4.Микробиологическая диагностика дифтерии. Исследование на носительство дифтерийных бактерий.

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служит отделяемое зева, носа.

Микроскопический этап. Из исследуемого материала делают! мазки и окрашивают их метиленовым синим Леффлера или краской Нейссера. Выявляют наличие палочек дифтерии по морфоло­гическим признакам и наличию телец Бабеша-Эрнста, что явля­ется дифференциальным признаком для коринебактерий дифтерии. Их можно определить и в люминесцентном микроскопе, окрашивая препарат раствором корифосфина.

Бактериологический этап. Выделение чистой культуры начи­нают с посева исследуемого материала на элективные питатель­ные среды для коринебактерий: среду с теллуритом (Клауберга II, Германа), хинозольную среду Бучина, 5% кровяной агар. После появления колоний, часть одной из них высевают на среду, для определения токсигенности, а часть — в столбик среды для опре­деления цистиназы. Для идентификации чистой культуры иссле­дуют биохимические свойства культуры и ставят пробу на токсигенность методом преципитации в агаре.

5. Серотерапия. Специфическая профилактика дифтерии. Особенности иммунитета при токсических инфекциях.

Серотерапия — это применение иммунных сывороток животных или человека с лечебной целью при инфекционных заболеваниях.

Лечебные иммунные сыворотки делятся на антитоксические, антимикробные и антивирусные.

Серотерапию применяют в тех случаях, когда возбудители инфекции или их токсины уже проникли в организм и появились первые клинические признаки инфекционного заболевания.

Терапевтический эффект зависит от дозы и активности лечебных сывороток, титруемых по Международному стандарту в единицах действия (ME), от степени очистки, сроков начала лечения и способа введения. Чем позже начата серотерапия, тем меньше ее эффективность. Поэтому спустя 4— 5 дней от начала болезни серотерапия в ряде случаев бесполезна, так как возбудители инфекции или их токсины уже проникли внутрь клеток тканей человека, где они защищены от действия лечебных сывороток.

Применяют лечебные сыворотки, чаще внутримышечно, реже — подкожно и внутривенно. При внутривенном введении действие сыворотки наступает быстрее, и этот способ введения рекомендуется в экстренных случаях — при тяжелом течении заболевания (тяжелые формы столбняка, дифтерии и др.).

Профилактика. В профилактике дифтерии главная роль отво­дится иммунизации. Используют дифтерийный анатоксин, входя­щий в АКДС, АДС, АДС-М препараты.

6.Характеристика возбудителей туберкулеза. Биологические типы микобактерий туберкулеза.

Возбудители туберкулеза —м. Tuberculosis, м. Bovis

Морфология. Микобактерии туберкулеза — тонкие прямые пли слегка изогнутые палочки длиной 1—4 мкм, шириной 0,3— 0,6 мкм (М. bovis несколько короче и толще), неподвижны, не образуют спор и капсул. В культурах встречаются зернистые формы, нитевидные, ветвящиеся.

Тинкториальные свойства. В связи с высоким содержанием липидов (до 50%) микобактерии туберкулеза кислото- и щелочеустойчивы и окрашиваются по методу Циля-Нильсена в ярко-красный цвет. Грамположительны.

Культуральные свойства. Возбудители туберкулеза культиви­руются в аэробных условиях на элективных питательных средах, содержащих растертое содержимое куриных яиц, картофель, гли­церин, аминокислоты, различные соли. Наибольшее признание получили среды Левенштейна-Иенсена (яичная среда с добавле­нием картофельной муки, глицерина, солей и малахитовой зелени для подавления роста других микроорганизмов), среда Петраньяни (яичная среда с добавлением молока, картофельной муки, кусоч­ков картофеля и глицерина), картофельно-глицериновая среда, состоящая из кусочков картофеля и глицерина, глицериновый бульон. Можно использовать синтетическую среду Сотона, содер-кащую аспарагин, глицерин, цитрат железа, фосфат калия, суль­фат магния. Для подавления посторонней микрофлоры в яичные среды добавляют малахитовую зелень. М. bovis для роста не нуждается в глицерине.

На плотных питательных средах микобактерии туберкулеза образуют морщинистые, суховатые, с неровными краями колонии-(R-формы). Некоторые виды атипичных микобактерии на свету или в темноте образуют каротиноидные пигменты, в связи с чем колонии приобретают желтую или оранжевую окраску. На жид­ких средах появляется нежная пленка, которая постепенно утол­щается и приобретает бугристо-морщинистый вид и желтоватый цвет. Бульон остается прозрачным.

Возбудители туберкулеза характеризуются медленным ростом, что связано с длительным периодом генерации клеток, и для вы­деления М. tuberculosis требуется 12—25 дней, а М. bovis — 24— 40 дней.

Ферментативные свойства. Микобактерии туберкулеза явля­ются биохимически активными микроорганизмами. Ферментируют алкоголь, глицерин, многие углеводы до кислоты, продуцируют лецитиназу, уреазу, каталазу. Некоторые биохимические свойства (продукция уреазы, термостабильной каталазы, пероксидазы, ни-котинаминазы, восстановление нитратов, накопление в среде ниацина), а также культуральные, используются для дифференциации микобактерий.

Токсинообразование. Туберкулезные микобактерии экзотоксин не образуют, токсическими свойствами обладают многие химиче­ские компоненты клетки: фосфатиды, жирные кислоты, миколовая кислота, гликолипид (так называемый корд-фактор). Механизм действия корд-фактора заключается в предохранении бактерий от разрушения фагоцитами хозяина и подавлении миграции лейко­цитов.

Антигенная структура. Антигены микобактерий туберкулеза представлены белковыми, полисахаридными и липоидными компонентами клеток. М. tuberculosis и, М. bovis в антигенном отношении сходны. Серовары не установлены.

Всего известно около 70 видов микобактерий, но только 5 из них вызывают заболевание туберкулезом, которые объединяются в туберкулезный комплекс - M.tuberculosis complex:

1. M.tuberculosis humanus (M.tuberculosis) - человеческий тип, вызывающий до 85% случаев туберкулеза (по другим данным до 92 %).

2. M.tuberculosis bovinus (M.bovis) - бычий тип, вызывающий 10-15% случаев туберкулеза (по другим данным до 5%).

3. M.tuberculosis africanus (M.africanus) - африканский тип, вызывающий до 90% случаев туберкулеза в Южной Африке.

4. M.tuberculosis microti (M. microti) - мышиный тип, редко вызывает заболевание.

5. M.tuberculosis bovinus (M. bovis BCG) - вакцинный штамм, применяющийся для специфической профилактики от туберкулеза.

Патогенность для животных. Туберкулез распространен среди крупного рогатого скота, свиней, лошадей, кошек, собак, кур, индеек. Из лабораторных животных к М. tuberculosis высокочув­ствительна морская свинка, менее чувствительны кролики, М. bоvis и атипичные микобактерий непатогенны для морских свинок и кроликов.

7. Эпидемиология и патогенез туберкулеза.

Патогенез. Источник возбудителя в природе — человек с актив— ной формой туберкулеза (главным образом, легочного), реже животные и птицы, больные туберкулезом.

Пути передачи возбудителей — воздушно-капельный, алиментарный, контактный, внутриутробное инфицирование плода через плаценту.

Входные ворота инфекции — слизистые оболочки и кожа. Заражение чаще всего происходит воздушно-капельным путем, и поэтому первичный очаг возникает в легких. Образуется так назы­ваемый первичный туберкулезный комплекс (продуктивный тип поражения), который характеризуется наличием воспалительного процесса в легком (инфекционная гранулема, в центре которой находятся микобактерий) и регионарного лимфаденита. Туберку­лезная гранулема рассматривается как область реакции антиген-антитело. В ее формировании принимает участие корд-фактор. При доброкачественном течении первичного туберкулезного комп­лекса происходит рубцевание очага, его кальцинация и затихание воспалительного процесса. При этом освобождения организма от возбудителей, как правило, не происходит. Такие инфицированные люди обладают, с одной стороны, относительным иммунитетом (нестерильный иммунитет), а с другой — потенциально скрытой формой туберкулеза, которая может активироваться при сниже­нии резистентности организма.

Другой исход первичного туберкулезного комплекса — некроз элементов гранулемы, казеозный распад ее, прорыв в окружающие ткани и их обсеменение бактериями. Процесс может распро­страниться на весь орган (например, на все легкое), микобактерий уберкулеза лимфогенно и гематогенно из места первичной лока-лизации распространяются по организму, вызывая различные кли­нические формы: туберкулез органов дыхания, мочеполовой системы, кишечника, костей, суставов, мозговых оболочек, кожи, глаз. Генерализация туберкулезного процесса зависит от количества микобактерий, их вирулентности, резистентности и гиперчувтвительности макроорганизма.

Воспалительная реакция при туберкулезе, особенно легких, может развиваться и по экссудативному типу в виде пневмонии. Этот тип поражения характеризуется развитием отека, скоплением вокруг микобактерий полиморфноядерных лейкоцитов, а позже — моноцитов. Процесс может заканчиваться полной абсорбцией экссудата, некрозом ткани или трансформацией в продуктивный тип поражения.

Человек обладает естественной резистентностью к туберку­лезной палочке, и из всех инфицированных (около 80% всего взрослого населения старше 20 лет) заболевает не более 10%. Отмечено существование генетической предрасположенности к за­болеванию туберкулезом.

Пути выделения возбудителя из организма зависят от клини­ческой формы туберкулеза: с мокротой, с испражнениями, с мочой.

Исход инфекции. У больных со сниженной резистентностью организма возможен переход в хронический процесс. Первичный туберкулез протекает довольно тяжело и дает сравнительно вы­сокую летальность у ранее неинфицированных и непривитых людей. При экзогенной суперинфекции болезнь протекает тяжелее, чем при обострении первичного туберкулеза. Наиболее уязвимы люди в пожилом и старческом возрасте.