3.4.3.Основные стадии фибринолиза

Известны две основные стадии фибринолиза: превращение плазминогена в плазмин и деградация фибрина плазмином (рис. 3-41).

РИС 3-41

Основные компоненты и стадии фибринолиза.

Обе стадии фибринолиза: превращение плазминогена (Pmg) в плазмин активаторами – t-PA(тканевой активатор плазминогена) и u-PA (активатор плазминогена урокиназного типа), и расщепление фибрина плазмином до продуктов деградаци (ПДФ), осуществляются на фибриллах фибрина или поверхности клеток, на которых локализованы рецепторы плазминогена (PmgR) и его активаторов (t-PAR и u-PAR) в области повреждения сосуда. t-PA и u-PA активируют плазминоген в плазмин, который гидролизует фибрин. Активность плазмина и t-PA блокируется ингибиторами: a2- Антиплазмином (a2-АП) и ингибитором активаторов плазминогена первого типа (PAI-1).

Первая стадия осуществляется преимущественно на фибриллах фибрина или поверхности клеток в области повреждения сосуда. t-PA активирует плазминоген в плазмин, который гидролизует фибрин, и отвечает за удаление фибрина из сосудистого русла. Активность плазмина и t-PA блокируется ингибиторами. Прикрепление плазминогена и t-PA к фибрину обеспечивают специфические лизин-связывающие участки в крингл-структурах молекул плазминогена и активатора t-PA ( рис. 3-39, рис.3-40)

3.4.4.Различие функций тканевого активатора плазминогена (t-pa) и активатора плазминогена урокиназного типа (u-pa),

Существование двух активаторов плазминогена ставит вопрос о различии их функций. Общепринята точка зрения, что t-PA служит активатором лизиса фибрина и тромболизиса в сосудах, а основная роль u-PA заключается в стимуляции протеолиза компонентов межклеточного матрикса, что обеспечивает миграцию клеток. Эти функции обусловлены структурными особенностями активаторов (рис. 3-39). Как видно на рисунке, основное различие активаторов сосредоточено в N-концевой некаталитической области, ответственной за связывание ферментов с компонентами клеток и клеточного окружения. Именно N-концевые домены t-PA – пальцевидный домен и второй крингл-домен отвечают за специфическое связывание молекулы t-PA с фибрином. В комплексе фибрин-t-PA-плазминоген происходит быстрая активация плазминогена в плазмин, т.к. каталитическая эффективность t-PA в комплексе при активации связанного плазминогена на три порядка выше, чем свободного профермента.

Известно, что многие типы клеток через рецепторы связывают плазминоген и его активаторы, обеспечивая повышение скорости активации и защиту связанного плазмина от ингибирования ₂–антиплазмином. Кроме того, связанный с поверхностью клеток t-PA сохраняет ферментативную активность и защищен от ингибирования PAI-1 (ингибитор активаторов плазминогена первого типа). Одним из t-PA рецепторов клеток эндотелия служит аннексин А2, который также связывает плазминоген, но с меньшим сродством. Аннексин А2 ускоряет активацию плазминогена t-PA и может играть роль в обеспечении жидкого состояния крови и не тромбогенности эндотелия. Кроме того, в гетеротетрамерном комплексе двух субъединиц аннексина А2 и двух субъединиц белка S100A10 скорость активации плазминогена t-PA значительно выше чем при связывании с одним аннексином А2. Получены доказательства того, что белок S100A10 скорее чем аннексин А2 является рецептором плазминогена и t-PA, тогда как функция аннексина А2 состоит в заякоривании белка S100A10 на клеточной поверхности.

Критическим для проявления активности урокиназы в физиологических условиях является связывание с рецептором u-PAR, который обнаружен на эндотелии, моноцитах, нейтрофилах, гладкомышечных и других клетках.

u-PA cвязывается со специфическим клеточным рецептором (u-PAR), что приводит к повышению активации связанного с клетками плазминогена.

Рецептор урокиназы не имеет трансмембранного и внутриклеточного доменов, а заякорен на мембране клетки ковалентной связью С-конца молекулы рецептора с гликозилфосфатидилинозитолом мембраны. Такая структура обеспечивает высокую подвижность рецепторов u-PAR и их кластеризацию на лидирующем полюсе мигрирующей клетки. Связанная с рецептором урокиназа создает высокий протеолитический потенциал, необходимый для локального протеолиза белков межклеточного матрикса и направленного движения клетки.

Связывание u-PA с рецептором приводит к усилению образования плазмина, что обусловлено как активацией плазминогена, так и расщеплением под действием образующегося плазмина одноцепочечного u-PA (scu-AP) до обладающего высокой активностью tcu-AP.

Связывание плазминогена и его активаторов на поверхности эндотелия обеспечивает участки локального образования плазмина. Концентрирование протеолитической активности на поверхности клеток может играть важную роль в сохранении жидкого состояния крови и поддержании не тромбогенных свойств эндотелия сосудов (рис. 3-38).