Клонирование геномной ДНК альфа- и бета- цепей TCR рецептора T-клеток / дневник

Дневник научно-исследовательской работы студента

Работа выполнена студенткой 4 курса

ветеринарно-биологического факультета

Медведевой Д.А.

Научные руководители: д.б.н. Казанский Дмитрий Борисович

аспирант Звездова Е. С.

Сроки выполнения работы:

24.04.2006 – 29.04.2006

24.04.06

1. Амплификация α и β цепей TCR методом полимеразной цепной реакции (PCR).

2. Лигирование PCR фрагментов в кассету pTZ57R.

25.04.06

1. Откалывание выросших за ночь колоний, наращивание колоний в 2 мл среды.

2. Проверка клонов методом PCR.

3. Выделение плазмидной ДНК.

4. Сиквенс клонов.

26.04.06

1. Наращивание позитивных клонов в 60 мл среды.

2. Выделение плазмидной ДНК.

3. Рестрикция α и β цепей TCR из кассеты pTZ57R.

27.04.06

1. Достраивание нуклеотидов по сайту рестрикции BamH I.

2. Выделение α и β цепей TCR из легкоплавкой агарозы.

3. Лигирование α и β цепей TCR в кассеты pTα и pTβ соответственно.

28.04.06

1. Откалывание выросших за ночь колоний, наращивание колоний в 2 мл среды.

2. Проверка клонов методом PCR и рестрикций.

3. Выделение плазмидной ДНК.

4. Сиквенс клонов.

29.04.06

1. Наращивание позитивных клонов в 60 мл среды

2. Выделение плазмидной ДНК.

3