3.3. Антикоагулянтная система протеина с.
3.3.1.Ингибитор образования тромбина- протеин с
Протеин С (РС) – один из факторов протромбинового комплекса, профермент активированного протеина С (АРС), природного антикоагулянта, прерывающего процесс тромбиногенеза. Структура имеет высокую степень гомологии с прокоагулянтными факторами VII, IX и X (табл. 2-4).
Впервые ингибитор образования тромбина из протромбинового комплекса крови, названный аутопротромбин II-A, был открыт в 1960г в лаборатории Сигерса (США). В 1969г ингибитор был получен из продуктов протеолиза тромбином белков протромбинового комплекса в лаборатории биохимии и физиологии свертывания крови МГУ (Баскова, Струкова). В 1976 году в лаборатории Дж.Стенфло выделен и очищен ингибитор из плазмы быка, названный протеином С, поскольку при хроматографии протромбинового комплекса фракция белка с ингибиторной активностью элюировалась третьей по счету, после прокоагулянтных факторов – FX и протромбина. Протеин С синтезируется в печени в форме одноцепочечной молекулы, как все витамин К-зависимые белки. Кроме того, РС обнаружен в почках, яичках, эндотелии сосудов, кератиноцитах кожи человека, а также мозге и легких.
Структурные особенности протеина с
Профермент состоит из нескольких доменов: аминоконцевого (NH2) отрицательно заряженного; двух доменов, подобных эпидермальному фактору роста (EGF); связывающего дипептида (Lys156-Arg157); пептида активации и трипсиноподобного протеазного (SP) домена на карбоксильном (СООН) конце молекулы (табл. 3-6). В результате посттрансляционной модификации молекулы происходят следующие изменения структуры профермента:
1) выщепление связывающего дипептида Lys156-Arg157 и превращение одно-цепочечной формы в двух цепочечную молекулу, состоящую из тяжелой и легкой цепей, соединенных дисульфидной связью;
2) дополнительное γ-карбоксилирование девяти остатков глутаминовой кислоты NH2 конца легкой цепи РС и образование Gla (Гла)-домена;
3) гидроксилирование остатка Asp в EGF1 домене;
4) гликозилирование.
Кроме Гла-домена, легкая цепь протеина С содержит два домена, подобных эпидермальному фактору роста (EGF1 и EGF2 домены) (табл.3- 6 , рис. 3-36). Тяжелая цепь протеина С содержит короткий отрицательно заряженный пептид активации Lys158-Arg169 и протеазный домен (SP).
Рис. 3-36
Доменная структура протеина С и активированного протеина С (АРС).
Профермент протеин С состоит из нескольких доменов. На аминоконце (NH2-) легкой цепи молекулы протеина С локализован GLA-домен, который связывается с эндотелиальным рецептором протеина C (EPCR) или мембраной клетки. Далее следуют два домена, подобные эпидермальному фактору роста (EGF). В тяжелой цепи протеина С локализован пептид активации (черный), отщепляемый тромбином в комплексе с тромбомодулином, и трипсиноподобный протеазный домен на карбоксильном (СООН-) конце молекулы. В протеазном домене молекулы АРС после отщепления пептида активации формируется активный центр.