Иммуноблоты

Иммуноблоты сывороточной и цереброспинальной жидкости (CSF) на наличие антител к S. neurona у лошадей с ЕРМ почти всегда бывают положительными (из-за высокой чувствительности). Но, к сожалению, результаты этих тестов столь же часто бывают положительными и у лошадей, не страдающих ЕРМ (из-за слабой специфичности). Очевидно, последние результаты наиболее проблематичны при сывороточных иммуноблотах, но у лошадей с признаками, характерными для ЕРМ, специфичность иммуноблотов с CSF также, вероятно, составляет не более 70 %. Для этого существует несколько причин, которые заключаются в следующем:

1. Заражение CSF кровью во время забора проб

2. Заражение CSF сывороточными протеинами до забора проб из-за преодоления гематоэнцефалического барьера

3. Лабораторные ошибки

Недавно автор данной статьи провел исследование в трех различных лабораториях, проводивших данный тест, и пришел к выводу, что этот последний пункт является более важным, чем было принято считать. Два подсчитанных индекса – коэффициент альбумина и индекс иммуноглобулина G (IgG) – были выдвинуты в качестве показателей заражения CSF и выработки антител внутри ЦНС соответственно. Строгий теоретический и экспериментальный анализы показывают, что подсчет этих индексов выполняется недостаточно хорошо и не стоит расходов и усилий, потраченных на их интерпретацию. Программа Relative Quantity (RQ) CSF value (Neogen, Inc., Lexington, Ky.) предлагает способ подсчета реакции антител на S. neurona в качестве несвязанной величины между 5 и 100. Высокие значения больше подтверждают диагноз, чем низкие. Кроме того, эта величина должна уменьшаться при положительной реакции на лечение. В целом в чистой пробе CSF, взятой у лошади с нормальной цитологией CSF и численностью эритроцитов (RBC) менее 50/мкл, наличие положительного иммуноблота не противоречит диагнозу ЕРМ, но не подтверждает его. В отличие от этого, отрицательный результат сывороточного или CSF иммуноблота в значительной степени подтверждает отсутствие у лошади ЕРМ.

Анализ цереброспинальной жидкости

У многих лошадей с ЕРМ бывает нормальная цитология CSF. Примерно в 5 % случаев у них имеются нарушения, заключающиеся в слабом повышении концентрации протеина (обычно < 120 мг/дл) и клеток (обычно < 50 клеток/мкл). Чрезвычайно высокая концентрация клеток (> 1000 клеток/мкл) в большей степени свидетельствует о наличии бактериального менингита, в то время как промежуточные концентрации говорят об остром вирусном заболевании. Использование цитологии CSF имеет особо важное значение при попытках отличить ЕРМ от WNVE. В последнем случае численность клеток часто составляет 20-150 клеток/мкл преимущественно одноядерных. При некоторых заболеваниях цитология CSF помогает в постановке диагноза. Примерами могут служить ксантохромия, высокая концентрация протеина и нормальная численность клеток, что характерно для миелоэнцефалопатии, вызванной EHV-1, или в некоторых случаях наличие опухолевых клеток метастатической меланомы или лимфомы. В случаях, когда WNVE является альтернативным диагнозом, данный анализ проводится всегда.