Рабочие места учеников

Что должно быть на каждом рабочем столе	Предоставляется	Необходимое количество на группу из 4 человек
Микроскоп	Учителем	1
Предметные стекла	Учителем	2
Покровные стекла	Учителем	4
pH-индикаторные бумажки (pH 4-7 или шире)	Учителем	3
Стаканчик с 5 мл йогурта	Готовится учителем	1
Пробирка с 5 мл молока	Готовится учителем	1
Засеянные чашки Петри с предыдущего урока		3
Стерильные микробиологические петли	Входит в набор	3
Зубочистки	Учителем	6
Фломастер (маркер)	Учителем	1
Стерильная вода	Готовится учителем	1 мл
Увеличительное стекло (если это возможно)	Учителем	1
Общий стол
Флакон с культурой E. coli HB101 K-12 на льду	Готовится учителем	1

*Распределите йогурты разных марок между разными группами, пусть ученики сравнят разные йогурты между собой. Каждая группа должна подписать пробирку своими инициалами, чтобы сохранить ее до следующего урока.

Подготовка к уроку 2

1. Приготовьте пастеризованное молоко:

А. Налейте около 300 мл молока в стакан и нагрейте до начала появления пузырьков (86-93°С), затем выключите нагрев и дайте молоку остыть. Храните в холодильнике, если не используете в течение 2 часов.

Б.Разлейте примерно по 5 мл в 48 культуральных пробирок (6 на каждую группу). Храните в холодильнике.

2. Приготовьте раствор ампициллина.

Ампициллин поставляется лиофилизованным в маленьких флаконах. Добавьте 1 мл стерильной воды непосредственно во флакон – у вас получится раствор с концентрацией 30 мг/мл. Закройте флакон и перемешайте. Напишите на флаконе концентрацию ампициллина. Раствор ампициллина может храниться в холодильнике до 1 месяца или в морозилке до года.

С помощью стерильной пипетки, добавьте 250 мкл стерильной воды прямо во флакон с лиофилизованными бактериями. Закройте флакончик и встряхните, чтобы перемешать. Храните бактерии в холодильнике до момента использования (лучше использовать их в течение 24 часов)

Рабочие места учеников

Что должно быть на каждом рабочем столе	Предоставляется	Необходимое количество на группу из 4 человек
Микроскоп	Учителем	1
Предметные стекла	Учителем	3-6
Покровные стекла	Учителем	3-6
pH-индикаторные бумажки (pH 4-7 или шире)	Учителем	2
Стаканчик с 5 мл йогурта (оставшийся с предыдущего урока)	Готовится учителем	1
Пробирка с 5 мл пастеризованного молока	Готовится учителем	1
Чашки Петри с агаризованной средой LB-сахар (LBS)	Готовится учителем	3
Стерильные микробиологические петли	Входит в набор	3
Зубочистки	Учителем	3
Фломастер (маркер)	Учителем	1
Стерильная вода	Готовится учителем	1 мл
Общий стол
Флакон с раствором ампициллина на льду	Готовится учителем	1

Подготовка к уроку 3

Рабочие места учеников

Что должно быть на каждом рабочем столе	Предоставляется	Необходимое количество на группу из 4 человек
Пробирки с молоком	С урока 2	6
Микроскоп	Учителем	1
Предметные стекла	Учителем	4
Покровные стекла	Учителем	8
pH-индикаторные бумажки (pH 4-7 или шире)	Учителем	6
Чашки Петри, засеянные йогуртом	С урока 2	1
Зубочистки	Учителем	коробка

Краткое руководство по лабораторной работе

Урок 1: выявление возможного возбудителя болезни

1. Сравните внешний вид, запах и pH молока и йогурта. Запишите ваши наблюдения.

2. Подпишите левую часть предметного стекла «йогурт» и правую - «молоко».

3. Окуните зубочистку в йогурт, смешайте с каплей воды на левой части стекла и накройте покровным стеклом.

4. К апните каплю молока на правую часть стекла и накройте покровным стеклом.

5. Р ассмотрите молоко и йогурт под микроскопом. Опишите и зарисуйте то, что вы видите.

6. Повторите шаги 1-5 с другим видом йогурта.

Постулат 2: Выделение и культивирование возможных возбудителей.

7. Подпишите три чашки Петри с LBS-агаром с нижней стороны (не на крышке) как «молоко», «йогурт» и «E. coli» соответственно, и вашими инициалами.

8. Посейте штрихом молоко, йогурт и культуру E. coli как написано ниже, для того, чтобы получить одиночные колонии:

А) Осторожно проведите 10 раз петлей по агару в разные стороны, не выходя за пределы левого верхнего угла чашки, как показано на рисунке. У вас получится штрих. Не повредите поверхность агара.

Б) Поверните чашку на 45° и, зацепив петлей конец первого штриха, сделайте еще один штрих, как описано выше , на этот раз не выходя за пределы второго сектора. Не погружайте петлю в исходный материал! Не касайтесь петлей первого штриха.

В) Поверните чашку еще на 45° и, зацепив второй штрих, сделайте третий.

Г) Поверните чашку на 45° и сделайте финальный штрих

Такая процедура приводит к разведению исходной культуры до отдельных клеток, каждая из которых даст индивидуальную колонию. Согласно определению, индивидуальная колония – это потомство одной клетки.

9. Переверните чашки и поставьте их в термостат на 37°С на 24-48 часов.