2. Цель и задачи

Цель настоящей работы – обучение методам регистрации и оценки различных показателей поведения животных в «открытом поле». В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие задачи:

1. Провести регистрацию поведения крысы и мыши в «открытом поле» с помощью автоматизированной системы Ethovision Noldus TM.

2. Сравнить показатели поведения крысы (№5) и мыши (CBA4) в «открытом поле».

3. Сравнить показатели поведения крысы и мыши в центре и на периферии арены «открытоого поля».

4. Оценить временную динамику изменения показателей поведения крысы и мыши в «открытом поле».

5. Оценить временную динамику изменения показателей поведения крысы и мыши в центре и на периферии арены «открытоого поля».

6. Проанализировать усредненные данные по всем животных. Оценить различия показателей поведения в «открытом поле» у самцов и самок крыс и мышей двух линий.

3. Методика

Объектом исследования были 20 грызунов: 10 крыс (пять самцов и пять самок) и 10 мышей (6 мышей линии CBA: 5 самцов и 1 самка, и 4 мыши линии С57BL/6: все самцы). Эксперимент проводился в арене диаметром 150 см и высотой 75 см, пол арены был покрыт линолеумом. Освещенность, измеренная сразу после эксперимента составила 52 лк в центре и 35 лк около борта.

Каждое животное поочереди помещали в центр арены и регистрировали поведение в течение 8 мин, по истечение которых животное вынималось из арены и помещалось в домашнюю клетку.

Регистрация передвижения животных проводилась с помощью системы видеотрекинга, состоявшей из аналоговой видеокамеры «Sony», расположенной на высоте 250 см от центра арены, и стандартного PC компьютера, оснащенного дополнительной платой видео ввода изображения (Frame grabber Picolo) и с установленным программным обеспечением EthoVision ver.8.0. Плата управляла яркостью и контрастностью изображения, с ее помощью осуществлялась его оцифровка и масштабирование. Программа EthoVision, позволяла запоминать изображение и переносить информацию в компьютер. В каждой пробе программа выделяла объект путем поточечного вычитания предварительно зафиксированного изображения пустой арены из поля с двигающимся объектом.

Область арены в программе EthoVision была разбита на две зоны: центр (круг диаметром, равным примерно половине диаметра арены) и периферию (кольцо вокруг центральной области). Программа автоматически регистрировала время нахождения в каждой зоне, длину пройденного пути в арене целиком и в обеих зонах по-отдельности, исходя из которой рассчитывала скорость передвижения в каждый момент времени. Также был установлен ручной ввод показателей поведения: частоты стоек, частоты и общей длительности эпизодов груминга и фризинга, количества болюсов. Также было проведено разбиение всего времени пребывания в арене на 2х-минутные интервалы. В результате были получены значения перечисленных показателей для всей арены за все время, для центра и периферии за все время, для всей арены за каждый 2х-минутный интервал и для центра и периферии за каждый двух-минутный интервал. Анализировались при этом следующие показатели.

1. По всей арене за все время тестирования (8 мин): длина пути (м), число стоек, средняя скорость (м/c), число эпизодов и общая продолжительность груминга и фризинга, число болюсов.

2. По всей арене за 2х-минутные интервалы: длина пути (м), число стоек, число эпизодов и общая продолжительность груминга и фризинга.

3. По зонам (центр и периферия) за 8 мин: длина пути (м), число стоек, скорость (м/c).

4. По зонам за 2х-минутные интервалы: длина пути (м), число стоек, время в зонах (с).

Так же были получены изображения треков, раскрашенные в соответствие со скоростью в каждой точке трека.

Анализировалось как показатели индивидуального поведения животных (крыса № 5 и мышь CBA4), так и усредненные по группе. Распределение грызунов по группам представлено в таблице 1.

Таблица 1. Распределение грызунов по группам.

Название группы	N	Вид животных	Линия животных	Пол животных
Rat m	5	Rattus norvegicus (Серая крыса)	Long-Evans	самцы
Rat f	5	Rattus norvegicus (Серая крыса)	Long-Evans	самки
CBA	5	Mus musculus (домовая мышь)	CBA	самцы
С57BL/6	4	Mus musculus (домовая мышь)	С57BL/6	самцы

Примечание: одна мышь линии CBA (CBA4) не вошла к усреднение, т.к. единственная отличилась по полу от остальных представителей группы CBA.

Для оценки значимости различий показателей между группами был использован статистический непараметрический тест Манна-Уитни. В качестве показателя корреляции между переменными использовался коэффициент Спирмана. Уровень значимости статистических различий α = 0.05.