3.Реакции клеточного иммунитета. Кооперативное взаимодействие клеток при активации cd8 т-клеток.

I. Реакция цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ; CD8 Т-клеток)При вирусной инфекции, опухолевом росте.цитолитического действия: рас­познавание АГ предшественниками, их пролиферацию и дифференцировку до зрелых эффекторов, 1—связывание прими­рованных CD8 Т-клеток с поверхностным чужеродным АГ. 2- «летального удара»- повышение проницаемости клеточ­ной мембраны, 3-увеличением объема = разрыв мембраны клет­ки-мишени и ее гибель.

II. Реакция в смешанной культуре лимфоцитов1.индукцию цитотоксических Т-лимфоцитов in vivo, когда для получения клеток-эффекторов иммунизируют животных антиге­нами клеток-мишеней (обычно это аллогенные или опухолевые клетки);2.индукцию in vitro, когда созревание цитотокси­ческих Т-клеток инициируют в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ)(в качестве стимуляторов для примирования -клетки лимфоидной ткани, генетически отличающи­еся от распознающих предшественников CD8 Т-лимфоцитов, мо­дифицированные вирусом или иным антигеном сингенные клетки).

III. Реакция гиперчувствительности замедленного типа Кох 1891 г. Введение интактным морским свинкам вирулентных ба­цилл туберкулеза = быстро­му распространению возбудителя по организму, развитию остро­го инфекционного процесса.если бациллы имму­низированным животным. = возбудитель оказывается локализованным в месте инъекции в ре­зультате развития воспалительной реакции. Клетки воспалитель­ного узелка представлены в основном макрофагами и лимфоци­тами.

Резуль­татом специфического взаимодействия является секреция клетка­ми Т_н1 хемоаттрактантов, привлекающих в зону проникновения антигена макрофаги из кровотока.

IV. Реакция трансплантат против хозяинаРеакцию оценивают либо по увеличению селезенки или лим­фатических узлов. Отношение числа клеток в «опытном» лимфатическом узле к числу клеток в «конт­рольном» узле дает индекс РТПХ. индекс более 1,3, реакция+.

Введенные чужеродные лимфоциты распознают неродственные антиген реципиента и формируют антигенспецифическую реак­цию V. Реакция отторжения трансплантата Время отторжения 14 дней.два компонента: специфический, связанный в основном с активно­стью цитотоксических Т-клеток, и неспецифический, имеющий характер воспаления.

Сво­бодные трансплантационные антигены, поступающие в лимфоидную ткань, захтрансплантата (/); созревание и накопление эффекторов транс­плантационной реакции отторжения в периферической, ближай­шей к трансплантату лимфоидной ткани (П); разрушение транс­плантата (III).в реакцию отторжения трансплантата включа­ются как специфические участники: CD8 Т-клетки (ЦТЛ), CD4 Т-клетки воспаления (Т_н1), специфические иммуноглобулины, так и неспецифические — активированные макрофаги и натураль­ные киллеры.

Инициация дифференцировки наивных CD8 Т-клеток в зре­лые цитотоксические Т-лимфоциты осуществляется несколькими способами. 1- связан с дендритными клет­ками. Этот тип АГпрезентирующих клеток характеризуется выраженной экспрессией костимулятора В7, что само по себе достаточно для активации синтеза ИЛ-2. Этот цитокин обеспечи­вает активную пролиферацию и дифференцировку наивных Т-кле­ток по аутокринному пути стимуляции.

цитотоксический ответ к некоторым вирусам и чужеродным трансплантатам требует присутствия CD4 Т-клеток. М.Б это связано с недостаточной иммуногенностью ви­русных и трансплантационных антигенов для формирования пер­вого сигнала от Т-клеточного рецептора или слабой экспрессией В7, формирующего второй сигнал. При включении в ответ CD4 Т-клеток, которые способны стимулировать антигенпрезентиру-ющие клетки к синтезу В7, создаются нормальные условия для двойной стимуляции наивных CD8 Т-клеток.

3- связан с прямым действием на них ИЛ-2, секретируемого распознавшими антиген CD4 Т-клетками. Этот способ про­является в условиях отсутствия индуцируемой экспрессии В7 под влиянием CD4 Т-клеток.

Билет №7

1. Антиген. Общая характеристика и основные свойства АГ. Классификация АГ.

2. Иммунологическая толерантность (ИТ). Определение понятия. Современные представления о механизме развития ИТ. Биологическое и клиническое значение ИТ.

3. Общая характеристика и механизм реакции преципитации (РП). Значение и практическое применение РП в биологии и медицине.

1. Общая характеристика и классификация антигенов.

АГ – чужеродные для организма соединения (химические вещества), свободные либо входящие в состав клеток и способные вызывать иммунный ответ.

АГными свойствами обладают все клетки животных и растений, яды биологического происхождения, сложные компоненты, состоящие из полисахаридов, липидов, белков, вирусов, бактерий, эндо- и экзотоксины, грибы, простейшие.

Свойства АГ:- чужеродность, антигенность (способность вызывать иммунный ответ), иммуногенность (способность создавать иммунитет), толерантность (способность изменять иммунный ответ), специфичность Степень иммунного ответа на различные АГ может быть различна. Наиболее свойствами антигенности обладают вещества, лежащие за физиологическим барьером организма. Иммуногенность относится к микробным АГ, которые обеспечивают создание иммунитета к возбудителям инфекционных болезней. АГ должны иметь Mr не менее 20 тыс Да. С ростом Mr растет и иммуногенность. Корпускулярные АГ более иммуногены, чем растворимые. Среди последних наибольшей иммуногенностью обладают вещества, агрегирующие АГ. Если у АГ имеются разнообразные детерминанты, то внутри устанавливается определенная иерархия детерминант – иммуннодоменантность. В спектре образования АТ преобладает АТ конкретной ведущей детерминанты.

Иммуногенность зависит от: 1)степени чужеродности вещества, чем больше филогенетических различий, тем сильнее иммунный ответ. Если чужеродный АГ сходен с внутренним АГ, то он слабее по иммуногенности. Mr вещества Должен быть не менее 1кДа. Вещества с низкой Mr обладают низкой иммуногенностью. С ростом полимерности белков увеличивается их иммуногенность. 2)Структуры АГ. Клеточные АГ всегда сильнее, чем гуморальные. В структуре молекулы имеет значение химическая структура, т.е. наличие ароматических колец. Играет роль соотношение гидрофобных и гидрофильных молекул. 3)Иммунной реактивности организма. 4)Дозы и пути введения. Малые дозы вызывают слабый иммунный ответ, средние – нормальный, большие – явление иммунотолерантности. Чем больше вводится вещества АГ, тем больше АТ. Толерантность индуцируется при введении высоких свойств белков и полисахаридов. Специфичность связана с особенностями строения веществ, по которым АГ отличаются друг от друга. Антигенность определяется АГ детерминантой, т.е. необходимо участие молекул АГ, с которым соединяется АТ. Оно определяется взаимодействием АГ с комплементарным для него АТ. Число детерминант может быть различно у разных АГ – это валентность. Чем больше молекула, тем выше валентность. Классификация АГ: по чужеродности: 1ксеноАГ (невидоспецифичные), 2аллоАГ (особями данного вида), 3аутоАГ. В некоторых случаях можно выявить белкт собственных тканей при соединении их с бактериальным белком, токсином. 4собственно клетки с иммунной активностью. по типу вызываемого иммунного ответа: 1иммуногены, 2аллергены, 3толерогены, 4трансплантационные АГ. по связи с тимусом: 1Т-зависимые, 2Т-независимые. по локализации в организме: 1О-АГ (липополисахариды клеточной стенки), 2М-АГ (жгутиковый белок), 3К-АГ (капсулярный гликопротеид). по специфичности носителя: 1видовые, 2типовые, 3групповые, 4органные (тканевые), 5стадийные, 6штамм специфичные.

2. ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ТОЛЕРАНТНОСТЬ. Помимо специфического иммунного ответа организм спосо­бен развивать специфическую неотвечаемость к антигену. Это яв­ление приобретенной ареактивности стали называть иммунологи­ческой толерантностью. Феномен приобретенной толерантности (терпимости), как и феномен иммунологической реактивности, строго специфичен, и индуцируемая неотвечаемость к одному ан­тигену не отменяет полноценного ответа к другому. Набор антигенов, потенциально способных инициировать толерантность, фак­тически неотличим от того, к которому формируется специфи­ческий иммунный ответ. Известно воспроизведение толерантно­сти к аллоантигенам гистосовместимости, экспрессирующимся на поверхности клеток, белкам, синтетическим полипептидам, гаптенам, полисахаридам, живым микроорганизмам.

Экспериментальное воспроизведение толерантности дало в руки исследователей понимание того факта, что явление специфичес­кой неотвечаемости представляет собой физиологически нормаль­ный процесс, проявляющий себя в онтогенезе и направленный на создание ареактивности к собственным антигенам. Нарушение этого процесса приводит к аутоиммунным поражениям — имму­нологической реакции на собственные антигены организма. Услов­но, при изучении явлений толерантности удобно дифференциро­вать два проявления этого феномена: толерантность к своему («self» tolerance) и искусственно индуцируемую толерантность к чуже­родному антигену («non-self» tolerance). В основе двух форм прояв­ления толерантности лежат одни и те же клеточные механизмы. Кроме того, следует различать толерантность, индуци­руемую в раннем онтогенезе, от толерантности, воспроизводи­мой у взрослых организмов. В этом случае явление специфической неотвечаемости может включать различные механизмы. Впервые толерантность к клеточным антигенам была обнару­жена американским исследователем Р. Оуеном в 1945 г. у дизиготных телят-близнецов.

3. Для постановки реакции преципитации (РП) используют высокодисперсный антиген в виде прозрачного или слегка опалесцирующего раствора. При соединении антигена (преципитиногена) с антителом (преципитином) в присутствии электролита (0,85 %-ного раствора NaCl) происходит взаимодействие с образованием видимых агрегатов (помутнение, хлопья) частиц, которые постепенно осаждаются на дно пробирки. Осадок получил название «преципитат».

РП протекает в две фазы. В первой происходит соединение антигена с антителом, во второй — коагуляция (преципитация) специфического комплекса антиген — антитело в растворе электролита с образованием видимых частиц (серо-белые хлопья, помутнение). Поиск антигена в исследуемом материале проводят с заведомо известной преципитирующей сывороткой. РП высокоспецифична и чувствительна, позволяет обнаружить антиген в разведении до 1:10 млн. Применяется в практике для идентификации некоторых вирусов, бактерий, для исследования кожевенного сырья на сибирскую язву, при установлении фальсификации мяса и др. Антиген для реакции получают путем экстракции из микробных культур, тканей и органов павших животных, а также из кожевенного сырья. Антитела получают путем гипериммунизации животных антигенами. Существуют различные методы постановки РП. В практике чаще всего применяют реакцию кольце-преципитации и диффузионной преципитации в агаровом геле. Реакция кольцепреципитации (реакция Асколи) применяется для обнаружения сибиреязвенного антигена в животном сырье (кожи, кусочки внутренних органов, мышцы). Антиген получают путем экстрагирования в физрастворе горячим или холодным способом. Полученный антиген наслаивают тонкой стеклянной пипеткой на преципитирующую сыворотку, либо сыворотку подслаивают под антиген в узких пробирках. При положительном результате через несколько минут на границе соприкосновения антигена и. антитела появляется преципитат, напоминающий серо-белое кольцо или диск. Реакция диффузионной преципитации в геле (РДП). Эта реакция считается наиболее чувствительной и эффективной при иммунологических исследованиях. В отличие от жидкой среды, где образуется одна линия (полоска) преципитации, в условиях геля реагенты (антигены и антитела) диффундируют навстречу друг другу и на границе соприкосновения (встречи) образуются белые линии преципитата.

Билет № 8