Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МЕТОДИЧКА ИЕРСИНИОЗЫ 2010.doc
Скачиваний:
8
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
551.94 Кб
Скачать

Идентификация иерсиний.

 Типичные для иерсинии колонии отсевают на скошенный МПА (с каждой чашки 1-2 колонии), инкубируют при 22-25°С в течение 24 ч и затем проводят изучение морфологических, тинкториальных и биохимических свойств выделенных культур.

 Из суточных агаровых культур бактерий, выращенных на скошенном МПА, делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют.

Y.enterocolitica, Y.pseudotuberculosis - биполярные полиморфные овоидные или палочкообразные грамотрицательные бактерии размером от 0,5 до 2,0 мкм, обладающие перетрихиальными жгутиками, не образующие спор, расположенные одиночно или короткими цепочками.

 Для определения подвижности бактерий выделенные культуры выращивают при 22-25°С и при 37-38°С в полужидком МПА (0,25-0,3%). Посев проводят уколом в столбик полужидкого агара. Подвижными считают штаммы, выросшие диффузно, вызывающие помутнение среды; неподвижными - растущие только по ходу укола.

Определение подвижности бактерий можно проводить у односуточных агаровых культур в препарате "раздавленная капля". Y.enterocolitica подвижны при 22-25°С и неподвижны при 37-38°С.

 Выраженность ряда биохимических характеристик иерсиний зависит от температуры инкубирования, большая часть признаков лучше выявляется при 26—28°С, чем при 37°С, а некоторые совсем не определяются в ходе обычного инкубирования при 37°С. Часть биохимических характеристик иерсиний имеет четкое температурозависимое выражение: образование ацетилметилкарбинола (тест Фогеса—Проскауэра), β-галактозидазная и орнитиндекарбоксилазная активности проявляются при 25°С, но не 37°С; реакция с метиловым красным, напротив, положительна при 37°С и только иногда - при 25°С. Инкубирование при 26°С более эффективно для выявления подвижности, активности орнитиндекарбоксилазы, лецитиназы, нитратредуктазы, образования ацетил метилкарбинола, реакции с метиловым красным, утилизации цитрата (атипичными штаммами), галотолерантности, ферментации инозита и сахарозы. Четкая температурозависимость установлена в отношении подвижности, лецитиназной, орнитиндекарбоксилазной активности, образования ацетилметилкарбинола и ферментации инозита. При 37°С более четко выявляется только признак индолообразования и отсутствия газообразования при ферментации глюкозы, что в целом свидетельствует о более высокой ферментативной активности Y.enterocolitica при 26°С и большей стабильности результатов в тестах при этой температуре. Поэтому целесообразно проведение окончательной идентификации этих микроорганизмов при 26°С, а для выявления температурозависимых свойств — дополнительно при 37°С с учетом всех тестов не ранее 48 ч инкубирования.

 Биохимические свойства. Y. pseudotuberculosis не ферментируют лактозу, сахарозу, раффинозу, инозид, сорбит, инулин и D-арабинозу, но ферментируют до кислоты глюкозу, галактозу, α-арабинозу, левулезу, маннозу, ксилозу, рамнозу, мальтозу, маннит и салицин; редуцируют нитраты, метиловый синий; вступают в реакцию с метиловым красным, образуют каталазу, обладают уреазной активностью; не образуют ацетилметилкарбинол в реакции Фогеса-Проскауэра при температурах 26 и 37°С.

Y. enterocolitica расщепляют мочевину, ферментируют углеводы с образованием кислоты без газообразования (глюкозу, сахарозу,манит, сорбит, мальтозу), не утилизируют цитрат, не образуют сероводород, не ферментируют лактозу, рамнозу, раффинозу, не обладают фенилаланиндезаминазой, лизиндекарбоксилазой и аргининдегидролазой, образуют ацетилметилкарбинол в реакции Фогеса-Проскауэра при температуре 26 - 28 °С, а при 37 °С – реакция отрицательная.

 У выделенной культуры определяют серовар и чувствительность к антибиотикам.