45

ОСНОВЫ БИОТЕХНОЛОГИИ РАСТЕНИЙ

Культура растительных клеток и тканей

Учебное пособие

2002

УДК

ББК

Основы биотехнологии растений. Культура клеток и тканей: Учебное пособие / Составители: Сорокина И.К., Старичкова Н.И., Решетникова Т.Б., Гринь Н.А.

Рекомендовано к изданию

УМК биологического факультета СГУ им. Н.Г.Чернышевского;

кафедрой методики преподавания биологии и экологии.

СОДЕРЖАНИЕ:

Введение . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5

Тема 1. Техника культивирования растительного материала на искусст-

венных питательных средах.

Работа 1. Организация биотехнологической лаборатории . . . . . . . . . . . 6

Работа 2. Приготовление питательных сред для культивирования клеток

и тканей in vitro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7

Работа 3. Способы стерилизации в биотехнологии . . . . . . . . . . . . . . . . .. 10

Работа 4. Способы стерилизации растительных эксплантов. . . . . . . . . 11

Работа 5. Техника работы в ламинаре при культивировании стерильных

проростков. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

Тема 2. Микроклональное размножение растений и получение безвирус-

ного посадочного материала

Работа 1. Вычленение апикальных меристем и регенерация растений. . 14

Работа 2. Пролиферация побегов и микрочеренкование стерильных

проростков. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

Работа 3. Индукция корнеобразования при микроклональном размноже-

нии растений. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16

Работа 4. Получение микроклубней картофеля in vitro. . . . . . . . . . . . . . . 17

Работа 5. Иммуноферментный анализ. Тестирование растительного

материала на содержание вирусов. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Работа 6. Получение безвирусного посадочного материала методом

термотерапии в сочетании с культивированием апикальных

меристем. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

Работа 7. Получение безвирусного посадочного материала методом

химиотерапии в сочетании с методом апикальных меристем. 20

Тема 3. Дедифференциация и каллусогенез в культуре растительных

клеток и тканей.

Работа 1. Получение каллусов из листьев табака. . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21

Работа 2. Получение каллусов из незрелых зародышей и узлов кущения

пшеницы. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22

Работа 3. Получение каллусов из корешков фасоли. . . . . . . . . . . . . . . . . 23

Работа 4. Субкультивирование каллусов. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

Тема 4. Суспензионные культуры.

Работа 1. Получение и культивирование суспензии. . . . . . . . . . . . . . . . . 25

Работа 2. Подсчет плотности суспензии. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26

Работа 3. Определение степени агрегированности и жизнеспособности

суспензии. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27

Работа 4. Получение клеточных клонов на агаризованных средах.

Метод плейтинга. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28

Тема 5. Гормональная регуляция в культуре клеток и тканей.

Работа 1. Индукция органогенеза и соматического эмбриогенеза в

каллусной ткани табака под действием фитогормонов. . . . . .30

Работа 2. Индукция деления клеток и роста клеток растяжением под

действием ауксина и гиббереллина. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31