, активирующий тромбоциты, которые стимулируют необратимую агрегацию.

1.4.3. Обратимая и необратимая агрегация

Активация тромбоцитов ведет к клеточным ответам, формально различным, но на самом деле неразрывно связанным друг с другом:

1) морфологическим: структурным изменениям, ведущим к формированию тромбоцитарной пробки; и

2) биохимическим: освобождению и синтезу специфических компонентов.

Под действием индукторов активированные тромбоциты изменяют форму от дисковидной до сферической; образуют псевдоподии, объединяются в рыхлые агрегаты. Затем следует секреция содержимого гранул во внешнюю среду через систему открытых каналов. При действии тромбина на тромбоциты уже через 5 секунд после стимуляции происходит изменение формы клетки, централизация гранул, секреция их содержимого в систему открытых каналов и далее во внеклеточную среду. Сложная система сократительных белков участвует в сохранении формы клетки, главные из которых - актин, миозин, тропонин, актин-связывающий белок, система микротрубочек. Все эти белки участвуют в реализации действия индуктора.

1.4.3.1. Активация тромбоцитов коллагеном

Действие агонистов на тромбоциты осуществляется через специфические рецепторы (Таблица 1).

Коллаген субэндотелия служит эффективным субстратом связывания тромбоцитов к поврежденному участку сосуда и активатором клеток, поддерживая их стабильную адгезию, активацию и рост тромба через два основных рецептора – ГПVI и интегрин 21 (ГП IaIIa)(Рис 5).

Активация коллагеном рецептора ГП VI может “сдвигать” интегрины 21 и IIb3 из низкоаффинного в высокоаффинное состояние, приводя к активации тромбоцитов и стабильному прикреплению клеток к поврежденной стенке сосуда.

Адгезия тромбоцитов к коллагену через интегрин 21 также стимулирует внутриклеточную сигнализацию, которая ведет к активации Srk киназ, PLC2 , повышению концентрации внутриклеточного кальция ( [Ca ²⁺]_i ) . Эта реакция приводит к стабилизации адгезии, распластыванию тромбоцитов, их активации и экспозиции на поверхность тромбоцита интегрина IIb3. Интегрин IIb3 через мостики фибриногена рекрутирует еще не адгезированные тромбоциты.

За адгезией и активацией тромбоцитов адгезивными белками следует стадия агрегации активированных тромбоцитов, стимулируемая освобождаемыми клетками или вновь синтезированными индукторами агрегации, и создание активной поверхности для осуществления механизмов свертывания крови.

В конце концов сигнальный каскад ведет к фосфорилированию и активации PLC2, повышению концентрации внутриклеточного кальция, активации PKC, освобождению AДФ и стимулированию эффективной активации тромбоцитов.