2.5. Небелковые азотсодержащие вещества крови. Клиническое значение определения мочевины, креатинина в крови.

К ним относятся конечные продукты обмена: мочевина – 50%, аминокислоты – 25%, мочевая кислота, креатин, креатинин, билирубин, индикан, холин, нуклеотиды, полипептиды. Азот, входящий в состав этих соединений - «остаточный азот», т.е. остающийся в фильтрате после осаждения белков.

В норме - 14,2-28,4 ммоль/л. При некоторых заболеваниях эта величина повышается (азотемия).

Азотемия:

1.Ретенционная – почечная и внепочечная (сердечно-сосудистая недостаточность, снижение АД, снижение почечного кровотока).

2.Продукционная – усиленный распад белков тканей: злокачественные новообразования, ожоги, кахексия.

В настоящее время вместо остаточного азота крови определяют содержание мочевины и креатинина.

В норме: Мочевина- 3,3-8,3 ммоль/л

Креатинин-0,044-0,11 ммоль/л.

2.6. Клиническое значение биохимического анализа крови.

В норме химический состав крови постоянен, но может отражать малейшие изменения в метаболизме организма. Учитывая доступность этой биологической жидкости и возможность многократного проведения биохимического анализа крови, создается возможность по анализу крови установить диагноз, прогноз заболевания, а также осуществить контроль эффективности лечения.

3. Лабораторно-практические работы.

3.1. Методика определения общего белка и белковых фракций в сыворотке крови рефрактометрическим методом.

ПРИНЦИП МЕТОДА состоит в том, что степень рефракции обусловлена количеством растворенных в растворе частиц. Практически коэффициент рефракции сыворотки крови довольно точно свидетельствует о количественном содержании в ней белка.

ХОД АНАЛИЗА:

Взять 2 пробирки для центрифугирования. В одну отмерить 0,6 мл сыворотки крови, а в другую - 0,6 мл воды. Затем той же пипеткой в обе пробирки добавить по 0,6 мл насыщенного раствора сернокислого аммония. Раствор сернокислого аммония к сыворотке крови добавляют маленькими порциями, медленно, чтобы не образовались пузырьки при этом происходит осаждение глобулина. Легкими поворотами содержимое пробирки осторожно смешивают и центрифугируют пробирку с сывороткой крови 5 мин при скорости 1000 – 1500 об/мин.

Пока происходит центрифугирование сыворотки, рефрактометрируют:

1. Н₂О (дистиллированная)

2. Полунасыщенный раствор сернокислого аммония (2-ая пробирка).

3. Неосажденную сыворотку.

Записывают результаты рефрактометрирования - показатель рефракции (НД).

Рефракция солей сыворотки - величина постоянная и равна 0,002.

Из отцентрифугированной сыворотки берут каплю из прозрачного верхнего слоя и также рефрактометрируют.

РАСЧЕТ ДЛЯ АЛЬБУМИНОВ:

НД альбуминов = (НД осажденной сыворотки - НД полунасыщенного р-ра сернокислого аммония х 2 - 0,002/ показатель рефракции солей сыворотки).

1% р-р альбуминов имеет показатель рефракции равный 0,00177, затем рассчитывают процентное содержание альбуминов:

1% - 0,00177 1х НД альб.

Х% - НД альбуминов Х = 0,00177

РАСЧЕТ ДЛЯ ГЛОБУЛИНОВ:

НД альбуминов = (НД неосажденной сыворотки - НД воды - НД альбуминов - 0,002). 1% р-р глобулинов имеет показатель рефракции равный 0,00229. По пропорции находят содержание глобулинов:

1% - 0,00229 1х НД глоб.

Х% - НД глобулинов Х= 0,00229

По сумме альбуминов и глобулинов находят общий белок и коэффициент А/Г.