3. Фазы первичного тромбоцитарно-сосудистого гемостаза

В процессе формирования тромбоцитарного тромба выделяют следующие основные фазы:

• инициирования – прикрепление тромбоцитов к субэндотелию и их адгезия;

• распространения – активация и агрегация тромбоцитов под действием специфических агонистов;

• стабилизации и ингибирования.

Процесс осуществляется благодаря существованию на поверхности или экспонированию на мембрану активированного тромбоцита рецепторов, связывающих агонисты, лиганды и субстраты (Таблица 2).

Таблица 2

Рецепторы и лиганды активации тромбоцитов

Фазы ответа	Лиганды, агонисты, субстраты	Основные рецепторы
Инициирование Прикрепление и адгезия тромбоцитов	Фактор фон Виллебранда Коллаген Фибриноген/фибрин Фибронектин Ламинин	ГП Ib/IX/V ГП VI, 21 IIb3 51 61
Распространение Активация Тромбоцитов Агрегация	Тромбин АДФ Тромбоксан А2 Адреналин Фибриноген Фактор фон Виллебранда Фибронектин	PAR1, PAR4 ГП Ib/IX/V P2Y1 , P2Y12 TP 2A IIb3 IIb3
Стабилизация	P- селектин CD40 лиганд	PSGL-1 IIb3
Ингибирование	Простациклин (PGI2) Оксид азота (NO) АДФ- аза	IP

4. Адгезия тромбоцитов к субэндотелию.

Известны две основные стадии адгезии тромбоцитов:

1. стадия контакта или прикрепления,

2. стадия распластывания.

Прикрепление тромбоцитов к поврежденной стенке сосуда обеспечивает фактор фон Виллебранда (VWF) .

1.3.4.1. Фактор фон Виллебранда: структура и свойства

Фактор фон Виллебранда(VWF), маркер повреждения эндотелия, синтезируется в клетках эндотелия и в предшественниках тромбоцитов - мегакариоцитах и запасается в Вейбела-Пэйлейда ( Weibel-Palade) тельцах эндотелиальных клеток и -гранулах тромбоцитов.

Зрелый фактор фон Виллебранда состоит из мультимеров, соединенных дисульфидными связями, с очень высокой молекулярной массой (20000кДа и более). Основа структуры фактора фон Виллебранда – димер, который состоит из двух субъединиц, соединенных СOOH-концами, и служит блоком для строительства большого мультимера. Каждая субъединица фактор фон Виллебранда состоит из модулей-доменов (D’-D3-A1-A2-A3-D4-B-C1-C2) с определенными функциями. Именно поэтому фактор фон Виллебранда называют модульным белком (Рис 4).

Домены- функциональные единицы, устойчивые к протеолизу, соединяются участками, чувствительными к протеолизу. В молекуле фактора фон Виллебранда обнаружены домены, ответственные за связывание фактора VIII свертывания крови, рецепторов тромбоцитов  гликопротеиновых трансмембранных комплексов: ГП Ib/IX/V и интегрина IIb3 (ГП IIb/IIIа), а также гепарина и коллагена.

Последовательность типа С1 отвечает за связывание с интегрином IIb/3. В его структуре обнаружен реактивный участок молекулы - уникальный трипептид с последовательностью Арг1744-Гли1745-Асп1746 (RGD), который отвечает за связывание с интегринами клеток (Рис 4). Аналогичный пептид содержится в структуре многих адгезивных белков  фибриногена, фибронектина, тромбоспондина, витронектина и других (Таблица 3).

Участки связывания VWF с ГП Ib формируются только после конформационных изменений в структуре А1 дисульфидной петли после иммобилизации фон Виллебранда фактора на коллагене субэндотелия. Нативная молекула растворимого VWF плазмы не способна связывать рецептор тромбоцитов ГП Ib.

На первой стадии адгезии (стадии контакта) происходит связывание фон Виллебранда фактора с ГП Ib комплекса ГП Ib/IX/V(Рис 5).

Рассмотрим подробнее реакции эндотелия на повреждение. Из телец Вейбела-Пэлейда эндотелиальных клеток освобождается мультимер – фон Виллебранда фактор, который связывает коллагены субэндотелия и рецептор тромбоцитов  гликопротеин Ib (ГП Ib) и обеспечивает мобилизацию и активацию тромбоцитов (Рис 4,5).

Фон Виллебранда фактор через два типа А доменов (А1 и А3) связывается с коллагенами субэндотелия, которые обнажаются при повреждении сосуда. А3 домен обеспечивает достаточно прочную иммобилизацию фон Виллебранда фактора на коллагенах типа I или типа III (субэндотелия), а домен А1 отвечает за связывание фактора с коллагеном типа VI. Кроме коллагенов другие компоненты субэндотелиального матрикса могут участвовать в связывании и иммобилизации фон Виллебранда фактора. Иммобилизованный на коллагене субэндотелия VWF через участок А1 домена взаимодействует с -цепями ГП Ib и “привязывает” клетки, выполняя функции “мостика” между коллагеном и тромбоцитами (Рис 5).

Итак, фон Виллебранда фактор, иммобилизованный на коллагене субэндотелия, связывается с  цепями ГП Ib и “привязывает” клетки, выполняя функции “мостика” между коллагеном и тромбоцитами (Рис 5).